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一種通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的方法與流程

文檔序號:12249411閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于包括如下步驟:

第一步,將-80℃保存的吸水鏈霉菌井岡變種5008菌株的孢子懸浮液融化,將其涂布于含有固體培養(yǎng)基的平板上,然后將平板倒置,于37℃培養(yǎng)7-10d,待表面長滿青灰色孢子時(shí)取出,制備孢子活化液;所述的吸水鏈霉菌井岡變種5008菌株,Streptomyces hygroscopicus var.jinggangensis 5008,保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心,保藏號為CGMCC4.1026;

第二步,將孢子活化液與種子培養(yǎng)基按照體積比為1:1000的比例接種到種子培養(yǎng)基中,接種后于37℃,220rpm條件下培養(yǎng)20-28小時(shí);

第三步,將種子培養(yǎng)液與發(fā)酵培養(yǎng)基按照體積比為1:10的比例接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,接種后以37℃,220rpm條件下培養(yǎng)12-24h后,加入堿溶液直到發(fā)酵體系pH達(dá)到7.5-8.5,繼續(xù)發(fā)酵96-120h,發(fā)酵結(jié)束。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的堿溶液不含無機(jī)磷酸鹽離子。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的堿溶液為KOH溶液、NaOH溶液或NH3·H2O溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的堿溶液的滴加方式為緩慢沿壁逐滴滴加堿溶液,并迅速搖勻。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的堿溶液的濃度為2mol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的步驟三中,加入堿溶液前的培養(yǎng)時(shí)間為20h,加入堿溶液直到發(fā)酵體系pH達(dá)到8.0。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過pH沖擊來提高井岡霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于所述的固體培養(yǎng)基的組分為:黃豆餅粉20g/L、甘露醇20g/L以及瓊脂20g/L,余量為自來水;所述的種子培養(yǎng)基的組分為:玉米粉30g/L、黃豆餅粉22g/L、酵母粉10g/L、NaCl 2g/L以及KH2PO4 0.8g/L,余量為蒸餾水;所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的組分為:玉米粉100g/L、黃豆餅粉25g/L、酵母粉5g/L、NaCl 1g/L以及KH2PO4 1.5g/L,余量為去離子水。

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