本發(fā)明涉及平菇的栽培，尤其是涉及一種用于工廠化瓶栽平菇品種的選育方法，本發(fā)明還涉及該種平菇的工廠化栽培方法。

背景技術(shù)：

平菇因其營(yíng)養(yǎng)豐富，價(jià)格適中，已經(jīng)成為大眾餐桌上的必備菜肴。2015年全國(guó)平菇總產(chǎn)量達(dá)590.18萬(wàn)噸，是可以人工種植的第三大類(lèi)食用菌。河南省是平菇生產(chǎn)大省，總產(chǎn)量占全國(guó)平菇總量的30%。平菇最適宜的出菇溫度為12~18℃，受環(huán)境氣候影響，河南省平菇生產(chǎn)多集中在秋冬春三季，冬季溫度低于4℃或夏季氣溫高于25℃時(shí)都會(huì)出現(xiàn)出菇困難，不能保證市場(chǎng)的全年持續(xù)供應(yīng)。同時(shí)傳統(tǒng)平菇的生產(chǎn)模式機(jī)械化程度低，體力勞動(dòng)較多，勞動(dòng)力價(jià)格偏高等因素直接導(dǎo)致了平菇的種植利潤(rùn)降低。工廠化生產(chǎn)食用菌因其采用立體種植，生產(chǎn)效率高、自動(dòng)化水平高、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在全國(guó)各地迅速發(fā)展壯大，目前全國(guó)食用菌工廠生產(chǎn)企業(yè)已達(dá)700多家。隨著金針菇、杏鮑菇工廠化生產(chǎn)技術(shù)的成熟，市場(chǎng)也逐漸趨于飽和，所以平菇的工廠化生產(chǎn)將成為下一步的發(fā)展方向。由于傳統(tǒng)的平菇品種在生產(chǎn)中要求出菇3～4茬，而工廠化生產(chǎn)要求出一茬菇，生物學(xué)效率達(dá)70%以上，因此直接選用傳統(tǒng)栽培模式的平菇品種，存在出菇整齊度低，一茬菇產(chǎn)量及生物學(xué)效率低、不耐二氧化碳等缺點(diǎn)，不能夠適應(yīng)現(xiàn)有瓶栽生產(chǎn)模式，急需培育新的適應(yīng)工廠化瓶栽的平菇新品種。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于工廠化瓶栽平菇品種的選育方法，同時(shí)本發(fā)明還提供選育出的平菇品種的工廠化栽培方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明可采取下述技術(shù)方案：

本發(fā)明所述的用于工廠化瓶栽平菇品種的選育方法，包括下述步驟：

第一步，選取傳統(tǒng)審定的品種菌株p99和野生菌株ny-2作為親本菌株；

第二步，將審定的品種菌株p99和野生菌株ny-2分別分離出單孢子20個(gè)，根據(jù)單孢子間菌絲形態(tài)特征的不同，分別挑選6個(gè)代表性的單孢子，然后兩兩進(jìn)行雜交，采用pda培養(yǎng)基平板培養(yǎng)，一周后挑取拮抗線兩側(cè)的雜交菌株分別轉(zhuǎn)接至新的培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，編號(hào)；采用拮抗法鑒定雜交菌株之間及與親本菌株之間的特異性，具有特異性的雜交菌株即確定為試驗(yàn)菌株；

第三步，將確定的試驗(yàn)菌株放入棉籽殼熟料小袋中栽培，進(jìn)行出菇試驗(yàn)：觀察出菇整齊度、子實(shí)體形狀、一茬菇產(chǎn)量；篩選出一茬菇生物學(xué)效率50%以上、黑色、短柄、菌蓋較厚的菌株作為第一輪瓶栽試驗(yàn)菌株；

第四步，按照棉籽殼88%，麩皮10%，石灰2%的比例配制培養(yǎng)料，含水量保持在61%；采用1000ml菌種瓶作為容器，每瓶裝干料250g，每個(gè)菌株接種4筐，16瓶/筐，22～24℃培養(yǎng)，30天菌絲滿(mǎn)瓶，后熟5～7天后現(xiàn)蕾，移入出菇室，揭去菌蓋，保持室內(nèi)溫度15～18℃，濕度80～90%，二氧化碳濃度控制在600ppm以下，光照400～500lux，子實(shí)體7～8成熟采收，觀察出菇整齊度，子實(shí)體性狀，稱(chēng)量產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率，篩選出1個(gè)雜交優(yōu)良菌株，作為第2輪瓶栽試驗(yàn)品種；

