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測(cè)序酶的高通量篩選體系和篩選方法與流程

文檔序號(hào):40646533發(fā)布日期:2025-01-10 18:52閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.核苷酸類(lèi)似物,其特征在于,具有如下式(i)所示結(jié)構(gòu):

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核苷酸類(lèi)似物,其特征在于,所述核苷酸類(lèi)似物具有如式(ii)所示結(jié)構(gòu):

3.測(cè)序酶篩選體系,其特征在于,包括連接有第一檢測(cè)基團(tuán)的如權(quán)利要求1或2所述的核苷酸類(lèi)似物、連接有第二檢測(cè)基團(tuán)的模板dna和dna聚合酶;

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測(cè)序酶篩選體系,其特征在于,

5.試劑盒,包括輔料和如下i)~ii)所示中的至少一種:

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于,所述輔料包括裂解液、清洗液、純化試劑或緩沖液中的一種或兩種以上的組合。

7.測(cè)序酶的篩選方法,其特征在于,包括:利用如權(quán)利要求1或2所述的核苷酸類(lèi)似物和/或如權(quán)利要求3或4所述的測(cè)序酶篩選體系和/或如權(quán)利要求5或6所述的試劑盒對(duì)測(cè)序酶進(jìn)行篩選。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的篩選方法,其特征在于,包括如下步驟:

9.如下i)~iv)所示中的至少一種在制備測(cè)序酶篩選產(chǎn)品、測(cè)序酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)測(cè)試、評(píng)估沒(méi)得催化活性和/或評(píng)估酶對(duì)堿基摻入模板鏈的速度、效率中的應(yīng)用:

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述測(cè)序酶包括dna聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、加尾酶或rna聚合酶中的至少一種。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及測(cè)序酶的高通量篩選體系和篩選方法。本發(fā)明將熒光對(duì)CY3和CY5分別連接在DNA模板鏈和dATP上,構(gòu)建了DNA聚合酶篩選體系,在借助于自動(dòng)化平臺(tái)和酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上,實(shí)現(xiàn)了DNA聚合酶對(duì)修飾單堿基摻入DNA鏈的速度、效率以及催化活性的評(píng)估。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本發(fā)明的篩選體系和配套的篩選方法可實(shí)現(xiàn)DNA聚合酶的高通量篩選,節(jié)約了篩選的時(shí)間,降低了篩選的成本,并且所述篩選體系和篩選方法可以應(yīng)用到其他相關(guān)項(xiàng)目中,具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員:徐訊,翟莉莉,謝慶慶,鄭越,董宇亮,章文蔚
受保護(hù)的技術(shù)使用者:深圳華大生命科學(xué)研究院
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/9
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