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一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的熒光PCR引物、探針及試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):12412817閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的熒光PCR引物,其特征在于:其上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:1、或者SEQ ID No:2 、或者SEQ ID No:3、或者SEQ ID No:4所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:5所示。

2.一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的探針,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID No:6所示。

3.一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的試劑盒,其特征在于:其含有EQ ID No:1、或者SEQ ID No:2 、或者SEQ ID No:3、或者SEQ ID No:4所示上游引物序列,核苷酸序列如SEQ ID No:5所示的下游引物序列,還含有核苷酸序列如SEQ ID No:6所示的探針。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的試劑盒,其特征在于:還含有熒光定量PCR預(yù)混液、ROX 參比染料、去離子水、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于檢測(cè)致病性鉤端螺旋體的試劑盒,其特征在于:在擴(kuò)增的過(guò)程中,其反應(yīng)體系為:熒光定量PCR預(yù)混液10μl,ROX 參比染料 0.2μl,上游引物(10μM)0.4μl,下游引物(10μM)0.4μl,探針(20μM)0.8μl,DNA 2μl,去離子水 6.2μl;反應(yīng)條件為:95℃ 15秒→(94℃ 5秒→58℃ 10秒→72℃ 15秒)×40。

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