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一種促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法與流程

文檔序號(hào):12109072閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的方法是將甘薯黑斑病菌菌株接種在P+S培養(yǎng)基上,培養(yǎng)7-21d,再制備分生孢子懸浮液;在分生孢子懸浮液中加入甘薯葉片組織液,繼續(xù)培養(yǎng),直至分生孢子懸浮液中的甘薯黑斑病菌分生孢子萌發(fā)并獲得最佳觀察效果,進(jìn)行鏡檢。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的甘薯黑斑病菌菌株為甘薯長(zhǎng)喙殼(Ceratocystis fimbriata)CFSC-01,保藏編號(hào):CGMCC No.3.18030,保藏日期:2016年9月26日;保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的P+S培養(yǎng)基的制備方法為:將馬鈴薯、甘薯去皮切塊,稱取馬鈴薯塊20g、甘薯塊100g混合,加水煮爛,過(guò)濾,濾液中加入葡萄糖0.02g、瓊脂粉13g,再加水定容至1L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述甘薯黑斑病菌株在P+S培養(yǎng)基上培養(yǎng)的條件為:24-26℃、黑暗條件下。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述制備分生孢子懸浮液的方法為:用無(wú)菌水沖洗培養(yǎng)基表面的菌體即得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的分生孢子懸浮液中分生孢子濃度為1×106個(gè)/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的甘薯葉片組織液的制備方法為:將1g甘薯葉片組織加2ml水研磨離心后,取上清液,加水定容至2ml,得到甘薯葉片組織液,-20℃避光保存;使用時(shí),室溫溶解,使用后重新置于-20℃避光保存,甘薯葉片組織液的有效期從制備完成開(kāi)始計(jì),為3周。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的甘薯葉片組織液的加入量為每1ml分生孢子懸浮液加入15-30μl甘薯葉片組織液。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)甘薯黑斑病菌分生孢子穩(wěn)定萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的方法,其特征在于,所述的繼續(xù)培養(yǎng)直至分生孢子懸浮液中的甘薯黑斑病菌分生孢子萌發(fā)并獲得最佳觀察效果的條件為:24-26℃、黑暗條件下,培養(yǎng)2.5-3h至分生孢子芽管長(zhǎng)度為2-4個(gè)分生孢子長(zhǎng)度。

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