技術特征：

1.一種體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟一，清洗去大部分臍帶的殘留血液，并保留10v/v％～20v/v％的殘留未凝固血液；

步驟二，將臍帶制成2mm³～5mm³大小的組織碎塊，用0.2w/v％膠原酶II 37℃消化；

步驟三，去除消化后的組織塊，加入洗脫液進行離心，分離出未提純初代臍帶間充質(zhì)干細胞；

步驟四，將獲得的初代臍帶間充質(zhì)干細胞按5.0×10⁴/cm²～1.0×10⁵/cm²接種于生長面積為55cm²的培養(yǎng)容器，培養(yǎng)體系為含有10w/v％胎牛血清的LG-DMEM培養(yǎng)基；

步驟五，待底層貼壁細胞融合80％以上后，利用含有胰蛋白酶和EDTA·4Na的Trypsin-EDTA溶液消化分散細胞，消化分散后的細胞按2.0×10⁴/cm²～3.0×10⁴/cm²的種植密度接種于生長面積148cm²培養(yǎng)容器內(nèi)進行傳代，重復所述步驟四和步驟五的傳代步驟，經(jīng)4次傳代直至獲得第4代細胞；

步驟六，將第4代細胞按0.8×10⁷～1.2×10⁷個/瓶的密度接種于HYPERFlask培養(yǎng)容器中，直至第五代細胞或者第六代細胞終止培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于所述的步驟一中，使用緩沖液清洗去大部分臍帶的殘留血液，所述的緩沖液含有青霉素10萬單位/L和鏈霉素100mg/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于所述的離心采用四步法，分別為：首先10分鐘300r/min，然后15分鐘1800r/min，接著10分鐘1000r/min，以及最后10分鐘1000r/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于還包括將所述的第五代細胞或者所述的第六代細胞按照慢凍的規(guī)則降溫并保存，從制備到凍存時間嚴格控制在15天～25天之間。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)模化培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于所述的HYPERFlask培養(yǎng)容器具有較大生長面積。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于所述的第五代細胞或者第六代細胞數(shù)量級達到10⁸以上終止培養(yǎng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外規(guī)?；囵B(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞的方法，其特征在于所述的第4代細胞按0.8×10⁷～1.2×10⁷個/瓶的密度接種。