技術(shù)特征：

1.一種用于鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的擴增引物，其特征在于，該引物的正義引物序列為：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反義引物為：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′。

2.一種用于鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的試劑盒，其特征在于，該試劑盒含A試劑和B試劑，其中

A試劑的組成如下：

2×反應緩沖液；

Mg²⁺ 4 mmol/L；

Taq酶 0.05U/μL

dNTP 400μmol/L；

正義、反義擴增引物各0.4μmol/L；

擴增引物：該引物的正義引物序列為：5′GACGATTATGATGATGGCCACTGAAC 3′，反義引物為：5′ CTCCCCATCCACCTGGACGAC 3′；

B試劑的組成如下：

TaaI內(nèi)切酶 1U/μL；

2×buffer Tango 。

3.權(quán)利要求2所述的試劑盒鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，采集待鑒別的鯛魚樣品，提取基因組DNA；

步驟二，以步驟一得到的DNA為模板進行PCR擴增；

步驟三，對步驟二的擴增產(chǎn)物進行酶切與電泳檢測；

步驟四，通過步驟三的電泳結(jié)果鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代，其中真鯛有3條條帶，分別為147bp，133 bp和71 bp；黑鯛有2條條帶，分別為231 bp和153 bp；雜交鯛有4條條帶，分別為231 bp，153 bp，133 bp和71 bp。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的方法，其特征在于，步驟二中PCR擴增體系為：PCR體系總體積20 μL，其中含權(quán)利要求2所述的試劑盒A試劑10μL ，DNA模板 100 ng～200 ng，用滅菌雙蒸餾水補足體積，最終PCR體系各組份的含量為：1×反應緩沖液，Mg²⁺ 2 mmol/L，dNTP 200μmol/L，上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.025U/μL，DNA模板 5～10ng/μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的方法，其特征在于，步驟二中PCR擴增條件為：94℃ 2min；94℃ 40s，60℃退火 40s，72℃ 40min，30個循環(huán)；72℃ 延伸5 min，4℃保存。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的方法，其特征在于，步驟三中酶切體系為：酶切體系總體積20 μL，其中含權(quán)利要求2所述的試劑盒B試劑10μL，步驟二中PCR反應產(chǎn)物10μL，最終酶切體系各組份的含量為：PCR反應產(chǎn)物0.5μL/μL ，1×buffer Tango，TaaI內(nèi)切酶0.5U/μL；65℃酶切2～16 h。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒別真鯛、黑鯛及其雜交后代的方法，其特征在于，步驟三中電泳為瓊脂糖凝膠電泳。