本發(fā)明涉及一種水蛭蛋白多肽粉及應(yīng)用，屬于提取
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：水蛭作為一味傳統(tǒng)中藥，歷史悠久，中醫(yī)認為水蛭有破血、逐淤、通經(jīng)等功效。經(jīng)研究表明，中藥水蛭能夠使人體內(nèi)血中6-酮-pgf12明顯增高，而txa2明顯下降，有顯著的降血脂作用，并使主動脈粥樣硬化斑塊明顯減退，斑塊內(nèi)可見膠原纖維增生，膽固醇結(jié)晶減少。為中藥水蛭防治動脈粥樣硬化、防治多種心腦血管疾病提供了一定的理論依據(jù)。同時還發(fā)現(xiàn)用中藥水蛭治療血栓性靜脈炎、肝硬化、呼吸系統(tǒng)疾病都取得了滿意的效果。所以人們逐漸針對水蛭對其中的有用物質(zhì)進行提取，分離出具有抗凝作用的物質(zhì)—水蛭素后，國內(nèi)外已對其進行了廣泛而深入的藥理學(xué)研究。水蛭素(hirudin)是水蛭(leech)及其唾液腺中已提取出多種活性成分中活性最顯著并且研究得最多的一種成分，它是由65—66個氨基酸組成的小分子蛋白質(zhì)(多肽)。水蛭素對凝血酶有極強的抑制作用，是迄今為止所發(fā)現(xiàn)最強的凝血酶天然特異抑制劑。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的第一個目的在于提供一種水蛭蛋白多肽粉，該水蛭蛋白多肽粉以微波輔助結(jié)合過濾的方式得到，多肽的收率高，并且能夠獲取的多肽中的高效成分，具有通血管、降血脂的作用，并更容易被人體吸收。本發(fā)明的第二個目的在于提供一種水蛭蛋白多肽粉的應(yīng)用，為將上述的水蛭蛋白多肽粉用于制備酒，水蛭蛋白多肽粉輔助提高酒的適口性，該酒易于吸收，具有低抗原性，具有降脂的效果。實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的可以通過采取如下技術(shù)方案達到：一種水蛭蛋白多肽粉，通過以下步驟制備得到：預(yù)處理：取天然水蛭，加入氯化鈉溶液浸泡5-15min；然后除去氯化鈉溶液；磨漿：在經(jīng)預(yù)處理的天然水蛭中加入純水并調(diào)節(jié)ph至5.5-6.5；勻漿，濾去雜質(zhì)，得到漿液；改性：在溫度為65～85℃的條件下，結(jié)合微波對漿液進行處理5-10min，然后60℃的條件下保溫20-40min，得到改性溶液；水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，調(diào)節(jié)ph為4.5-6，結(jié)合頻率為8000-9500mhz的微波對改性溶液進行水解處理10-20min，然后降溫至4～10℃，恒溫放置10-20min；結(jié)合頻率為4000-6000mhz微波進行處理5-15min，停止反應(yīng)，得到水解溶液；滅活：將水解溶液加熱至95～115℃，處理15～25min，得到滅活水解液；過濾：將滅活水解液降溫至20～30℃，超濾過濾取濾液；干燥：將濾液干燥，得到水蛭蛋白多肽粉。進一步地，預(yù)處理步驟中，氯化鈉溶液的濃度為11-20g/l。進一步地，磨漿步驟中，通過醋酸溶液調(diào)節(jié)ph。進一步地，改性步驟中，微波的頻率為0.7-1.2ghz。進一步地，水解步驟中，木瓜蛋白酶的加入量為6000-18000u/g改性溶液。進一步地，過濾步驟中，使用8000-11000分子量的超濾膜過濾取濾液。進一步地，過濾步驟中，超濾過程施加的壓力為0.1-0.2mpa。進一步地，干燥步驟中，-35～-20℃的真空條件下，對濾液進行干燥。