技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種基于人RNA聚合酶I(hPolI)系統(tǒng)的腸道病毒68型(EV?D68)微復(fù)制子的構(gòu)建及應(yīng)用。本發(fā)明所提供微復(fù)制子是將野生型EV?D68基因組RNA中的編碼區(qū)替換為螢火蟲熒光素酶(firefly?Luciferase，f?Luc)報(bào)告基因得到帶有EV?D68基因組全部非編碼區(qū)(UTR)基因和報(bào)告基因的質(zhì)粒，即EV?D68微復(fù)制子。由于微復(fù)制子不產(chǎn)生具有感染性的活病毒，因此可以在普通實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行EV?D68的復(fù)制調(diào)控機(jī)制研究。該微復(fù)制子不同于傳統(tǒng)正股RNA病毒微復(fù)制子，無(wú)需體外轉(zhuǎn)錄，避免了RNA操作，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)過程。利用該微復(fù)制子，EV?D68的非編碼區(qū)功能可以用報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒定性定量檢測(cè)，為腸道病毒68型的病毒UTR區(qū)在致病機(jī)制和病毒復(fù)制過程中的作用機(jī)制研究以及疫苗、藥物的研發(fā)提供了一個(gè)簡(jiǎn)單、快速、靈敏、安全的研究平臺(tái)。

技術(shù)研發(fā)人員：王濤;潘明磊;王志云;周振威
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津大學(xué)
文檔號(hào)碼：201710004793
技術(shù)研發(fā)日：2017.01.04
技術(shù)公布日：2017.05.10