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一種創(chuàng)制籽粒低鎘積累的抗鎘水稻的方法及應(yīng)用

文檔序號(hào):40589119發(fā)布日期:2025-01-07 20:29閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種組合物,其特征在于,所述組合物包含特異性靶向oshma3基因的sgrna表達(dá)盒、特異性靶向oslct1基因的sgrna表達(dá)盒和表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物,其特征在于,所述特異性靶向oshma3基因的sgrna表達(dá)盒的核苷酸序列如seq?id?no:1~2所示,所述特異性靶向oslct1基因的sgrna表達(dá)盒的核苷酸序列如seq?id?no:3~4所示,所述表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no:5所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物,其特征在于,所述表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因上游還含有綠色組織特異表達(dá)啟動(dòng)子。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物,其特征在于,所述綠色組織特異表達(dá)啟動(dòng)子為gssp3。

5.權(quán)利要求1~4所述的組合物在抗水稻鎘污染中的應(yīng)用。

6.一種創(chuàng)制抗鎘水稻的方法,其特征在于,將權(quán)利要求1~4所述的組合物克隆到載體中,構(gòu)建得到重組載體,將重組載體轉(zhuǎn)化野生型水稻,對(duì)獲得的轉(zhuǎn)化苗進(jìn)行鑒定即得。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述鑒定為以轉(zhuǎn)化苗的dna為模板,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增和測(cè)序,確認(rèn)轉(zhuǎn)化苗成功構(gòu)建。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述載體為雙元載體pylcrispr/cas9pubi-h。

9.權(quán)利要求7~8任一所述的方法獲得的抗鎘水稻在抗水稻鎘污染中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述抗水稻鎘污染為抗水稻籽粒鎘積累和/或修復(fù)鎘污染水稻田。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種創(chuàng)制籽粒低鎘積累的抗鎘水稻的方法及應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)CRISPR?Cas9構(gòu)建表達(dá)Cd結(jié)合自噬銜接蛋白AIM?SpMTL?GFP的水稻oshma3oslct1雙重突變體,不僅減少Cd從木質(zhì)部向韌皮部的轉(zhuǎn)運(yùn)和在根部液泡的積累,同時(shí)Cd結(jié)合自噬銜接蛋白AIM?SpMTL?GFP還能將鎘積累在葉片的原生質(zhì)體液泡中,在不影響水稻籽粒產(chǎn)量與品質(zhì)的情況下,減少籽粒的Cd積累和將Cd富集至非食用部位秸稈中以方便工業(yè)化處理。本發(fā)明所提供的籽粒低鎘積累的抗鎘水稻能夠減少食物鏈中的鎘污染,從而降低鎘對(duì)人體的危害。

技術(shù)研發(fā)人員:黃曉,黃佳睿,郭怡帆,李發(fā)強(qiáng),羅娜
受保護(hù)的技術(shù)使用者:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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