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具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法與流程

文檔序號(hào):12346191閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法,其特征在于,所述篩選方法至少包括:

1)準(zhǔn)備候選的固氮藍(lán)藻藻株、至少2種土壤中的細(xì)菌以及微孔細(xì)胞培養(yǎng)板,設(shè)計(jì)包括各種排列的藻-藻共生實(shí)驗(yàn)以及藻-菌共生實(shí)驗(yàn)將藻株和細(xì)菌接種在微孔細(xì)胞培養(yǎng)基上培養(yǎng)以評(píng)價(jià)不同固氮藍(lán)藻以及固氮藍(lán)藻和細(xì)菌之間的相互作用;

2)測(cè)定每組實(shí)驗(yàn)中的固氮藍(lán)藻的葉綠素a以及細(xì)菌的CFU個(gè)數(shù);

3)選出葉綠素a增加2mg/L以上以及細(xì)菌CFU個(gè)數(shù)超過2×106/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法,其特征在于:所述步驟1)中每個(gè)實(shí)驗(yàn)方案中固氮藍(lán)藻的初始細(xì)胞接種密度為0.01-0.2g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法,其特征在于:所述固氮藍(lán)藻含有兩種或者三種固氮藍(lán)藻且每種固氮藍(lán)藻的干重相同。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法,其特征在于:所述步驟1)中的細(xì)菌選自現(xiàn)有微生物菌種庫或野外篩選到的土壤微生物,包括芽孢桿菌和解磷菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求1具有生物肥應(yīng)用潛力的固氮藍(lán)藻的篩選方法,其特征在于:所述步驟1)中每種細(xì)菌的初始CFU為1×105-2×106L-1。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)藻胞外多糖制備方法,其特征在于:所述步驟1)中的微孔細(xì)胞培養(yǎng)板的孔體積為3-5mL,培養(yǎng)基為BG11培養(yǎng)基,培養(yǎng)的溫度為20-30℃,光照強(qiáng)度為70-120μmol/m2/s,光暗循環(huán)(光:暗=14:10),培養(yǎng)時(shí)間為6-8天。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)藻胞外多糖制備方法,其特征在于:所述步驟1)中的設(shè)計(jì)藻-藻共生實(shí)驗(yàn)以及藻-菌共生實(shí)驗(yàn)是根據(jù)高通量原理獲得的實(shí)驗(yàn)方案。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)藻胞外多糖制備方法,其特征在于:還包括步驟3)設(shè)計(jì)盆栽實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證固氮藍(lán)藻對(duì)土壤肥力的影響。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藍(lán)藻胞外多糖制備方法,其特征在于:所述步驟3)中盆栽實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)溫度20-30℃,光強(qiáng)度為50-150mol/m2/s,光暗循環(huán)(光:暗=14:10)。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藍(lán)藻胞外多糖制備方法,其特征在于:所述固氮藍(lán)藻對(duì)土壤肥力的影響的判斷指標(biāo)為測(cè)定在土壤中加入固氮藍(lán)藻的第10-15天測(cè)定土壤中有效磷、可溶性有機(jī)碳及總可溶性氮含量的變化量。

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