第五步，將篩選得到的優(yōu)良菌株作為參試菌株，取現(xiàn)有的三個(gè)高產(chǎn)菌株和親本菌株p99作為對(duì)照菌株，每個(gè)品種種植10筐，每筐20瓶，采用第四步的方式進(jìn)行栽培，每個(gè)品種隨機(jī)抽取3筐作為稱(chēng)量樣本，觀察出菇整齊度，子實(shí)體性狀，記載每瓶產(chǎn)量、子實(shí)體分化個(gè)數(shù)，計(jì)算生物學(xué)效率；待鮮菇采收后，50℃烘干，每個(gè)品種分別稱(chēng)量100g干品，分析其品質(zhì)，檢驗(yàn)該菌株的優(yōu)劣性，各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于或等同于高產(chǎn)菌株和親本菌株p99的即可確定為適于工廠化瓶栽的平菇品種。

本發(fā)明選育出的所述平菇品種的工廠化栽培方法，包括下述步驟：

第一步，配制接種瓶培養(yǎng)料

按照棉籽殼33~68%，玉米芯20~50%，豆粕5%，麩皮5~10%，石灰2%之重量百分比稱(chēng)量各物料，拌料均勻后裝入1100毫升聚丙烯塑料瓶中，每瓶重760＋10g，高壓滅菌后入無(wú)菌接種室殺菌；

第二步，接種

當(dāng)接種瓶溫度降至40℃后開(kāi)始接種，菌種采用上述選育出的固體菌種，接種量10%，接種后封住料面，移入培養(yǎng)室；

第三步，培養(yǎng)

培養(yǎng)室溫度保持在22~25℃，避光培養(yǎng)；28~29天待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)瓶后將培養(yǎng)室溫度降至15~18℃，保持3天后菌種瓶開(kāi)始現(xiàn)蕾，然后去掉瓶蓋，進(jìn)入出菇室；采用立體斜擺出菇模式，保持出菇室溫度12~15℃，二氧化碳濃度600ppm以下，光照強(qiáng)度200lux；六天后子實(shí)體7成熟采收。

實(shí)際配制時(shí)，所述接種瓶培養(yǎng)料的配方為：棉籽殼68%，玉米芯20%，豆粕5%，麩皮5%，石灰2%。

所述接種瓶培養(yǎng)料的配方可為：棉籽殼58%，玉米芯30%，豆粕5%，麩皮5%，石灰2%。

所述接種瓶培養(yǎng)料的配方也可為：棉籽殼43%，玉米芯40%，豆粕5%，麩皮10%，石灰2%。

所述接種瓶培養(yǎng)料的配方還可為：棉籽殼33%，玉米芯50%，豆粕5%，麩皮10%，石灰2%。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于采用傳統(tǒng)審定的品種p99和野生菌株ny-2作為親本菌株，通過(guò)單孢雜交技術(shù)選育出平菇新種質(zhì)，篩選出一個(gè)適宜工廠化生產(chǎn)的優(yōu)良菌株：p14y6，該菌株黑色，無(wú)柄，菌蓋厚，韌性好，耐運(yùn)輸，出菇溫度12～15℃，出菇整齊度95%以上，單瓶平均產(chǎn)量180g，一茬菇生物學(xué)效率可達(dá)70%以上；選育出的平菇品種采用工廠化瓶栽出菇方式循環(huán)種植，生產(chǎn)周期40天，生產(chǎn)周期內(nèi)無(wú)病蟲(chóng)害發(fā)生，可實(shí)現(xiàn)周年供應(yīng)，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)工廠化平菇專(zhuān)用品種的空白。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明篩選出的平菇菌株p14y6出菇現(xiàn)場(chǎng)照片。

圖2是本發(fā)明篩選出的平菇菌株p14y6子實(shí)體的照片。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所述的用于工廠化瓶栽平菇品種的選育方法，包括下述步驟：

第一步，選取傳統(tǒng)審定的品種菌株p99（簡(jiǎn)稱(chēng)p,引自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與區(qū)劃研究所，生物學(xué)特性：黑色高產(chǎn)，有柄，粗葉片較大）和野生菌株ny-2（簡(jiǎn)稱(chēng)y，河南省商丘市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，生物學(xué)特性：野生分離菌株，深灰色，無(wú)柄，抗性強(qiáng)，產(chǎn)量低，疊生）作為親本菌株；

第二步，將審定的品種菌株p99分離出單細(xì)胞20個(gè)，編號(hào)依次為p1，p2，……，p20；同樣，將野生菌株ny-2也分離出單孢子20個(gè)，編號(hào)依次為y1，y2，……，y20；根據(jù)單孢子間菌絲形態(tài)特征的不同，分別挑選6個(gè)代表性的單孢子，兩兩進(jìn)行雜交，采用pda培養(yǎng)基平板培養(yǎng)，一周后挑取拮抗線兩側(cè)的雜交菌株分別轉(zhuǎn)接至新的培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得雜交組合72個(gè)，分別編號(hào)即為試驗(yàn)菌株，下表1即為菌株p99和菌株ny-2分別挑選出的六個(gè)單孢子，表2為挑選出的單孢子兩兩雜交后得到的雜交組合編號(hào)；

采用拮抗法鑒定雜交菌株之間及與親本菌株之間的特異性，篩選出49個(gè)具有特異性的雜交菌株即確定為試驗(yàn)菌株；

第三步，將確定的試驗(yàn)菌株放入棉籽殼熟料小袋中栽培，進(jìn)行出菇試驗(yàn)：每組10袋，每袋干料重200g，常規(guī)出菇管理，稱(chēng)量記載不同雜交菌株之間產(chǎn)量、生物學(xué)性狀差異；觀察出菇整齊度、子實(shí)體形狀、一茬菇產(chǎn)量后，篩選出一茬菇生物學(xué)效率50%以上、黑色（灰色）、短柄、菌蓋較厚，產(chǎn)量在700g以上的菌株15個(gè)：p14y6，p14y9，y9p9，y9p7，y9p10，y6p10，p3y6，y6p3，y6p9，y6p14，y9p14，p10y9，y9p3，y8p3，p10y6，見(jiàn)表3，作為第一輪瓶栽試驗(yàn)菌株；

第四步，按照棉籽殼88%，麩皮10%，石灰2%的比例配制培養(yǎng)料，含水量保持在61%；采用1000ml菌種瓶作為容器，每瓶裝干料250g，15個(gè)雜交菌株每個(gè)接種4筐，16瓶/筐，22～24℃培養(yǎng)，30天菌絲滿(mǎn)瓶，后熟5～7天后現(xiàn)蕾，移入出菇室，揭去菌蓋，保持室內(nèi)溫度15～18℃，濕度80～90%，二氧化碳濃度控制在600ppm以下，光照400～500lux，子實(shí)體7～8成熟采收，觀察出菇整齊度，子實(shí)體性狀，稱(chēng)量產(chǎn)量，計(jì)算生物學(xué)效率，其中p14y6菌株表現(xiàn)最優(yōu)，從圖1、圖2及結(jié)果分析表明，p14y6菌株出菇集中，平均出菇率為93.7%；平均每瓶一茬菇產(chǎn)量達(dá)到178g，生物學(xué)效率71.2%，產(chǎn)量最高，子實(shí)體形狀較好，菌蓋藍(lán)黑色，直徑3～4.5cm，厚1～1.2cm；韌性強(qiáng)；菌柄短，長(zhǎng)1～1.2cm，直徑0.5～1cm，見(jiàn)下表4；

第五步，將篩選得到的優(yōu)良菌株p14y6作為參試菌株，取現(xiàn)有的三個(gè)高產(chǎn)菌株（黑抗650、農(nóng)平4號(hào)、灰美2號(hào)）和親本菌株p99作為對(duì)照菌株，每個(gè)品種種植10筐，每筐20瓶，采用第四步的方式進(jìn)行栽培，從下表5、表6可以看出：5個(gè)參試菌株27～29天菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)瓶，滿(mǎn)瓶時(shí)間差異較??；p14y6出菇率的整齊度為96.8%，顯著高于親本及3個(gè)對(duì)照菌株；平均單瓶產(chǎn)量185g，生物學(xué)效率74%，顯著高于4個(gè)對(duì)照品種10～14%，單朵最重達(dá)到220g/瓶，此時(shí)生物學(xué)效率為88%。從子實(shí)體性狀可以看出p14y6菇蕾分化少，成菇數(shù)量較多，菌蓋大小適中，菌柄短，韌性強(qiáng)；黑抗650、農(nóng)平4號(hào)、灰美2號(hào)三個(gè)對(duì)照品種分化較多，成菇數(shù)量少，菌蓋韌性較差。鮮菇采收后，稱(chēng)取一茬菇定量鮮菇，50℃烘干，按照四分法每個(gè)品種分別稱(chēng)量100g干品，分析其品質(zhì)，檢驗(yàn)該菌株的優(yōu)劣性，

