技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種利用廉價(jià)原料生產(chǎn)四甲基吡嗪的方法,將α?乙酰乳酸合成酶基因、α?乙酰乳酸脫羧酶基因和NADH氧化酶基因的核苷酸序列進(jìn)行密碼子優(yōu)化;拼接獲得包含該三個(gè)基因的基因簇;將基因簇插入表達(dá)載體中,獲得多順反子重組質(zhì)粒;再導(dǎo)入宿主菌E.?coli,獲得生產(chǎn)乙偶姻的基因工程菌株;將活化的菌株接種至含廉價(jià)原料的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),獲得含有乙偶姻的發(fā)酵液;取發(fā)酵液進(jìn)行離心處理,取上清液,再加入磷酸氫二銨,發(fā)酵產(chǎn)生的乙偶姻與NH4+反應(yīng)合成四甲基吡嗪。本發(fā)明提供的菌株能有效利用來源廣泛、成本低廉的原料生產(chǎn)高濃度前體物質(zhì)乙偶姻,氧化型輔酶NAD+能夠有效再生,可提高乙偶姻產(chǎn)量和生產(chǎn)效率,從而有效降低四甲基吡嗪的生產(chǎn)成本,縮短生產(chǎn)周期。
技術(shù)研發(fā)人員:謝能中;黃日波;韋航;李曉明
受保護(hù)的技術(shù)使用者:南寧中諾生物工程有限責(zé)任公司;廣西科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日:2017.06.28
技術(shù)公布日:2017.09.19