欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法與流程

文檔序號(hào):12697387閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于它是按照以下步驟進(jìn)行的:

一、選取苗高為5~6cm的白樺組培苗,在超凈工作臺(tái)中將外植體葉片和莖段置于愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)培養(yǎng)7~10天;

二、將步驟一在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的愈傷組織取出,轉(zhuǎn)移至含目的基因序列的根癌農(nóng)桿菌侵染液中,用真空泵中抽真空5~10min后,置于共培養(yǎng)的培養(yǎng)基上,黑暗處理48h;其中,侵染液OD600為0.6~0.8,

三、將步驟二黑暗處理后的愈傷組織置于加入抑菌劑的轉(zhuǎn)基因抗性篩選培養(yǎng)基上于25℃光照條件下進(jìn)行篩選培養(yǎng)40~50天,得到白樺抗性苗;

四、將步驟三的白樺抗性苗轉(zhuǎn)移到加選擇劑和抑菌劑的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)37~42天后,進(jìn)行分子檢測(cè)驗(yàn)證,檢測(cè)驗(yàn)證正確后,即表明獲得轉(zhuǎn)基因白樺苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟一中所述的生根培養(yǎng)基含WPM、0.2mg/L的NAA、30g/L的蔗糖和3.0mg/L Phytagel,pH=5.8。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟一中所述的愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基含WPM、0.8mg/L的6-BA、0.5mg/L的GA3、0.02mg/L的NAA、30g/L的蔗糖和3.0mg/L的Phytagel,pH=5.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟二中所述的共培養(yǎng)的培養(yǎng)基含WPM、1.0mg/L的6-BA、30g/L的蔗糖和3.0mg/L的Phytagel,pH=5.8。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟二中所述的侵染液含WPM、150μM的As、30g/L的蔗糖,pH=5.8。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟三中所述的篩選培養(yǎng)基含WPM、1.0mg/L的6-BA、30g/L的蔗糖、3.0mg/L的Phytagel、選擇劑和抑制劑,pH=5.8。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于選擇劑為30~50mg/L的卡那霉素,抑制劑為300~500mg/L的氨芐霉素。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟四中所述的生根培養(yǎng)基含WPM、0.2mg/L的NAA、30g/L的蔗糖、3.0mg/L的Phytagel、選擇劑和抑制劑,pH=5.8。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于選擇劑為30~50mg/L的卡那霉素,抑制劑為300~500mg/L的氨芐霉素。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速高效的白樺轉(zhuǎn)基因方法,其特征在于步驟四選擇的抗性苗株高為1.5~2.0cm。

當(dāng)前第2頁(yè)1 2 3 
網(wǎng)友詢問(wèn)留言 已有0條留言
  • 還沒(méi)有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
拜城县| 农安县| 南安市| 鲜城| 五指山市| 监利县| 大竹县| 库尔勒市| 浦江县| 日照市| 丰台区| 河北区| 濮阳县| 昌平区| 沙湾县| 泽州县| 张家界市| 信丰县| 禹州市| 连州市| 固始县| 晋中市| 永善县| 金昌市| 康定县| 监利县| 婺源县| 东乡县| 德化县| 永和县| 望都县| 许昌市| 南皮县| 平潭县| 裕民县| 额济纳旗| 新巴尔虎左旗| 佛学| 金昌市| 隆尧县| 浦城县|