從子實(shí)體的品質(zhì)分析結(jié)果可以看出p14y6菌株含有17種氨基酸，每100g干菇總氨基酸含量17.12g，蛋白質(zhì)含量25g，比親本略低；粗脂肪含量1.6g，與親本相當(dāng)；粗纖維7.72g比親本略高；蛋白質(zhì)含量高于3個(gè)對(duì)照菌株1.3-3.4%，粗纖維含量高于對(duì)照菌株，總氨基酸及粗脂肪含量差異較小，見(jiàn)表7、表8。

篩選出的菌株p14y6各指標(biāo)均優(yōu)于或等同于現(xiàn)有的高產(chǎn)菌株和親本菌株，可以確定菌株p14y6即為適于工廠化瓶栽的平菇新品種。

本發(fā)明篩選出的平菇品種p14y6的工廠化栽培方法包括下述步驟：

第一步，配制接種瓶培養(yǎng)料

為降低生產(chǎn)成本，本發(fā)明采用棉籽殼、玉米芯、豆粕、麩皮和石灰按下述重量百分配比組成四個(gè)培養(yǎng)料配方，具體為：

配方1：棉籽殼68%，玉米芯20%，豆粕5%，麩皮5%，石灰2%；

配方2：棉籽殼58%，玉米芯30%，豆粕5%，麩皮5%，石灰2%；

配方3：棉籽殼43%，玉米芯40%，豆粕5%，麩皮10%，石灰2%；

配方4：棉籽殼33%，玉米芯50%，豆粕5%，麩皮10%，石灰2%；

配制時(shí)，準(zhǔn)確稱(chēng)量上述種原料，玉米芯提前18~24小時(shí)按照1:2.2的料水比預(yù)濕，然后加入其它原料后按照1:1.3的料水比加水，攪拌機(jī)攪拌40分鐘，攪拌機(jī)連接自動(dòng)裝瓶機(jī)，按每瓶760＋10g裝入1100毫升聚丙烯塑料瓶中，高壓滅菌120分鐘，帶壓力降至0后出鍋，進(jìn)入無(wú)菌接種室殺菌，無(wú)菌接種室安裝空氣凈化無(wú)菌接種設(shè)備，紫外線、臭氧殺菌40分鐘；

第二步，接種

開(kāi)啟空氣凈化過(guò)濾器，當(dāng)菌種瓶溫度降至40℃左右后開(kāi)始接種，菌種采用本發(fā)明選育出的固體菌種p14y6，接種量10%，接種后封住料面，移入培養(yǎng)室；

第三步，培養(yǎng)

培養(yǎng)室溫度保持在22~25℃，避光培養(yǎng)；28~29天待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)瓶后將培養(yǎng)室溫度降至15~18℃，保持3天后菌種瓶開(kāi)始現(xiàn)蕾，然后去掉瓶蓋，進(jìn)入出菇室；采用立體斜擺出菇模式，出菇室安裝排風(fēng)系統(tǒng)、霧化加濕系統(tǒng)、led光照系統(tǒng)、空調(diào)系統(tǒng)、環(huán)境監(jiān)控系統(tǒng)、吊裝機(jī)、自動(dòng)化控制系統(tǒng)。室內(nèi)采用層架立體斜擺出菇，架子靈活移入一處，架子兩面可分別擺放3筐菌種瓶，筐與架子成60度角。采用吊裝機(jī)直接將在室外擺好的出菇架子直接運(yùn)送、擺放至出菇架上，出菇室面積150m²，一次可擺放8000瓶，保持室內(nèi)溫度12～15℃，二氧化碳濃度600ppm以下，光照強(qiáng)度200lux以上?，F(xiàn)蕾后，6天子實(shí)體長(zhǎng)至7成熟采摘。采摘后的菌種瓶直接用吊裝機(jī)移出出菇室，直接運(yùn)輸至挖瓶機(jī)，掏瓶，掏瓶后的菌種瓶可直接再次裝瓶，實(shí)現(xiàn)循環(huán)利用。

表9為培養(yǎng)料采用不同配方時(shí)（以純棉籽殼作為培養(yǎng)料對(duì)照配方ck），在同等管理?xiàng)l件下各指標(biāo)的對(duì)比數(shù)據(jù)：

從表9顯示的結(jié)果可以看出：本發(fā)明采用的培養(yǎng)料配方1~4其菌絲長(zhǎng)勢(shì)、產(chǎn)量、投入產(chǎn)出比均優(yōu)于采用純棉籽殼作為培養(yǎng)料，而采用配方3（棉籽殼43%，玉米芯40%，豆粕5%，麩皮10%，石灰2%）作為平菇菌株培養(yǎng)料時(shí)，投入產(chǎn)出比最高，為1:2.5。