本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及檢測(cè)尿液病原菌的試劑盒及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

據(jù)世界組織統(tǒng)計(jì)，感染性疾病仍是發(fā)病率最高，引起人類死亡的主要原因。近30年來，由于大量廣譜抗生素在臨床的不合理應(yīng)用，臨床疾病相關(guān)微生物(包括細(xì)菌、病毒和某些寄生蟲)的耐藥性不斷增加，引起正常菌群失調(diào)和大量耐藥菌株出現(xiàn)。對(duì)于臨床微生物感染，尤其是較為常見的病原菌感染來說，快速準(zhǔn)確地判斷有無病原菌感染，一方面有利于臨床及時(shí)展開進(jìn)一步檢測(cè)與治療，另一方面減少了不必要的醫(yī)療資源浪費(fèi)，最終有助于合理使用抗菌藥物，避免抗生素的濫用，延緩耐藥的發(fā)生。

三磷酸腺苷(ATP)普遍存在于細(xì)菌等微生物細(xì)胞內(nèi)，是微生物新陳代謝的能量物質(zhì)。對(duì)于一定生理時(shí)期內(nèi)的活體微生物，均有較恒定水平的三磷酸腺苷(ATP)持有量，使得三磷酸腺苷(ATP)濃度與活體微生物含量之間有較好的線性關(guān)系。當(dāng)微生物死亡后，其體內(nèi)的ATP很快被胞內(nèi)酶所降解，不會(huì)對(duì)活體微生物的測(cè)定產(chǎn)生影響。因此，可以運(yùn)用三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光法來衡量尿液病原菌含量。

三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光法是基于熒光發(fā)光原理，通過檢測(cè)三磷酸腺苷(ATP)與熒光素-熒光素酶反應(yīng)的熒光光子量強(qiáng)度來實(shí)現(xiàn)ATP的檢測(cè)，其原理是在熒光素酶E(luciferase)和Mg²⁺的作用下，熒光素LH₂(luciferin)與ATP發(fā)生腺苷?；换罨?，活化后的熒光素與熒光素酶相結(jié)合，形成了熒光素-AMP復(fù)合體，并放出焦磷酸(PPi)。該復(fù)合體被分子氧氧化，形成激發(fā)態(tài)復(fù)合物P*-E·AMP，放出CO₂，當(dāng)該復(fù)合物從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)發(fā)射光，并最終形成氧化蟲熒光素P和AMP。

反應(yīng)過程如下：

E+LH₂+ATP→E·LH₂-AMP+PPi (1)

E·LH₂-AMP+O₂→[P*-E-AMP]+CO₂(2)

[P*-E-AMP]→E-P+AMP+hv (3)

在適當(dāng)?shù)偷娜姿嵯佘?ATP)濃度范圍內(nèi)，其反應(yīng)的速度與三磷酸腺苷(ATP)濃度成一級(jí)反應(yīng)的關(guān)系，即檢測(cè)的熒光值強(qiáng)度與ATP濃度成一定比例關(guān)系。正是由于被測(cè)樣本所含細(xì)菌等微生物的數(shù)量與所含的ATP值、以及ATP值與發(fā)光值之間存在一定的函數(shù)關(guān)系，因此通過檢測(cè)發(fā)光值即能得到被測(cè)標(biāo)本所含細(xì)菌等微生物含量。ATP生物發(fā)光法的技術(shù)在臨床尿液病原菌檢測(cè)中沒有相關(guān)試劑盒。

