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一種辣木紅糖及其制備方法與流程

文檔序號(hào):11278906閱讀:416來源:國知局
本發(fā)明涉及制糖領(lǐng)域,更具體地,涉及一種辣木紅糖及其制備方法。
背景技術(shù)
:辣木是多年生熱帶落葉喬木,營養(yǎng)豐富而全面,大量研究也表明辣木具有很好的功能活性,因而引起了全世界的廣泛關(guān)注。我國衛(wèi)生部也于2012年批準(zhǔn)辣木葉為新資源食品。辣木葉含的類黃酮、多酚等物質(zhì)使其有很好的抗氧化活性;其降血糖、降血脂、降血壓等功能則與其含有的糖苷、谷甾醇有關(guān);此外,辣木葉中的生物堿、硫代葡萄糖酸鹽、多酚等物質(zhì)使其具有消炎、抗癌、抗茵等方面的功效。然而,辣木葉中含有一定量的吡咯烷類生物堿,使用過量可能存在一定的安全風(fēng)險(xiǎn),因此對于功能性食品而言,降低吡咯烷類生物堿的含量非常必要。紅糖作為一種天然營養(yǎng)甜味劑,主要成份是蔗糖,又含有甘蔗天然的營養(yǎng)保健成份,是人類生命活動(dòng)和生理代謝所必不可少的物質(zhì),但因進(jìn)食不當(dāng)會(huì)誘發(fā)某些現(xiàn)代疾病。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),我國的糖尿病患者已超過1億人,并且每年以10%的速度遞增。異麥芽酮糖作為蔗糖的同分異構(gòu)體,也是由葡萄糖和果糖所組成的一種雙糖,是目前公認(rèn)的健康糖。由于它只能被小腸內(nèi)的非特異性酶類降解而消化吸收,使它能夠持久穩(wěn)定地為身體提供能量,其指標(biāo)反應(yīng)在低的血液升糖指數(shù)(gi)和低的胰島素上升指數(shù)(ii)上,被稱為二十一世紀(jì)的功能性新食品,因此通過生物工程手段開發(fā)低gi值紅糖,不僅兼具甘蔗豐富保健成份,滿足人們對甜品的需求,而且可以防蛀護(hù)齒、強(qiáng)腦健身、瘦身抑胖、防病益生等多種功能,具有巨大的潛在市場。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于克服上述困難,提供一種辣木紅糖及其制備方法。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:一種辣木紅糖的制備方法,包括如下步驟:(1)用復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑發(fā)酵處理辣木葉,發(fā)酵結(jié)束后滅菌,干燥,粉碎,獲得辣木葉精粉;(2)將復(fù)合酶固定化于蔗渣炭中,得到蔗渣炭固定化酶;所述復(fù)合酶為葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶;(3)將蔗渣炭固定化酶充填到轉(zhuǎn)化柱中,將蔗汁通入轉(zhuǎn)化柱中循環(huán),得到轉(zhuǎn)化糖液;(4)將轉(zhuǎn)化糖液與辣木葉精粉混勻,經(jīng)煮糖,加工,即得低gi的辣木紅糖。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(1)中,復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑含有球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌,三者的活菌數(shù)比例為2:(1~3):(1~3)。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(1)中,復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑的接種量為每g辣木葉中復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑總活菌數(shù)≥107cfu,發(fā)酵處理5~7天,發(fā)酵的溫度為30~37℃。