實現(xiàn)本發(fā)明的第二個目的可以通過采取如下技術(shù)方案達到：一種水蛭蛋白多肽粉的應(yīng)用，將如上所述的水蛭蛋白多肽粉用于制備酒；酒包括按濃度計的以下有效成分：進一步地，酒包括按濃度計的以下有效成分：相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果在于：1、本發(fā)明的水蛭蛋白多肽粉以微波輔助結(jié)合過濾的方式得到，多肽的收率高，獲取水蛭素和其他易于人體吸收的肽段、氨基酸和小分子，具有通血管、降血脂的作用，更容易被吸收；2、本發(fā)明的水蛭蛋白多肽粉以微波輔助制備工藝，在微波的作用下蛋白大分子中的多肽鍵或者氨基酸側(cè)鏈產(chǎn)生相干、有序的震動，大大提高酶解效率；在水解步驟中，通過加熱-冷卻-加熱的溫度設(shè)置，能夠維持微波能量的平衡，不破壞蛋白中所要獲取的肽段，具有提高水解酶的活性的效果；3、本發(fā)明中通過水蛭蛋白多肽粉制備的酒具有良好的適口性，該酒易于吸收，具有低抗原性，具有降脂的效果。具體實施方式下面，結(jié)合具體實施方式，對本發(fā)明做進一步描述：一種水蛭蛋白多肽粉，通過以下步驟制備得到：預(yù)處理：取天然水蛭，加入濃度為11-20g/l氯化鈉溶液浸泡5-15min；然后除去氯化鈉溶液；磨漿：在經(jīng)預(yù)處理的天然水蛭中加入純水并通過醋酸溶液調(diào)節(jié)ph至5.5-6.5；勻漿，濾去雜質(zhì)，得到漿液；改性：在溫度為65～85℃的條件下，結(jié)合頻率為0.7-1.2ghz的微波對漿液進行處理5-10min，然后60℃的條件下保溫20-40min，得到改性溶液；水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為6000-18000u/g改性溶液，調(diào)節(jié)ph為4.5-6，結(jié)合頻率為8000-9500mhz的微波對改性溶液進行水解處理10-20min，然后降溫至4～10℃，恒溫放置10-20min；結(jié)合頻率為4000-6000mhz微波進行處理5-15min，停止反應(yīng)，得到水解溶液；水解先加入木瓜蛋白酶，以較高頻率的微波輔助水解，該頻率下使得蛋白大分子多肽鍵或者氨基酸側(cè)鏈產(chǎn)生相干、有序的震動，且溶液升溫，促進水解效率，然后大幅度降溫，再通過較低頻率的微波進行處理，結(jié)合間斷式的微波處理能夠緩沖微波能量，維持微波能量的平衡，不破壞蛋白中所要獲取的肽段，提取效率大大提高；滅活：將水解溶液加熱至95～115℃，處理15～25min，得到滅活水解液；過濾：將滅活水解液降溫至20～30℃，使用8000-11000分子量的超濾膜過濾取濾液；超濾過程施加的壓力為0.1-0.2mpa；該分子量下能夠除去未水解大分子蛋白和肽段，獲取水蛭素和其他易于人體吸收的肽段、氨基酸和小分子；干燥：-35～-20℃的真空條件下，對濾液進行干燥，得到水蛭蛋白多肽粉。一種水蛭蛋白多肽粉的應(yīng)用，將上述的水蛭蛋白多肽粉用于制備酒；酒包括按濃度計的以下有效成分：在以上酒精濃度下，提取的水蛭蛋白多肽粉具有較好的活性，水蛭蛋白多肽粉與其他成分和酒精的協(xié)同作用下，該酒具有活血化瘀，抗血凝、抗血栓，改善血液循環(huán)和降血脂的功效。實施例1：一種水蛭蛋白多肽粉，通過以下步驟制備得到：預(yù)處理：取天然水蛭，加入濃度為18g/l氯化鈉溶液浸泡15min；然后除去氯化鈉溶液；磨漿：在經(jīng)預(yù)處理的天然水蛭中加入純水并通過醋酸溶液調(diào)節(jié)ph至6；勻漿，濾去雜質(zhì)，得到漿液；改性：在溫度為70℃的條件下，結(jié)合頻率為0.8ghz的微波對漿液進行處理10min，然后60℃的條件下保溫30min，得到改性溶液；水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為15000u/g改性溶液，調(diào)節(jié)ph為5，結(jié)合頻率為8500mhz的微波對改性溶液進行水解處理18min，然后降溫至9℃，恒溫放置15min；結(jié)合頻率為5800mhz微波進行處理8min，停止反應(yīng)，得到水解溶液；滅活：將水解溶液加熱至115℃，處理20min，得到滅活水解液；過濾：將滅活水解液降溫至30℃，使用10000分子量的超濾膜過濾取濾液；超濾過程施加的壓力為0.2mpa；干燥：-25℃的真空條件下，對濾液進行干燥，得到水蛭蛋白多肽粉。