尿液病原菌檢查是對(duì)尿路感染的檢查，尿路感染是由病原菌(極少數(shù)可由真菌、原蟲、病毒)直接侵襲所引起，因此尿液病原菌學(xué)檢查對(duì)尿路感染的診斷與治療有決定意義。目前臨床上尿液病原菌的檢測(cè)方法主要有細(xì)菌定量培養(yǎng)、顯微鏡檢查、亞硝酸鹽定性檢測(cè)、全自動(dòng)尿分析儀定量計(jì)數(shù)、DNA芯片技術(shù)等，細(xì)菌定量培養(yǎng)被認(rèn)為是尿路感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)要求高，多需2-4天才能獲得結(jié)果，且培養(yǎng)陰性率高達(dá)70％-80％，檢測(cè)費(fèi)用也較高；顯微鏡檢查可以縮短診療時(shí)間，但是人為分辨主觀因素較大；亞硝酸鹽定性檢測(cè)可以初步判定是否存在菌尿，但是易受藥物、食物的影響；全自動(dòng)尿分析儀定量計(jì)數(shù)可對(duì)疑似尿路感染患者的尿液快速、無痛性篩查。但是該儀器價(jià)格偏高，基層醫(yī)院難以接受,且無論活體菌還是已死亡菌都會(huì)統(tǒng)計(jì)在內(nèi)；DNA芯片技術(shù)可以對(duì)尿液中的病原菌進(jìn)行鑒定，鑒定結(jié)果可以直接用于做下一步的藥敏，準(zhǔn)確率高。但其成本比較高，技術(shù)要求高，通量檢測(cè)程度低,基層醫(yī)院一般難以接受。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種檢測(cè)尿液病原菌的試劑盒。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題時(shí)提供上述檢測(cè)尿液病原菌的試劑盒在檢測(cè)尿液中病原菌含量的應(yīng)用。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

檢測(cè)尿液病原菌的試劑盒，包括尿液前處理試劑、病原菌ATP裂解液、中和液、ATP檢測(cè)試劑；

所述的尿液前處理試劑包括：體細(xì)胞消化液和ATP酶，所述的體細(xì)胞消化液包括體積分?jǐn)?shù)為0.3～0.7％Triton和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.03～0.07％TCA，所述的ATP酶為95～105U/mL三磷酸腺苷雙磷酸酶；

所述病原菌ATP裂解液包括：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2～5％TCA；

所述中和液包括：100～123.4mmol/L Tris-base、2～2.34mmol/L醋酸鎂，pH為8.2；

所述的ATP檢測(cè)試劑包括：12～20μg/mL熒光素酶、16～24μg/mL熒光素、18～22mmol/L Tris-base、1.5～2.5mmol/L醋酸鎂，pH調(diào)至7.2～7.8。

作為優(yōu)選，所述的體細(xì)胞消化液包括體積分?jǐn)?shù)0.5％Triton和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％TCA，所述的ATP酶為100U/mL三磷酸腺苷雙磷酸酶。

作為優(yōu)選，所述病原菌ATP裂解液包括：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4％TCA。

作為優(yōu)選，所述中和液包括：123.4mmol/L Tris-base、2.34mmol/L醋酸鎂，pH為8.2。

作為優(yōu)選，所述的ATP檢測(cè)試劑包括：16μg/mL熒光素酶、20μg/mL熒光素、20mmol/L Tris-base、2mmol/L醋酸鎂，pH調(diào)至7.6。

作為優(yōu)選，所述尿液的包括血尿、乳糜尿、蛋白尿、一般尿液。

檢測(cè)尿液中病原菌的方法，包括如下步驟：

(1)取尿液900μL，加入100μL體細(xì)胞消化液和5μL的三磷酸腺苷雙磷酸酶，混勻后放入30度水浴鍋中消化10min，然后2000g離心1min，棄沉淀后備用；

(2)取步驟(1)得到的上清液500μL進(jìn)行過柱，過柱所用濾膜為0.45μm孔徑的濾膜，小柱置于2mL套管上，然后6000g離心1min，棄濾液，加入生理鹽水500μL清洗1次，再6000g離心1min，棄濾液，最后12000g甩30s，將小柱換入一個(gè)新的套管中，備用；