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(2)中,蔗渣炭為混合酸活化的蔗渣炭,所述混合酸含有磷酸和硝酸。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(2)中,蔗渣炭的粒徑為0.1~2mm。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(2)中,蔗渣炭的比表面積600~1200m2/g。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(2)中,將復(fù)合酶固定化于蔗渣炭中的方法為:將復(fù)合酶與蔗渣炭混合,動(dòng)態(tài)吸附至固定完全,去除殘留酶,干燥。作為上述方法的優(yōu)選,復(fù)合酶中,葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶的酶活比為1:(10~20)。作為上述方法的優(yōu)選,步驟(3)中,蔗汁先濃縮至可溶性固形物含量為25~40°brix,通入固定化酶轉(zhuǎn)化柱中循環(huán),循環(huán)至轉(zhuǎn)化糖液中異麥芽酮糖和果糖的二者總重量占總糖重量的40~60%。一種辣木紅糖,采用上述任一種制備方法獲得。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明利用微生物發(fā)酵制備辣木葉精粉,將蔗糖異構(gòu)酶和葡萄糖異構(gòu)酶固定化于蔗渣炭,形成蔗渣炭固定化酶,將蔗汁通過固定化酶轉(zhuǎn)化,最后轉(zhuǎn)化糖液與辣木葉精粉混合后,經(jīng)濃縮,加工,獲得低gi值的辣木紅糖。本發(fā)明方法具有下述優(yōu)點(diǎn):(1)本發(fā)明方法利用微生物處理辣木葉,大大降低了辣木葉中的的吡咯烷類生物堿,使得辣木紅糖食用更安全,保健功能更豐富。(2)本發(fā)明方法利用蔗糖異構(gòu)酶和葡萄糖異構(gòu)酶協(xié)同催化,使得產(chǎn)品的gi值更低,而僅使用蔗糖異構(gòu)酶則難以使產(chǎn)品滿足低gi值的要求。(3)本發(fā)明方法采用蔗渣炭作為固定化載體,相比于常規(guī)的凝膠固定化載體,本發(fā)明的蔗渣炭用于固定復(fù)合酶的時(shí)間短,蔗糖異構(gòu)酶負(fù)載率更高,固定化載體價(jià)格低廉,并且易于回收和清洗,大大節(jié)約了生產(chǎn)成本,提高了生產(chǎn)效率;此外,蔗渣炭來源于剩余的廢棄蔗渣,可實(shí)現(xiàn)廢棄物資源化利用,并且使用更安全和簡便。(4)本發(fā)明辣木紅糖的果糖、異麥芽酮糖含量高,產(chǎn)品gi值低,風(fēng)味獨(dú)特,甜度適宜,還有強(qiáng)腦健身、防蛀護(hù)齒、瘦身抑胖、防病益生等多種功能,克服傳統(tǒng)紅糖蔗糖含量高,過甜過膩等缺點(diǎn),并且風(fēng)險(xiǎn)成份吡咯烷生物堿未檢出,食用安全,且兼具辣木天然保健成份,特別適合亞健康、糖尿病人群。具體實(shí)施方式辣木(moringa)又稱鼓槌樹(drumsticktree),是多年生熱帶落葉喬木,小葉為橢圓形、寬橢圓形或卵型,無毛?;閳A錐形花序左右對稱腋生,為兩性花,有香味,萼筒盆狀(萼杯狀),開花時(shí)向下向外彎曲;花瓣有五,白色或奶黃色,氣味芳香;辣木木葉片富含多種礦物質(zhì)、維生素、氨基酸、抗氧素、自然防炎體和礦物質(zhì),作為蔬菜和食品有增進(jìn)營養(yǎng),食療保健的功能;也廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健等方面。本發(fā)明中,術(shù)語“gi”是指血糖生成指數(shù)(glycemicindex),表示某種食物升高血糖效應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)食品(通常為葡萄糖)升高血糖效應(yīng)之比,通常反映食物引起人體血糖升高程度的指標(biāo),是人體進(jìn)食后機(jī)體血糖生成的應(yīng)答狀況。本發(fā)明中,術(shù)語“低gi”是指食物的gi值可分為三種等級:高gi值為:gi值≥70;中g(shù)i值為:gi值56~69;低gi值為:gi值≤55。本發(fā)明中,蔗渣炭是固定化載體,任何與蔗渣炭有類似的物理和/或化學(xué)特性的生物炭,也應(yīng)該屬于本發(fā)明的類似技術(shù)方案,如采用秸稈、椰殼、稻殼、鋸末、木屑、玉米芯、花生殼、棉殼等制備的生物炭。本發(fā)明中,復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑由球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌混合配制而成,經(jīng)復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑發(fā)酵后的辣木葉,吡咯烷生物堿含量大幅降低,達(dá)到安全水平,發(fā)酵方法采用常規(guī)微生物發(fā)酵工藝,控制合適的含水量和ph。本發(fā)明中,蔗渣炭可以不經(jīng)過處理,也可以經(jīng)過酸活化,酸活化方法不限于本發(fā)明實(shí)施例所提供的方案,可以是單一的酸,也可以是混合酸,酸可以是鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、醋酸等,本發(fā)明優(yōu)選采用含有磷酸和硝酸的混合酸進(jìn)行活化;酸活化方法中,酸浸泡時(shí)長優(yōu)選為18~24h,再進(jìn)行高溫活化,高溫活化條件同一般生物炭制備方法;酸活化后的蔗渣炭擁有更好的負(fù)載性能。本發(fā)明中,復(fù)合酶的固定化方法不僅限于實(shí)施例所提供的方案,可以采用常規(guī)的固定化方法,提供的優(yōu)選方案是將復(fù)合酶通過動(dòng)態(tài)吸附于蔗渣炭中,動(dòng)態(tài)吸附時(shí)長以復(fù)合酶固定完全為準(zhǔn),通常的吸附時(shí)長為6~10h,但不限于此。本發(fā)明中,蔗渣炭固定化酶還可以用微波活化的方法提高酶活水平,活化條件不限于本發(fā)明實(shí)施例所提供的方案,優(yōu)選的微波活化條件為功率250~500w,溫度45~55℃,活化時(shí)間15~25min。本發(fā)明中,蔗汁通入固定化酶轉(zhuǎn)化柱循環(huán),為了提高轉(zhuǎn)化率,優(yōu)選的方法是將蔗汁先經(jīng)過濃縮,提高糖含量,同時(shí)根據(jù)酶活性需求,調(diào)節(jié)ph為6.0~7.5,通入溫度為30~55℃,但不限于此。本發(fā)明中,加工方法包括但不僅限于起晶,打砂,注模等工藝。下面將結(jié)合具體實(shí)例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。具體實(shí)施方式中未特別注明的具體實(shí)驗(yàn)條件的實(shí)驗(yàn)方法,通常按照常規(guī)條件操作;未特別注明的具體試劑均為市售。本發(fā)明中未特別說明的體積質(zhì)量比或質(zhì)量體積比,都是按照ml與g相對應(yīng)為單位。本發(fā)明采用的葡萄糖異構(gòu)酶為市售,酶活為80萬u/g,蔗糖異構(gòu)酶為沙雷氏桿菌發(fā)酵獲得,酶活為1000~4000u/g。本發(fā)明采用的復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑由球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌混合配制而成,使用前采用常規(guī)方法活化處理。實(shí)施例1一種辣木紅糖的制備方法,包括如下步驟:(1)將新鮮辣木葉晾曬,粉碎至40目,調(diào)節(jié)含水量至80%,調(diào)節(jié)ph至7;將球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌按活菌數(shù)為2:3:1配置成復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑,按每g辣木葉中的最終總活菌數(shù)為108cfu接種到辣木葉上,控制發(fā)酵溫度為30~37℃,發(fā)酵6天,去除吡咯烷生物堿,發(fā)酵結(jié)束后,滅菌,烘干至含水量≤5%,粉碎至400目,獲得辣木葉精粉;采用高效液相色譜法測定吡咯烷生物堿,對比未發(fā)酵處理的情況,所得辣木葉精粉吡咯烷生物堿降解率78.6%;(2)將蔗渣粉碎,按蔗渣與混合酸的質(zhì)量體積比為1g:5ml添加混合酸,混合酸是體積分?jǐn)?shù)為15%的磷酸和硝酸混合酸,磷酸和硝酸按體積比1:1混合;浸漬24小時(shí),800℃活化0.55h,冷卻,用蒸餾水洗滌至中性,烘干,粉碎至粒徑0.65mm,比表面積1013m2/g,獲得酸活化的蔗渣炭;(3)將葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶按酶活比為1:15混合,溶于ph值為6.8的磷酸緩沖液中,配置得到含酶量為8mg/ml的復(fù)合酶液,將復(fù)合酶液與酸活化的蔗渣炭按體積質(zhì)量比為6ml/g混合,動(dòng)態(tài)吸附至固定完全,無菌過濾去除酶液,用無菌水清洗去除表面殘留酶,干燥,得到蔗渣炭固定化酶;(4)將蔗渣炭固定化酶通過微波活化,活化條件為微波功率400w,溫度設(shè)置50℃,活化20min,充填到固定化酶轉(zhuǎn)化柱中;(5)甘蔗榨汁后,將榨汁濃縮至可溶性固形物含量為30°brix,調(diào)節(jié)ph至7;在40℃下,用流動(dòng)泵將濃縮蔗汁通入固定化酶轉(zhuǎn)化柱中,循環(huán)至轉(zhuǎn)化糖液中異麥芽酮糖、果糖二者的總重量占總糖重量的52%,得到轉(zhuǎn)化糖液;(6)將轉(zhuǎn)化糖液與辣木葉精粉按體積質(zhì)量比15ml/g混合均勻,采用列管式真空濃縮機(jī)濃縮熬糖,加工,即得辣木紅糖;實(shí)施例2一種低gi值的辣木紅糖的制備方法,包括如下步驟:(1)將新鮮辣木葉晾曬,粉碎至50目,調(diào)節(jié)含水量至70%,調(diào)節(jié)ph至7.5;將球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌按活菌數(shù)為2:1:3配置成復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑,按每g辣木葉中的最終總活菌數(shù)為108cfu接種到辣木葉上,控制發(fā)酵溫度為30~37℃,發(fā)酵6天,去除吡咯烷生物堿;發(fā)酵結(jié)束后,滅菌,烘干至含水量≤5%,粉碎至400目,獲得辣木葉精粉;采用高效液相色譜法測定吡咯烷生物堿,對比未發(fā)酵處理的情況,所得辣木葉精粉中吡咯烷生物堿降解率71.7%;(2)將蔗渣粉碎,按蔗渣與混合酸的質(zhì)量體積比為1g:4ml添加混合酸,混合酸是體積分?jǐn)?shù)為20%的磷酸和硝酸混合酸,磷酸和硝酸按體積比1:1混合;浸漬20小時(shí),800℃活化1h,冷卻,用蒸餾水洗滌至中性,烘干,粉碎至粒徑0.65mm,比表面積1013m2/g,獲得酸活化的蔗渣炭;(3)將葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶按酶活比為1:14混合,溶于ph值為7.5的磷酸緩沖液中,配置得到含酶量為10mg/ml的復(fù)合酶液,將復(fù)合酶液與酸活化的蔗渣炭按體積質(zhì)量比為5ml/g混合,動(dòng)態(tài)吸附至固定完全,無菌過濾去除酶液,用無菌水清洗去除表面殘留酶,干燥,得到蔗渣炭固定化酶;(4)將蔗渣炭固定化酶通過微波活化,活化條件為微波功率500w,溫度設(shè)置45℃,活化15min,充填到固定化酶轉(zhuǎn)化柱中;(5)甘蔗榨汁后,將榨汁濃縮至可溶性固形物含量為40°brix,調(diào)節(jié)ph至7.5;在55℃下,用流動(dòng)泵將濃縮蔗汁通入固定化酶轉(zhuǎn)化柱中,循環(huán)至轉(zhuǎn)化糖液中異麥芽酮糖、果糖的二者總重量占總糖重量的60%,得到轉(zhuǎn)化糖液;(6)將轉(zhuǎn)化糖液與辣木葉精粉按體積質(zhì)量比20ml/g混合均勻,采用列管式真空濃縮機(jī)濃縮熬糖,加工,即得辣木紅糖;實(shí)施例3一種辣木紅糖的制備方法,包括如下步驟:(1)將新鮮辣木葉晾曬,粉碎至30目,調(diào)節(jié)含水量至75%,調(diào)節(jié)ph至7;將球形節(jié)桿菌、地衣芽孢桿菌、棒桿菌按活菌數(shù)為1:1:1配置成復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑,按每g辣木葉中的最終總活菌數(shù)為108cfu接種到辣木葉上,控制發(fā)酵溫度為30~37℃,發(fā)酵6天,去除吡咯烷生物堿,發(fā)酵結(jié)束后,滅菌,烘干至含水量≤5%,粉碎至400目,獲得辣木葉精粉;采用高效液相色譜法測定吡咯烷生物堿,對比未發(fā)酵處理的情況,所得辣木葉精粉中吡咯烷生物堿降解率75.4%;(2)以粒徑為0.65mm未處理的蔗渣炭為固定化載體;將葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶按酶活比為1:16混合,溶于ph值為6.5的磷酸緩沖液中,配置得到含酶量為5mg/ml的復(fù)合酶液,將復(fù)合酶液與蔗渣炭按體積質(zhì)量比為10ml/g混合,動(dòng)態(tài)吸附至固定完全,無菌過濾去除酶液,用無菌水清洗去除表面殘留酶,干燥,得到蔗渣炭固定化酶;(3)將蔗渣炭固定化酶通過微波活化,活化條件為微波功率300w,溫度設(shè)置55℃,活化25min,充填到固定化酶轉(zhuǎn)化柱中;(4)甘蔗榨汁后,將榨汁濃縮至可溶性固形物含量為25°brix,調(diào)節(jié)ph至6.5;在30℃下,用流動(dòng)泵將濃縮蔗汁通入固定化酶轉(zhuǎn)化柱中,循環(huán)至轉(zhuǎn)化糖液中異麥芽酮糖、果糖的二者總重量占總糖重量的45%,得轉(zhuǎn)化糖液,;(5)將轉(zhuǎn)化糖液與辣木葉精粉按體積質(zhì)量比25ml/g混合均勻,采用列管式真空濃縮機(jī)濃縮熬糖,加工,即得辣木紅糖;實(shí)施例1~3的辣木紅糖的吡咯烷生物堿含量檢測實(shí)施例1~3的辣木紅糖中吡咯烷生物堿的含量,采用高效液相色譜法,具體操作參考文獻(xiàn)phytochemicalcharacterizationusinggc-msanalysisofmethanolicextractofmoringaoleifera(familymoringaceae)plantcultivatediniraq;檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn):實(shí)施例1~3的方法制備的辣木紅糖未檢出吡咯烷生物堿,可見經(jīng)過復(fù)合微生物發(fā)酵菌劑發(fā)酵處理的辣木葉,吡咯烷生物堿含量大幅度降低,可以安全應(yīng)用與紅糖等食品的制備中。實(shí)施例1的辣木紅糖的血糖生成指數(shù)評定及營養(yǎng)分析隨機(jī)選擇不同年齡段試驗(yàn)對象10人,以葡萄糖為基準(zhǔn),紅糖gi值=服用紅糖后120min的血糖應(yīng)答曲線下增加的面積/服用葡萄糖后120min的血糖應(yīng)答曲線下增加的面積×100,用實(shí)施例1制備的辣木紅糖進(jìn)行測試。表1、血糖生成指數(shù)測定結(jié)果試驗(yàn)對象gi值1472503484455496467458409461047平均值46.3試驗(yàn)結(jié)果如下表1所示,本發(fā)明的辣木紅糖的gi值實(shí)測均值46.3,gi值≤55,滿足低gi食品標(biāo)準(zhǔn),屬于低gi的辣木紅糖;而市售紅糖gi值一般在90~105,gi值≥70,屬于高gi紅糖。表2、辣木紅糖營養(yǎng)分析普通紅糖辣木紅糖總氨基酸mg/g2.524.46必需氨基酸比例/%1528.3維生素a(mg/100g)<12.78維生素c(μg/100g)<15.82β-胡蘿卜素(mg/100g)0.182.98鐵(mg/100g)<11.08鋅(mg/kg)1.61.79鈣(mg/kg)2.215.53對實(shí)施例1的辣木紅糖進(jìn)行營養(yǎng)成分分析,以普通紅糖為對比,結(jié)果如表2所示,辣木紅糖總氨基酸、必需氨基酸比例、維生素a、c、β-胡蘿卜素、鐵、鋅、鈣等營養(yǎng)成分含量均有明顯提升,大大提高了紅糖的營養(yǎng)和保健功能,適合亞健康人群。