技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種海洋生物提取物抗腫瘤活性的測(cè)定方法，包括如下步驟：（1）取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的貼壁的腫瘤細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液；離心去上清，再加入RPMI?1640培養(yǎng)液再次吹打沉淀中的細(xì)胞，使之形成單細(xì)胞懸液；（2）將細(xì)胞濃度稀釋至5×104ml-1；（3）將細(xì)胞加入96孔培養(yǎng)板中，每個(gè)孔加入100μl；置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h；（4）加入海洋生物提取物樣品，用RPMI?1640培養(yǎng)液將樣品稀釋成5個(gè)濃度梯度，每孔加入180μL，4個(gè)平行孔；（5）在37℃，48h培養(yǎng)后，每孔加入1mg/ml?MTT?100μl，培養(yǎng)4h；（6）棄去MTT用RPMI?1640洗板一次后，每孔加入DMSO?200μl，置搖床搖勻30min；最后用酶標(biāo)儀在570nm下檢測(cè)。本發(fā)明的測(cè)定方法簡(jiǎn)單快速，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。

技術(shù)研發(fā)人員：褚方強(qiáng)
受保護(hù)的技術(shù)使用者：青島清泉生物科技有限公司
文檔號(hào)碼：201510959557
技術(shù)研發(fā)日：2015.12.21
技術(shù)公布日：2017.06.27