實施例2：本實施例的特點在于：改性：在溫度為80℃的條件下，結(jié)合頻率為1.1ghz的微波對漿液進行處理10min，然后60℃的條件下保溫30min，得到改性溶液。預(yù)處理、磨漿、水解、滅活、過濾和干燥步驟和實施例1相同。實施例3：本實施例的特點在于：水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為6000-18000u/g改性溶液，調(diào)節(jié)ph為6，結(jié)合頻率為9500mhz的微波對改性溶液進行水解處理12min，然后降溫至5℃，恒溫放置15min；結(jié)合頻率為4500mhz微波進行處理13min，停止反應(yīng)，得到水解溶液。預(yù)處理、磨漿、水解、滅活、過濾和干燥步驟和實施例1相同。對比例1：對比例1采用常規(guī)技術(shù)對蛋白進行改性：改性：在溫度為70℃的條件下，對漿液進行處理10min，然后60℃的條件下保溫30min，得到改性溶液；其余步驟和參數(shù)與實施例1相同。對比例2：對比例2的水解步驟中并不經(jīng)過降溫和間斷微波處理：水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為6000-18000u/g改性溶液，調(diào)節(jié)ph為5，結(jié)合頻率為8500mhz的微波對改性溶液進行水解處理26min，停止反應(yīng)，得到水解溶液；其余步驟和參數(shù)與實施例1相同。對比例3：對比例3采用常規(guī)技術(shù)對蛋白進行水解并不經(jīng)過降溫步驟：水解：在改性溶液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為6000-18000u/g改性溶液，調(diào)節(jié)ph為5，結(jié)合頻率為8500mhz的微波對改性溶液進行水解處理18min；結(jié)合頻率為5800mhz微波進行處理8min，停止反應(yīng)，得到水解溶液；其余步驟和參數(shù)與實施例1相同。測定實施例1-3和對比例1-3肽含量和收率進行檢測，結(jié)果如表格1所示：表格1肽含量和收率進行檢測從表格1可得，微波輔助水解的方式能夠明顯提高肽含量比例和收率，其中對比例2省略了水解步驟中的間斷微波和降溫步驟，雖然肽含量比例和收率比對比例1、3高，但對于實施例1-3仍然較低，說明間斷微波結(jié)合降溫對水蛭蛋白多肽粉的提取有積極的作用。實施例4：將實施例1得到的水蛭蛋白多肽粉，用于制備酒，酒包括按濃度計的以下有效成分：在米酒中加入水蛭蛋白多肽粉、葡萄糖酸鋅(zn2+的來源)、碳酸鈣ca2+的來源)、硫酸鎂(mg2+的來源)、磷酸鐵(fe3+和po43-的來源)，浸泡3個月以上，過濾后得到水蛭蛋白多肽酒。對得到的酒進行檢測，感官檢測如表格2所示，性質(zhì)檢測如表格3所示：表格2實施例4的感官檢測項目感官結(jié)果色澤透明帶玫瑰紅色滋味及香味具有芳香味、微苦、蜜甜滋味；米酒香味，無異味風(fēng)味入口柔和和細膩、無刺喉感覺、沒懸浮物組織形態(tài)澄清透明，久置后有少量沉淀物表格3性質(zhì)檢測對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，可根據(jù)以上描述的技術(shù)方案以及構(gòu)思，做出其它各種相應(yīng)的改變以及變形，而所有的這些改變以及變形都應(yīng)該屬于本發(fā)明權(quán)利要求的保護范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁12