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一種高效自動(dòng)化的多肽合成方法與流程

文檔序號(hào):12573128閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種高效自動(dòng)化的多肽合成方法,其特征在于,按如下步驟進(jìn)行合成反應(yīng):

步驟(1)、使用樹脂作為不溶性的固相載體,將其投入合成儀反應(yīng)器中,并啟動(dòng)合成儀;

步驟(2)、將一個(gè)氨基被封閉基團(tuán)保護(hù)的氨基酸溶劑通過合成儀自動(dòng)加入到反應(yīng)器中,使得一個(gè)氨基被封閉基團(tuán)保護(hù)的氨基酸共價(jià)連接在固相載體上;通過加入相應(yīng)的溶劑反應(yīng)脫掉氨基的保護(hù)基,將第一個(gè)氨基酸接到了固相載體上;

步驟(3)、在步驟(2)反應(yīng)完成后,通過合成儀中蠕動(dòng)泵注入相應(yīng)序列氨基酸溶液,并吹入氮?dú)夤呐莼旌?,合成過程中采用微波加熱,提高合成速度;固相載體上的氨基酸中的氨基被封閉的第二個(gè)氨基酸的羧基通過活化反應(yīng)被活化,羧基被活化的第二個(gè)氨基酸再與已接在固相載體的第一個(gè)氨基酸的氨基反應(yīng)形成肽鍵,使得固相載體上生成一個(gè)帶有保護(hù)基的氨基酸肽鏈;

步驟(4)、通過合成儀廢液排放系統(tǒng)將步驟(3)完成后的廢液排出;

步驟(5)、通過合成儀的清洗管路對(duì)步驟(4)反應(yīng)后的合成半成品加入溶劑進(jìn)行清洗,清洗后將廢液排出;

步驟(6)、將步驟(5)完成后的反應(yīng)器中通過合成儀加入相關(guān)溶劑脫掉多肽合成物上氨基的保護(hù)基,然后進(jìn)行廢液排放,廢液排放完成后加入溶劑進(jìn)行清洗操作;

步驟(7)、將步驟(6)完成后的反應(yīng)器中通過加料系統(tǒng)加入對(duì)應(yīng)序列的合成氨基酸,控制加入量及合成溫度,完成合成反應(yīng)后,將廢液排出;

步驟(8)、循環(huán)重復(fù)步驟(4)、(5)、(6)、(7),使肽鏈從C端向N端生長(zhǎng),直至達(dá)到所需要長(zhǎng)度的肽鏈;

步驟(9)、通過加入相應(yīng)的溶劑反應(yīng)脫去保護(hù)基并水解肽鏈和固相載體之間的酯鍵,并進(jìn)行清洗,得到了合成好的氨基酸多肽產(chǎn)品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效自動(dòng)化的多肽合成方法,其特征在于:在多肽合成加料過程中,采用蠕動(dòng)泵進(jìn)行加料,通過蠕動(dòng)泵高精度控制加料量,大大減少了反應(yīng)因加料不精確所導(dǎo)致的反應(yīng)不充分,副反應(yīng)增多所導(dǎo)致的雜質(zhì)過多及分離提純困難;在合成多肽的反應(yīng)過程中,通過微波設(shè)備通入微波,提高反應(yīng)瓶?jī)?nèi)試劑的溫度,在反應(yīng)器內(nèi)布置多個(gè)反應(yīng)瓶同時(shí)進(jìn)行合成反應(yīng),采用轉(zhuǎn)盤帶動(dòng)多個(gè)反應(yīng)瓶繞微波發(fā)生器旋轉(zhuǎn),達(dá)到均衡溫度下進(jìn)行合成反應(yīng),采用紅外溫度傳感器進(jìn)行檢測(cè)反應(yīng)環(huán)境溫度,根據(jù)實(shí)測(cè)反應(yīng)環(huán)境溫度對(duì)微波進(jìn)行調(diào)整以控制溫度在合理反應(yīng)內(nèi)。

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