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一種SPF雞腸道微生態(tài)制劑及制備方法和應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):12577351閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種SPF雞腸道微生態(tài)制劑,其特征在于,活性成分含有:梭桿菌2×106~6×109CFU/g、真桿菌1×106~4×109CFU/g、消化球菌2×107~6×1010CFU/g、雙歧桿菌2×107~8×1010CFU/g、乳酸桿菌1×107~8×1010CFU/g、類桿菌2×106~6×1010CFU/g和腸球菌3×107~8×1010CFU/g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的SPF雞腸道微生態(tài)制劑,其特征在于,所述的活性成分含有:梭桿菌1×108CFU/g、真桿菌1×108CFU/g、消化球菌1×109CFU/g、雙歧桿菌1×109CFU/g、乳酸桿菌1×109CFU/g、類桿菌1×108CFU/g和腸球菌1×109CFU/g。

3.一種權(quán)利要求1所述的SPF雞腸道微生態(tài)制劑的制備方法,其特征在于:將SPF雞的腸道菌群快速過濾后,取濾液上層懸液,加入經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基中,根據(jù)菌群中各菌種培養(yǎng)特性,分別在35~37℃培養(yǎng)24~72小時(shí),測(cè)定其OD600值達(dá)到1.0以上,將各菌種培養(yǎng)液混合,再按比例加入復(fù)合包囊材料,充分?jǐn)嚢瑁吹肧PF雞腸道微生態(tài)制劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:所述的各培養(yǎng)液混合時(shí),菌數(shù)比例為梭桿菌1份、真桿菌1份、消化球菌10份、雙歧桿菌10份、乳酸桿菌10份、類桿菌1份和腸球菌10份。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:所述的復(fù)合包囊材料為按質(zhì)量比1:1混合的明膠和阿拉伯膠;所述的SPF雞為100日齡以上。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,步驟包括:

1)采集SPF雞腸道菌群:

將100日齡以上的健康SPF雞的十二指腸、空腸、回腸和盲腸,稱重,加入5~10倍滅菌生理鹽水,用無菌剪刀剪碎,混勻后無菌過濾,濾液靜置10~60秒,取上層懸液;

2)菌群培養(yǎng):

a)配制分別用于選擇性培養(yǎng)SPF雞的腸道菌群中各菌種的培養(yǎng)基;

b)菌種培養(yǎng):

將步驟1)采集的上層懸液中含有的SPF雞腸道菌群的菌種活化后,按占培養(yǎng)基1%的接種量加入各選擇性培養(yǎng)基中,將滴種好的不同培養(yǎng)基分別在35~37℃培養(yǎng)24~72小時(shí),測(cè)定其OD600值達(dá)到1.0以上,得各不同菌種的選擇性培養(yǎng)液;

3)制備微生態(tài)制劑:將上步各選擇性培養(yǎng)液按比例混合,混合后培養(yǎng)液與明膠等復(fù)合包囊材料按質(zhì)量比4~6:1混勻,常溫?cái)嚢?~16小時(shí),靜置2~6小時(shí),制得SPF雞腸道微生態(tài)制劑,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法,其特征在于,所述的步驟1)中過濾時(shí)采用2~10層無菌紗布過濾。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法,其特征在于,所述的步驟2)中各菌種的培養(yǎng)基具體為為:

梭桿菌采用FS培養(yǎng)基:EG瓊脂1000ml,F(xiàn)S添加液10ml;所述的FS添加液制備方法為:結(jié)晶紫7mg,萬古霉素5mg,硫酸新霉素30mg,溶于弱堿性水中,總量為10ml;

真桿菌采用ES培養(yǎng)基:EG瓊脂1000ml,ES溶液50ml;所述的ES溶液制備方法為:丙酸鈉15g,裝入滅菌的燒瓶內(nèi),加入滅菌蒸餾水40ml,溶解后加入新霉素0.2g,粘桿菌素10mg,硫酸鏈霉素0.5g,滅菌的蒸餾水加至50ml;

消化球菌采用采用PS培養(yǎng)基:EG瓊脂1000ml,苯乙醇2ml,PS溶液10ml;所述的PS溶液制備方法為:結(jié)晶紫7mg,粘桿菌素10mg,醋酸砣0.2g,混合,滅菌蒸餾水加至10ml;

雙歧桿菌采用BDS培養(yǎng)基:EG瓊脂1000ml,BDS添加液50ml;所述的BDS添加液制備方法為:牛黃膽酸鈉2.5g,加入40ml的溫水中使之溶解,然后加0.5%煌綠水溶液0.5ml,新霉素0.5g,再以10%NaOH調(diào)pH使液體呈透明的綠色為止,最后用精制水加至50ml;

乳酸桿菌采用BLB培養(yǎng)基:NaCl 5g,蛋白胨10g,瓊脂20g,牛肝浸液940ml,葡萄糖1g,50%的蛋白胨水4ml,1%的苯胺藍(lán)3ml,半胱氨酸500mg,羊血60ml;

類桿菌采用MRS培養(yǎng)基:葡萄糖20g,蛋白胨10g,牛肉浸膏8g,酵母浸膏5g,K2HPO4 2g,MgSO4·7H2O 2g,MnSO4·4H2O 0.05g,檸檬酸銨2g,乙酸鈉5g,吐溫-80 1ml,瓊脂15g;

腸球菌采用EC培養(yǎng)基:胰胨20g,酵母浸膏5g,葡萄糖20g,Na2HPO4 4g,KH2PO4 4g,瓊脂20g,精制水1000ml,疊氮鈉400mg。

9.一種權(quán)利要求1所述的SPF雞腸道微生態(tài)制劑的應(yīng)用,其特征在于:用于肉雞、蛋雞,在進(jìn)雛第一天時(shí)按0.5%比例混飲,10天后再按0.5%混飲一次即可;亦可長期使用,使用時(shí)按0.2%添加即可。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,避免同時(shí)使用抗生素。

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