1.斑馬魚椎間盤損傷模型的構(gòu)建方法,包括DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其特征在于,DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中所使用的引物及序列為,
正向引物:5’-GTCGACGTACTGTATCTGTGCTGATTCAC-3’
反向引物:5’-GACCAGAAGAGATAATTCAAACGT-3’。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的斑馬魚椎間盤損傷模型的構(gòu)建方法,其特征在于:所述的DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的反應(yīng)體系為:
基因組 DNA 1μL
10μM 正向引物 1μL
10μM 反向引物 1μL
2.5mmol dNTP 4μL
5× 緩沖劑 10μL
聚合酶 0.5μL
去離子水 32.5μL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的斑馬魚椎間盤損傷模型的構(gòu)建方法,其特征在于:所述的DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的反應(yīng)過(guò)程為,
a、98℃預(yù)變性2min
b、98℃變性10sec
c、58℃退火15sec
d、72℃延伸5min30sec
b~d重復(fù)35個(gè)循環(huán)
e、72℃終延伸10min。