1.一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,包括:在食醋固態(tài)發(fā)酵的酒精發(fā)酵階段,添加由瑞士乳桿菌、異常漢遜酵母和解淀粉芽孢桿菌的菌劑組成的混合菌劑1;在食醋固態(tài)發(fā)酵的醋酸發(fā)酵階段,添加由瑞士乳桿菌和乳酸片球菌的菌劑組成的混合菌劑2;所述瑞士乳桿菌的保藏編號為CGMCC No.12062。
2.如權(quán)利要求1所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,在食醋固態(tài)發(fā)酵的酒精發(fā)酵階段,添加由瑞士乳桿菌、異常漢遜酵母和解淀粉芽孢桿菌的菌劑組成的混合菌劑1,分1-3次添加,每次添加比例為每公斤酒醪添加1-10g混合菌劑1;在食醋固態(tài)發(fā)酵的醋酸發(fā)酵階段,添加由瑞士乳桿菌和乳酸片球菌的菌劑組成的混合菌劑2,分1-3次添加,每次添加比例為每公斤醋醅添加1-10g混合菌劑2。
3.如權(quán)利要求1或2所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,所述混合菌劑的制備方法如下:
(1)瑞士乳桿菌培養(yǎng):將瑞士乳桿菌按照1%-10%接種量接種到MRS培養(yǎng)基中,在30℃-37℃靜置培養(yǎng)20-24h,形成種子培養(yǎng)液;將種子培養(yǎng)液以1%-10%的接種量接入乳酸菌增殖培養(yǎng)基中,在30℃-37℃靜置培養(yǎng)20-24h,離心收集乳酸菌菌體,將保護(hù)劑與乳酸菌菌體均勻混合放置在40-45℃的培養(yǎng)箱中熱激1-10s,然后利用噴霧冷凍干燥制得菌劑;瑞士乳桿菌的活菌數(shù)為109~1011CFU/g菌劑;
(2)乳酸片球菌培養(yǎng):將乳酸片球菌按照1%-10%接種量接種到MRS培養(yǎng)基中,在30℃-37℃靜置培養(yǎng)20-24h,形成種子培養(yǎng)液;將種子培養(yǎng)液以1%-10%的接種量接入乳酸菌增殖培養(yǎng)基中,在30℃-37℃靜置培養(yǎng)20-24h,離心收集乳酸菌菌體,將保護(hù)劑與乳酸菌菌體均勻混合放置在40-45℃的培養(yǎng)箱中熱激1-10s,然后利用噴霧冷凍干燥制得菌劑;乳酸片球菌的活菌數(shù)為109~1011CFU/g菌劑;
(3)解淀粉芽孢桿菌培養(yǎng):將解淀粉芽孢桿菌按照1%-10%接種量接種到解淀粉芽孢桿菌增殖培養(yǎng)基中,在35℃-37℃搖床250r/min培養(yǎng)20-24h后形成種子培養(yǎng)液;將種子培養(yǎng)液以1%-10%的接種量接入上述解淀粉芽孢桿菌增殖培養(yǎng)基中,在35℃-37℃搖床250r/min培養(yǎng)20-24h,離心收集菌體,將保護(hù)劑與菌體均勻混合放置在40-45℃的培養(yǎng)箱中熱激1-10s,然后利用噴霧冷凍干燥制得菌劑;解淀粉芽孢桿菌的活菌數(shù)為108~1010CFU/g菌劑;
(4)異常漢遜酵母培養(yǎng):將異常漢遜酵母按照1%-10%接種量接種到異常漢遜酵母增殖培養(yǎng)基中,在30℃-37℃搖床250r/min培養(yǎng)20-24h形成種子培養(yǎng)液;將種子培養(yǎng)液以1%-10%的接種量接入異常漢遜酵母增殖培養(yǎng)基中,在30℃-37℃靜置培養(yǎng)20-24h,離心收集菌體,將保護(hù)劑與菌體均勻混合放置在40-45℃的培養(yǎng)箱中熱激1-10s,然后利用噴霧冷凍干燥制得菌劑;異常漢遜酵母的活菌數(shù)為108~1010CFU/g菌劑;
(5)由以上步驟制得的瑞士乳桿菌、異常漢遜酵母和解淀粉芽孢桿菌的菌劑,按質(zhì)量比(1-2):1:1混合即為混合菌劑1;由以上步驟制得的瑞士乳桿菌和乳酸片球菌的菌劑,按質(zhì)量比1:1混合即為混合菌劑2。
4.如權(quán)利要求3所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,噴霧冷凍干燥的保護(hù)劑為乳糖和麥芽糊精,所述乳糖濃度為50-60g/L,所述麥芽糊精濃度為100-120g/L。
5.如權(quán)利要求3所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,所述保護(hù)劑與菌體混合比例為15-20:1(V:m)。
6.如權(quán)利要求3所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,所述乳酸菌增殖培養(yǎng)基的組成如下:葡萄糖2%,蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,無水乙酸鈉0.5%,吐溫80 0.1%(v/v),檸檬酸銨0.2%,磷酸氫二鉀0.2%,硫酸鎂0.058%,硫酸錳0.025%,麥芽汁20%-30%,余量為水,調(diào)節(jié)pH為6.2-6.8。
7.如權(quán)利要求3所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,所述解淀粉芽孢桿菌增殖培養(yǎng)基的組成如下:葡萄糖10%,蛋白胨3%,酵母膏1%,K2HPO40.5%,余量為水。
8.如權(quán)利要求3所述的一種利用混合菌劑強(qiáng)化傳統(tǒng)食醋固態(tài)發(fā)酵的方法,其特征在于,所述異常漢遜酵母增殖培養(yǎng)基的組成如下:稱取200g馬鈴薯,洗凈去皮切碎,加水1000mL煮沸半個(gè)小時(shí),紗布過濾,再加10-20g葡萄糖,自然pH。
9.一株用于食醋固態(tài)發(fā)酵的瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus),其保藏編號為CGMCC No.12062。