1.一種三色堇種子浸泡法直接導(dǎo)入外源基因的遺傳轉(zhuǎn)化方法，其特征在于，采用已露白的三色堇種子作為轉(zhuǎn)化的受體材料，經(jīng)根癌農(nóng)桿菌浸泡介導(dǎo)目的基因?qū)胧荏w，利用卡那霉素作為選擇劑對轉(zhuǎn)化后的植株進(jìn)行篩選，通過PCR檢測及表型觀測篩選得到轉(zhuǎn)基因植株，所述的轉(zhuǎn)化步驟如下所述：
(1)構(gòu)建含有目的基因的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌，其中：重組質(zhì)粒含NPTⅡ基因，具備卡那霉素抗性，且目的基因由35S啟動子驅(qū)動；
(2)將三色堇種子，裝入離心管，加入蒸餾水，將種子振蕩至管底，將離心管于40℃水浴15min后自然冷卻，黑暗下靜置23h后棄管內(nèi)蒸餾水，加入80mg/L赤霉素溶液，振蕩后在黑下暗靜置1h，將種子置于雙層紗布中，用蒸餾水沖洗搓去種子表面膠質(zhì)，將種子用雙層無菌紗布包裹，置于10％雙氧水中振蕩消毒15min，用蒸餾水洗凈后將種子平鋪于鋪有濕潤雙層紗布的培養(yǎng)皿中，室溫下暗培養(yǎng)，每隔24h觀察種子狀態(tài)，添加適量蒸餾水保持濕潤，得到露白的胚根長為2～4mm的三色堇種子；
(3)將步驟(2)所得的三色堇種子，置于步驟(1)所得的OD600為0.4，卡那霉素濃度為100mg/L的根癌農(nóng)桿菌菌液中浸泡1.5h進(jìn)行侵染；將侵染過的種子用蒸餾水清洗4-5次后放入培養(yǎng)皿中，在27±1℃黑暗條件下繼續(xù)培養(yǎng)；
(4)將步驟(3)中的黑暗培養(yǎng)的種子于子葉脫離種皮后置于光照強(qiáng)度為2000lx光下培養(yǎng)，至子葉變綠時(shí)移栽入花盆中，于4-5片真葉后進(jìn)行抗性篩選；
(5)對步驟(4)中的幼苗噴施350mg/L的卡那霉素溶液進(jìn)行抗性篩選，獲得抗性苗；
(6)通過載體上的35S啟動子和目的基因設(shè)計(jì)特異引物，對步驟(5)中的抗性苗進(jìn)行PCR檢測，獲得陽性植株；
(7)對步驟(6)中的陽性植株進(jìn)行表型觀測，與野生型擬南芥植株進(jìn)行比較，獲得表型發(fā)生明顯改變的轉(zhuǎn)基因植株。