(3)在小柱中加入100μL病原菌ATP裂解液，常溫下裂解5min，釋放出病原菌中的ATP，后加入400μL中和液，離心，收集濾液；

(4)取出步驟(3)中濾液50μL于96孔微孔板中并放入orinII微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀中，把ATP檢測(cè)試劑注入該儀器的進(jìn)樣器2中，通過進(jìn)樣器加入100μL熒光素酶反應(yīng)液，加完后測(cè)量其發(fā)光值，檢測(cè)時(shí)間為5s，記錄其信號(hào)值。

上述檢測(cè)尿液病原菌的試劑盒在檢測(cè)尿液病原菌中的應(yīng)用在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

有益效果：

本發(fā)明具有如下有益效果：

1、無需培養(yǎng)過程，相比于傳統(tǒng)的病原菌培養(yǎng)方法，大大縮短了檢測(cè)時(shí)間短。

2、避免主觀因素，通過儀器檢測(cè)，根據(jù)ATP信號(hào)值的高低來判斷尿液中是否有病原菌干擾，可以避免人為的因素導(dǎo)致結(jié)果誤判。

3、檢測(cè)靈敏度高，與傳統(tǒng)病原菌培養(yǎng)法比較，相關(guān)性高達(dá)90％以上。

4、通過對(duì)尿液的前處理，可以避免尿液中血細(xì)胞、蛋白、支原體、衣原體等物質(zhì)的干擾。

5、試劑成本低廉，儀器占地面積小，適用于各中小醫(yī)院開展實(shí)驗(yàn)。

本發(fā)明采用三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光法建立一種快速檢測(cè)尿液病原菌的技術(shù)體系，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、靈敏，為臨床尿路感染診斷提供一種可靠的方法，能降低臨床無效用藥，提高用藥準(zhǔn)確率，有助于減少抗生素濫用，最終減少患者痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

附圖說明

圖1常見病原菌的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖2ROC曲線圖。

具體實(shí)施方式

根據(jù)下述實(shí)施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實(shí)施例所描述的內(nèi)容僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會(huì)限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。

實(shí)施例中的試劑均為普通市購(gòu)商品。

實(shí)施例1：尿液標(biāo)本病原菌的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

試驗(yàn)菌株：如下(表1)，購(gòu)自廣東省微生物菌種保藏中心。

表1標(biāo)準(zhǔn)菌株

尿液來源：采集多名健康志愿者中段尿液混合后使用。

尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒包括尿液前處理試劑、病原菌ATP裂解液、中和液、ATP檢測(cè)試劑。尿液前處理試劑由體細(xì)胞消化液與ATP酶組成，體細(xì)胞消化液組成成分為0.3～0.7％Triton和0.03～0.07％TCA，ATP酶為95～105U/mL的APYrase；病原菌ATP裂解液為2～5％TCA；中和液由100～123.4mmol/LTris-base，2～2.34mmol/L醋酸鎂組成，PH調(diào)至8.2；ATP檢測(cè)試劑組成成分為熒光素酶、熒光素以及緩沖液，其中熒光素酶的濃度為12～20μg/mL，熒光素的濃度為16～24μg/mL，緩沖液由18～22mmol/L Tris-base與1.5～2.5mmol/L醋酸鎂組成,PH調(diào)至7.2～7.8。

儀器:Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀；德國(guó)Berthold。

體外模擬尿液病原菌的檢測(cè)過程如下：

取37度培養(yǎng)18-24h的大腸埃希菌，挑取2-3個(gè)純菌平板單克隆菌落，制成菌懸液，用M-H肉湯培養(yǎng)基將菌液稀釋成5*10⁷、5*10⁶、5*10⁵、5*10⁴、5*10³cfu/mL五種濃度；12000g離心收集沉淀，去上清，加入無菌尿1mL，振蕩混勻，每個(gè)濃度重復(fù)3次。

取尿液900μL于2mL離心管中，分別加入尿液前處理試劑中的100μL體細(xì)胞消化液和5μL的ATP酶，混勻后放入30度水浴鍋中消化10min，然后2000g離心1min，棄沉淀后備用；