對比例僅用蔗糖異構(gòu)酶作為固定化酶,通入濃縮糖液進(jìn)行轉(zhuǎn)化,其他實(shí)施條件同實(shí)施例1,最終制備得到的轉(zhuǎn)化糖液中,異麥芽酮糖、果糖的二者總量占總糖量的35%。獲得的紅糖gi值為60~70,不符合低gi值食品要求。實(shí)驗(yàn)例1、混合酸法制備蔗渣炭固定化載體對比實(shí)驗(yàn)將實(shí)施例1所述混合酸法制備蔗渣炭固定化載體,對比單一酸法(硝酸法、磷酸法),利用比表面積測定儀,檢測結(jié)果如表3所示,混合酸法制備的蔗渣炭固定化載體比表面積為1032.6m2g-1,優(yōu)于單一酸法。表3、混合酸法對比實(shí)驗(yàn)硝酸法磷酸法混合酸法比表面積/m2g-1672.7806.31032.6實(shí)驗(yàn)例2、復(fù)合酶酶活比優(yōu)化將實(shí)施例1葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶分別按酶活比1:10、1:12、1:14、1:16,1:18混合,其他實(shí)施條件同實(shí)施例1,測定轉(zhuǎn)化糖液中葡萄糖、蔗糖、異麥芽酮糖、果糖的含量;葡萄糖、果糖、蔗糖測定方法參照gb5009.8-2016;異麥芽酮糖測定方法參照國標(biāo)gb1886.182-2016。表4、復(fù)合酶酶活比優(yōu)化結(jié)果如表4所示,當(dāng)葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶的酶活比為1:(14~18),異麥芽酮糖含量為48%~50%,蔗糖含量低于48%,可見采用特定酶活比的葡萄糖異構(gòu)酶和蔗糖異構(gòu)酶作為固定化酶,能夠降低轉(zhuǎn)化糖液中蔗糖含量,提高異麥芽酮糖含量。實(shí)驗(yàn)例3、蔗渣炭粒徑優(yōu)選將實(shí)施例1蔗渣炭粒徑選為0.1mm、0.25mm、0.45mm、0.65mm、0.85mm五種粒徑,其他實(shí)施條件同實(shí)施例1,測定蔗渣炭固定化復(fù)合酶中蔗糖異構(gòu)酶負(fù)載率、葡萄糖異構(gòu)酶負(fù)載率、糖液活性炭殘留、酶轉(zhuǎn)化柱的情況;負(fù)載率=固定化酶活力/投入總酶活力。表5、蔗渣炭粒徑的優(yōu)選結(jié)果如表5所示,隨著蔗渣炭粒徑的增大,蔗糖異構(gòu)酶負(fù)載率、葡萄糖異構(gòu)酶負(fù)載率逐步降低,但是糖液蔗渣炭粉殘留及酶轉(zhuǎn)化柱的堵塞情況逐步減少,其中,0.65mm的蔗渣炭粒徑表現(xiàn)出較高的負(fù)載率及較低的殘留率;說明一定粒徑的蔗渣炭固定化載體適用于蔗糖異構(gòu)酶和葡萄糖異構(gòu)酶的共固定化,擁有更好的回收性能。實(shí)驗(yàn)例4、固定化載體對比實(shí)驗(yàn)將實(shí)施例1的蔗渣炭固定化載體與常規(guī)的凝膠固定化載體相對比,二者應(yīng)用于蔗糖異構(gòu)酶和葡萄糖異構(gòu)酶的共固定化中的性能對比。常規(guī)的固定化載體的制備方法為:以明膠為固定化載體,以戊二醛為交聯(lián)劑,制備得到復(fù)合酶固定化載體,配置ph為8.6的27wt%的明膠,加熱至80℃使其完全溶解,待溫度下降到50~60℃,按比例加入兩種酶,攪拌均勻后加入0.15wt%戊二醛,再迅速攪拌均勻置于4℃凝固過夜,用0.05wt%戊二醛二次交聯(lián),反復(fù)清洗凝膠,切塊備用,其他技術(shù)方案同實(shí)施例1。表6、固定化載體性能對比結(jié)果固定化載體蔗渣炭固定化酶明膠-戊二醛固定化酶固定化時(shí)間16h48h蔗糖異構(gòu)酶負(fù)載率56.8%45.7%葡萄糖異構(gòu)酶負(fù)載率76.6%81.3%固定化載體價(jià)格3-8元/kg60-100元/kg如表6所示,實(shí)施例1的蔗渣炭固定化載體更適于蔗糖異構(gòu)酶和葡萄糖異構(gòu)酶的共固定化,其固定化時(shí)間更短,蔗糖異構(gòu)酶負(fù)載率更高,載體價(jià)格更低。當(dāng)前第1頁12
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