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一種花生DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)檢測基因以及花生物種的分子鑒定方法與流程

文檔序號:11838504閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種花生DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)檢測基因在檢測花生物種中的用途,所述的花生DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)檢測基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示:

gcgtggatga ggagatagcc aggatactcc agaacccgcc agaacagacg aaggaccaaa 60

tcgtgagagt ggagggagga ttcagagacg tcataagtcc tcgctgggga gagggaaaac 120

agtatgaaga tgaactagaa gaaagacaac gccaaccacc aagac 165。

2.一種權(quán)利要求1所述用途中使用的PCR引物對F1/R1,其特征在于:所述的PCR引物對F1/R1用于擴(kuò)增權(quán)利要求1中的花生DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)檢測基因,引物F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示:gcgtggatga ggagatagcc;

引物R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示:gtcttggtgg ttggcgttgt。

3.一種基于權(quán)利要求1所述用途的花生物種的分子鑒定方法,其特征在于包括以下步驟:1)、從待測樣品中提取目標(biāo)DNA;

2)、以目標(biāo)DNA為模板用權(quán)利要求2中所述的引物F1和R1進(jìn)行PCR擴(kuò)增;以無菌水為PCR空白對照,以花生基因組DNA為PCR陽性對照;

3)、將步驟2)中PCR擴(kuò)增出的基因片段用瓊脂糖凝膠電泳分離,經(jīng)溴化乙錠染色后置于凝膠成像系統(tǒng)中觀察,滿足以下條件則說明PCR擴(kuò)增結(jié)果可靠:空白對照擴(kuò)增無任何帶型,陽性對照有位于165bp的清晰、單一條帶;

4)、判斷目標(biāo)DNA的擴(kuò)增產(chǎn)物中是否特異性擴(kuò)增出165bp的條帶,若能擴(kuò)增出,則說明目標(biāo)DNA中含有花生DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)檢測基因,即可判斷所檢測樣品中含有花生成分。

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