取上清500μL菌懸液進(jìn)行過柱，過柱所用濾膜為0.45μm孔徑大小的濾膜，小柱置于2mL套管上，然后6000g離心1min，棄濾液，加入生理鹽水500μL清洗1次，再6000g離心1min，棄濾液，最后12000g甩30s，將小柱換入一個(gè)新的套管中，備用；

在小柱中加入100μL 4％TCA裂解液，常溫下裂解5min，得到ATP，后加入400μL中和液稀釋，12000g離心30s，濾液備用進(jìn)行ATP檢測(cè)。

取濾液50μL于96孔微孔板中并放入Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀中，把ATP檢測(cè)試劑注入該儀器的進(jìn)樣器中，通過進(jìn)樣器向檢測(cè)穴中加入100μL熒光素酶反應(yīng)液，加完一孔后立刻檢測(cè)發(fā)光值，檢測(cè)時(shí)間為5s；記錄其信號(hào)值。

根據(jù)病原菌的ATP信號(hào)值以及相對(duì)應(yīng)的濃度，取其對(duì)數(shù)值對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1

從檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析，尿液中病原菌含量與ATP檢測(cè)信號(hào)呈正相關(guān)性。從圖中可以看出，采用生物熒光法對(duì)不同濃度病原菌分別進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示細(xì)菌在10⁴-10⁸cfu/mL，真菌在10,³-10⁷cfu/mL范圍內(nèi)，與ATP發(fā)光值的對(duì)數(shù)值之間呈線性關(guān)系，說明可以通過測(cè)定ATP含量值大致能區(qū)分出不同濃度的菌，ATP發(fā)光值越大，菌懸液含菌量越高。

生物熒光法測(cè)定的全過程僅需要幾分鐘，而病原菌計(jì)數(shù)法則需要1-2天以上，具有明顯的優(yōu)勢(shì)。

實(shí)施例2：尿液標(biāo)本病原菌ATP的檢測(cè)臨界值的確定。

尿液標(biāo)本收集：224例尿標(biāo)本來自本院微生物科室。

尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒包括尿液前處理試劑、病原菌ATP裂解液、中和液、ATP檢測(cè)試劑。尿液前處理試劑由體細(xì)胞消化液與ATP酶組成，體細(xì)胞消化液組成成分為體積分?jǐn)?shù)為0.5％Triton和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％TCA，ATP酶為100U/mL的APYrase；病原菌ATP裂解液為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4％TCA；中和液由123.4mmol/L Tris-base,2.34mmol/L醋酸鎂組成,PH調(diào)至8.2；ATP檢測(cè)試劑組成成分為熒光素酶、熒光素以及緩沖液，其中熒光素酶的濃度為16μg/mL，熒光素的濃度為20μg/mL，緩沖液由20mmol/L Tris-base與2mmol/L醋酸鎂組成,PH調(diào)至7.6。

儀器Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀：德國(guó)Berthold。

將上述尿液一分為二，一部分直接涂血平板，一部分經(jīng)處理后進(jìn)行ATP檢測(cè)。

尿液ATP檢測(cè)步驟如下：

取尿液900μL于2mL離心管中，分別加入尿液前處理試劑中的100μL體細(xì)胞消化液和5μL的ATP酶，混勻后放入30度水浴鍋中消化10min，然后2000g離心1min，棄沉淀后備用；

取上清500μL菌懸液進(jìn)行過柱，過柱所用濾膜為0.45μm孔徑大小的濾膜，小柱置于2mL套管上，然后6000g離心1min，棄濾液，加入生理鹽水500μL清洗1次，再6000g離心1min，棄濾液，最后12000g甩30s，將小柱換入一個(gè)新的套管中，備用；

在小柱中加入100μL4％TCA裂解液，常溫下裂解5min，得到ATP，后加入400μL中和液稀釋，12000g離心30s，濾液備用進(jìn)行ATP檢測(cè)。

