1.一種培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液為含有胎牛血清,L-谷氨酰胺,慶大霉素,兩性霉素B,堿性成纖維細(xì)胞生長因子bFGF,Y-27632和A-83-01的低糖DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基。
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液中各組分的濃度如下:胎牛血清5%~10%,L-谷氨酰胺0.35~0.50mg/L,慶大霉素40~60mg/L,兩性霉素B1~1.5mg/L,bFGF 1~4ng/L,Y-27632 8~15μmol/L,A-83-01 0.8~1.2μmol/L。
3.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液中各組分的濃度如下:胎牛血清5%,L-谷氨酰胺0.35mg/L,慶大霉素40mg/L,兩性霉素B1mg/L,bFGF 1ng/L,Y-27632 8μmol/L,A-83-01 0.8μmol/L。
4.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液中各組分的濃度如下:胎牛血清8%,L-谷氨酰胺0.40mg/L,慶大霉素50mg/L,兩性霉素B1.25mg/L,bFGF 2ng/L,Y-27632 10μmol/L,A-83-01 1.0μmol/L。
5.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液中各組分的濃度如下:胎牛血清10%,L-谷氨酰胺0.50mg/L,慶大霉素60mg/L,兩性霉素B1.5mg/L,bFGF 4ng/L,Y-27632 15μmol/L,A-83-01 1.2μmol/L。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述培養(yǎng)液在兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞分離和擴(kuò)增中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)液的制備方法,其特征在于,所述的制備方法包含如下的步驟:
1)配制低糖DMEM培養(yǎng)基:
取低糖DMEM培養(yǎng)基粉末加入注射用水溶解后,用Hepes調(diào)整PH值至7.2~7.4;過濾滅菌,配制得到低糖DMEM培養(yǎng)基;
2)在步驟1)的低糖DMEM培養(yǎng)基中加入胎牛血清,慶大霉素,兩性霉素B,Y-27632和A-83-01;終濃度分別為5%~10%,40~60mg/L,1~1.5mg/L,8~15μmol/L,0.8~1.2μmol/L;
3)使用前,在步驟2)的培養(yǎng)基中加入L-谷氨酰胺和bFGF,并使L-谷氨酰胺和bFGF的終濃度分別為0.35~0.50mg/L和1~4ng/L。