本發(fā)明屬于天然藥物和藥物治療領域，特別涉及一種具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物及其制備方法和用途。
背景技術：
惡性腫瘤仍然嚴重危害人類生命健康極大的重大疾病之一。全球癌癥發(fā)病信息數(shù)據(jù)庫指出，癌癥發(fā)病正在從發(fā)達國家向發(fā)展中國家擴散，各類癌癥導致的死亡是僅次于心血管疾病的第二大死因。近年來，盡管腫瘤化療取得了相當大的進步，腫瘤患者的生存時間明顯延長，特別是對早幼粒細胞白血病等的治療有了突破性進展，緩解率達到85％以上，但對惡性腫瘤90％以上的實體瘤的治療還遠遠未能達到滿意的效果，為此尋找安全、有效、低毒的抗腫瘤藥物和研究其作用機理，具有重要國家戰(zhàn)略意義。
齊墩果酸(oleanicacid，oa)，又稱土當歸酸或慶四素，是一種齊墩果烷型五環(huán)三萜類化合物，廣泛分布于自然界，如木犀科植物齊墩果、龍膽科植物青葉膽、五加科植物楤木等。并具有抗hiv、護肝、解肝毒、抗腫瘤、降血糖、降血脂等多種生物活性。其結構式如下所示：
齊墩果酸能顯著降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性，保護肝谷胱甘肽的排空，減輕肝細胞的變性及降低炎癥反應。齊墩果酸在具有保肝護肝活性的同時具有良好的廣譜抗腫瘤活性，能作用于腫瘤發(fā)生的不同階段，包括抑制腫瘤的形成、阻礙腫瘤誘發(fā)和誘導腫瘤細胞分化以及有效地抑制腫瘤新生血管生成，阻止腫瘤細胞的侵害和轉(zhuǎn)移。盡管齊墩果酸來源豐富、使用安全，但其在抗糖尿病、抗炎和抗腫瘤等方面的活性較弱,并且藥代動力學指標未達到臨床標準。
目前，對天然產(chǎn)物的結構進行修飾和改造來增強藥物活性、溶解性及靶向性的課題引起了藥物化學工作者的廣泛關注，將溶解性好或靶向癌細胞的小分子作為新藥分子設計和合成的基本砌塊已成為抗腫瘤藥物研究的重要途徑。
技術實現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術中存在的缺點和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物；該偶聯(lián)物是由齊墩果酸與硫辛酸偶聯(lián)而成。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物的制備方法。
本發(fā)明的再一目的在于提供上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物的用途。
本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)：
一種具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物，該偶聯(lián)物是由齊墩果酸與硫辛酸偶聯(lián)而成，具有如下式(ⅰ)所示的結構式：
所述齊墩果酸和硫辛酸通過酯鍵偶聯(lián)。
上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物的制備方法，包括以下操作步驟：將齊墩果酸和硫辛酸溶解在無水二氯甲烷中，在吡啶和4-二甲氨基吡啶的催化下，室溫反應過夜，過濾，過硅膠色譜柱，旋蒸，干燥，即可獲得目標化合物。
所述室溫為25-30℃。
所述吡啶和4-二甲氨基吡啶的摩爾比為(1～3):1。
所述硅膠色譜柱所用的洗脫溶劑為乙酸乙酯和石油醚，溶劑體積比為(2～10):7。
上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物及其藥學上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的用途。
上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物及其藥學上可接受的鹽在制備抗炎藥物或美容品中的用途。
一種藥物組合物，其中含有治療有效量的上述具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物或其藥學上可接受的鹽及載體。
上述藥物組合物在制備抗腫瘤藥物、抗炎藥物或美容品中的用途。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有如下突出的優(yōu)點及有益效果：
本發(fā)明合成了一種具有抗腫瘤活性的偶聯(lián)物，通過體外mtt檢測實驗，發(fā)現(xiàn)其對腫瘤細胞株(mcf-7、bc-3和hepg2細胞)具有很好的抑制效果，比齊墩果酸的ic50值強3-5倍，但對正常肝細胞l-o2低毒。該化合物以兩個藥物分子偶聯(lián)成前藥的方式治療癌癥，克服齊墩果酸溶解性差和抗癌藥物選擇性低的問題，達到通過增強細胞凋亡的途徑清除癌細胞的效果。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
實施例1：
將齊墩果酸(1.1mmole)和硫辛酸(1.3eq)溶解在無水二氯甲烷(30ml)中，在吡啶(0.5g)和4-二甲氨基吡啶(0.5g)的催化下，室溫25-30℃下反應過夜，過濾，過硅膠色譜柱(所用的洗脫溶劑為體積比(3～8):7的乙酸乙酯和石油醚)，旋蒸，干燥，即可獲得白色固體目標化合物。經(jīng)液相色譜質(zhì)譜和核磁共振技術分析，所新制備的白色固體目標化合物為具有式(ⅰ)所示結構的偶聯(lián)物：在步驟中，采用化合物1(1.1mmole)，其結構如下所示：
實施例2
目標化合物的體外抗腫瘤效應評價。本實施例采用乳腺癌mcf-7、淋巴瘤bc-3和肝癌hepg2細胞對其進行藥效評價，同時lo2肝臟細胞對其進行毒性檢測。
取對數(shù)生長期的細胞，根據(jù)細胞的大小接種4～40×103個于96孔板上，待生長24小時后，棄上清，然后按以下分組給藥：腫瘤細胞設不加藥組和加藥組(濃度0.5～100μm對腫瘤細胞，濃度5～200μm對lo2細胞)，齊墩果酸偶聯(lián)硫辛酸ua-la(即實施例1所得目標化合物)，齊墩果酸ua，硫辛酸la和兩者等摩爾混合物ua+la。每組設4～6個復孔，培養(yǎng)72小時，棄上清，加入100μl含0.5mg/ml的mtt(四氮唑鹽)無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)4h，加入100μldmso(二甲亞砜)，放置于微型振蕩儀上振蕩10min，再置于酶標儀上570nm處檢測od值。正常人細胞系lo2做對照。每次實驗均重復3次。
結果顯示，隨著藥物濃度增加，與相應不加藥對照組比較，細胞增殖活性分別下降，說明化合物呈濃度依賴性抑制腫瘤細胞細胞增殖。而對正常肝細胞系lo2細胞的增殖活性未有變化，顯示出該化合物對正常細胞具有低毒特性(表1)。
表1不同細胞的ic50值(72h)及不同化合物ic50比值
上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。