取濾液50μL于96孔微孔板中并放入Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀中，把ATP檢測(cè)試劑注入該儀器的進(jìn)樣器中，通過進(jìn)樣器首先向檢測(cè)穴中加入100μL熒光素酶反應(yīng)液，加完一孔立刻測(cè)量發(fā)光值，檢測(cè)時(shí)間為5s；記錄其信號(hào)值。

將224例尿液標(biāo)本病原菌ATP信號(hào)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，使用非參數(shù)方法構(gòu)建ROC曲線，并以Youden指數(shù)最大切點(diǎn)為臨界點(diǎn)。目前，血平板涂布計(jì)數(shù)認(rèn)為臨床尿路感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，以涂板計(jì)數(shù)≥10⁴為陽(yáng)性1，<10⁴為陰性0，作為動(dòng)態(tài)數(shù)據(jù)，ATP檢測(cè)尿液樣本RLU作為檢驗(yàn)變量。運(yùn)用spass 19.0進(jìn)行ROC曲線分析得得到的靈敏度和特異度，并以靈敏度為縱坐標(biāo)軸，(1-特異度)為橫坐標(biāo)軸繪制的ROC曲線(圖2)。

通過ROC曲線分析得到的224例測(cè)試樣本中生成的連續(xù)閾值和對(duì)應(yīng)的敏感度以及1-特異性，并計(jì)算出相應(yīng)的Youden指數(shù)范圍(0-0.89)。并結(jié)合臨床標(biāo)本實(shí)際情況，最終確定ATP信號(hào)值≥260為ROC最佳臨界點(diǎn)，即若樣本ATP檢測(cè)信號(hào)≥260RLU，則樣本檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，有病原菌感染；若樣本ATP檢測(cè)信號(hào)<260RLU，則樣本檢測(cè)結(jié)果為陰性，無病原菌感染。

尿液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查不僅有助于泌尿道感染的診斷，并可作為選擇有效抗菌藥物進(jìn)行治療，判斷療效的指標(biāo)。正常人膀胱中的尿液是無菌的，一般認(rèn)為尿液細(xì)菌計(jì)數(shù)不應(yīng)超過10⁴-10⁵cfu/mL，若每毫升尿液細(xì)菌10⁵CFU/mL以上時(shí)，應(yīng)考慮為尿路感染。若每毫升尿液細(xì)菌數(shù)小于10⁴cfu/mL，考慮污染。但是中段尿在10⁵CFU/mL以下時(shí)，不能完全排除尿路感染的可能。目前認(rèn)為由革蘭陰性桿菌引起的菌尿，細(xì)菌數(shù)均可達(dá)到10⁵CFU/mL以上，而革蘭陽(yáng)性球菌引起的菌尿，細(xì)菌數(shù)達(dá)到10⁴CFU/mL即可診斷為尿路感染。因此基于臨床尿路感染診斷標(biāo)準(zhǔn)要求，確定一個(gè)260RLU為臨界值，可盡可能地檢測(cè)出10⁴CFU/mL細(xì)菌及10³CFU/mL真菌以上的含菌尿液。

實(shí)施例3：臨床尿標(biāo)本病原菌ATP的檢測(cè)。

尿液標(biāo)本收集：1055例尿標(biāo)本來自三家三甲醫(yī)院。

尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒包括尿液前處理試劑、病原菌ATP裂解液、中和液、ATP檢測(cè)試劑。尿液前處理試劑由體細(xì)胞消化液與ATP酶組成，體細(xì)胞消化液組成成分為體積分?jǐn)?shù)為0.5％Triton和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％TCA，ATP酶為100U/mL的APYrase；病原菌ATP裂解液為4％TCA；中和液由123.4mmol/L Tris-base,2.34mmol/L醋酸鎂組成,PH調(diào)至8.2；ATP檢測(cè)試劑組成成分為熒光素酶、熒光素以及緩沖液，其中熒光素酶的濃度為16μg/mL，熒光素的濃度為20μg/mL，緩沖液由20mmol/L Tris-base與2mmol/L醋酸鎂組成,PH調(diào)至7.6。

