技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種HCV?2a亞型NS5B突變檢測(cè)的PCR擴(kuò)增引物、試劑盒及檢測(cè)方法。本發(fā)明通過特別設(shè)計(jì)的PCR擴(kuò)增引物，包括第一引物對(duì)和第二引物對(duì)，將較難擴(kuò)增和測(cè)序的長(zhǎng)片段的NS5B區(qū)分成兩個(gè)較小的片段進(jìn)行獨(dú)立擴(kuò)增，再進(jìn)行測(cè)序分析，可以很容易就發(fā)現(xiàn)NS5B區(qū)域的突變情況，從而在用藥前或用藥過程中可以及時(shí)提供指導(dǎo)和支持。進(jìn)一步，對(duì)于使用第一引物對(duì)和第二引物對(duì)的第一輪PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物不太理想，如產(chǎn)物片段存在非特異性條帶或濃度不高，再使用第三引物對(duì)和第四引物對(duì)等對(duì)第一輪PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行第二輪PCR擴(kuò)增，再進(jìn)行鑒定或測(cè)序分析，可進(jìn)一步保證測(cè)序結(jié)果的可靠性，進(jìn)而可以提高突變檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

技術(shù)研發(fā)人員：馮宇鵬;郭曉磊;曾征宇;徐艷艷;劉聲碧
受保護(hù)的技術(shù)使用者：貴州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司
技術(shù)研發(fā)日：2017.05.24
技術(shù)公布日：2017.07.11