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一種玉米轉(zhuǎn)化事件及其特異性鑒定方法和應用與流程

文檔序號:11804064閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種玉米轉(zhuǎn)化事件,其特征在于所述轉(zhuǎn)化事件以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū)或者以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū)。

2.如權(quán)利要求1所述的玉米轉(zhuǎn)化事件,其特征在于所述外源基因包括抗蟲基因和抗草甘膦基因。

3.如權(quán)利要求2所述的玉米轉(zhuǎn)化事件,其特征在于所述抗蟲基因的核苷酸序列為SEQ ID NO.4所示。

4.如權(quán)利要求2所述的玉米轉(zhuǎn)化事件,其特征在于所述抗草甘膦基因的核苷酸序列為SEQ ID NO.5所示。

5.如權(quán)利要求1所述的玉米轉(zhuǎn)化事件,其特征在于所述外源基因的核苷酸序列為SEQ ID NO.2所示。

6.一種權(quán)利要求1所述玉米轉(zhuǎn)化事件的特異性PCR鑒定方法,其特征在于以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū),用于特異性PCR鑒定的引物:

SP1:5’-TTTCTCCATAATAATGTGTGAGTAGTTCCC-3’;

RB-Test:5’-CTCGTCATCGACCAAGTCATGAAG-3’。

R1:5’-CGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGG-3’;

LB-test:5’-AAGACGTCCGGGGGAACCGTTGTTC-3’。

7.一種權(quán)利要求1所述玉米轉(zhuǎn)化事件的特異性PCR鑒定方法,其特征在于以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū),用于特異性PCR鑒定的引物:

LB-15T:5’-CTAAAACCAAAATCCAGTACTAAAATCC-3’;

LB-15G:5’-GCCGTACGTTTCCCAGCC-3’。

RB-15T:5’-AGCTTGAGCTTGGATCAGATTGTCGT-3’;

RB-15G:5’-CGTACAGGGAGCTTAGGGGG-3’。

8.一種含權(quán)利要求1所述玉米轉(zhuǎn)化事件的植物細胞,其特征在于所述植物細胞含以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū)的轉(zhuǎn)化事件,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號CCTCC NO:P201506,保藏日期:2015年4月27日,保藏地址:中國武漢武漢大學,郵編430072。

9.一種含權(quán)利要求1所述玉米轉(zhuǎn)化事件的植物細胞,其特征在于所述植物細胞含以SEQ ID NO.14所示的核苷酸序列為外源基因的左側(cè)翼區(qū),以SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列為外源基因的右側(cè)翼區(qū)的轉(zhuǎn)化事件,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號CCTCC NO:P201607,保藏日期:2016年4月11日,保藏地址:中國武漢武漢大學,郵編430072。

10.一種權(quán)利要求1所述玉米轉(zhuǎn)化事件在制備抗蟲抗草甘膦玉米細胞中的應用,其特征在于所述方法為:利用含有所述玉米轉(zhuǎn)化事件的玉米材料與玉米育種材料進行雜交后,進一步進行回交,獲得所述抗蟲抗草甘膦玉米細胞。

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