儀器Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀：德國(guó)Berthold。

將上述尿液一分為二，一部分直接涂血平板，一部分經(jīng)處理后進(jìn)行ATP檢測(cè)。

尿液ATP檢測(cè)步驟如下：

取尿液900μL于2mL離心管中，分別加入尿液前處理試劑中的100μL體細(xì)胞消化液和5μL的ATP酶，混勻后放入30度水浴鍋中消化10min，然后2000g離心1min，棄沉淀后備用；

取上清500μL菌懸液進(jìn)行過柱，過柱所用濾膜為0.45μm孔徑大小的濾膜，小柱置于2mL套管上，然后6000g離心1min，棄濾液，加入生理鹽水500μL清洗1次，再6000g離心1min，棄濾液，最后12000g甩30s，將小柱換入一個(gè)新的套管中，備用；

在小柱中加入100μL裂解液，常溫下裂解5min，得到ATP，后加入400μL中和液稀釋，12000g離心30s，濾液備用進(jìn)行ATP檢測(cè)。

取濾液50μL于96孔微孔板中并放入Orin II微孔板式發(fā)光檢測(cè)儀中，把ATP檢測(cè)試劑注入該儀器的進(jìn)樣器中，通過進(jìn)樣器首先向檢測(cè)穴中加入100μL熒光素酶反應(yīng)液，加完一孔立刻測(cè)量發(fā)光值，檢測(cè)時(shí)間為5s；記錄其信號(hào)值。

以血平板涂布計(jì)數(shù)作為金標(biāo)準(zhǔn)，即血平板計(jì)數(shù)≥1*10⁴CFU/mL的菌落為陽(yáng)性，<1*10⁴CFU/mL的菌落為陰性。尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒的判斷標(biāo)準(zhǔn)是：樣本ATP檢測(cè)信號(hào)≥260RLU，則樣本檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，有病原菌感染；若樣本ATP檢測(cè)信號(hào)<260RLU，則樣本檢測(cè)結(jié)果為陰性，無病原菌感染。根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)將1055例尿液標(biāo)本病原菌的結(jié)果統(tǒng)計(jì)如下(表2)

表2考核試劑與參比方法為“金標(biāo)準(zhǔn)”的匯總結(jié)果

通過1055例臨床試驗(yàn)驗(yàn)證，血平板涂布計(jì)數(shù)作為臨床尿路感染的判斷金標(biāo)準(zhǔn)，尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒的臨床靈敏度為94.92％(95％CI 92.66％,96.15％)，特異性為91.34％(95％CI 88.68％,93.43％)，總符合率為93.08％(95％CI 91.39％,94.46％)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為91.18％(95％CI 88.47％,93.30％)，陰性預(yù)測(cè)值為95.02％(95％CI 92.80％,96.58％)，陽(yáng)性似然比為10.97(95％CI 10.52,11.44)，陰性似然比為0.06(95％CI 0.05,0.06)，Kappa系數(shù)為0.862(95％CI 0.831,0.892)，綜合以上結(jié)果表明尿液病原菌ATP檢測(cè)試劑盒與血平板涂布計(jì)數(shù)具有臨床等效性，可以用來協(xié)助臨床微生物檢測(cè)，且該方法快速簡(jiǎn)便，有利于臨床進(jìn)行下一步的檢查。

綜上所述，以上實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明使用ATP生物發(fā)光法檢測(cè)尿液病原菌含量，無需培養(yǎng)過程，操作簡(jiǎn)單，而且靈敏度高，可在較短時(shí)間內(nèi)得到測(cè)定結(jié)果，相比于其他的微生物檢測(cè)方法具有明顯的優(yōu)勢(shì)。其使用試劑成本低，易于配置，且檢測(cè)結(jié)果避免人的主觀判斷。說明ATP生物發(fā)光法測(cè)定尿液病原菌定量的方法是可行的，可以作為臨床上一種快速有效的微生物檢測(cè)辦法，從而為臨床治療提供有效的依據(jù)。