1.一種組合物,其特征在于,所述組合物包含特異性靶向oshma3基因的sgrna表達(dá)盒、特異性靶向oslct1基因的sgrna表達(dá)盒和表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物,其特征在于,所述特異性靶向oshma3基因的sgrna表達(dá)盒的核苷酸序列如seq?id?no:1~2所示,所述特異性靶向oslct1基因的sgrna表達(dá)盒的核苷酸序列如seq?id?no:3~4所示,所述表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no:5所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物,其特征在于,所述表達(dá)自噬相關(guān)的銜接蛋白的編碼基因上游還含有綠色組織特異表達(dá)啟動(dòng)子。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物,其特征在于,所述綠色組織特異表達(dá)啟動(dòng)子為gssp3。
5.權(quán)利要求1~4所述的組合物在抗水稻鎘污染中的應(yīng)用。
6.一種創(chuàng)制抗鎘水稻的方法,其特征在于,將權(quán)利要求1~4所述的組合物克隆到載體中,構(gòu)建得到重組載體,將重組載體轉(zhuǎn)化野生型水稻,對(duì)獲得的轉(zhuǎn)化苗進(jìn)行鑒定即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述鑒定為以轉(zhuǎn)化苗的dna為模板,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增和測(cè)序,確認(rèn)轉(zhuǎn)化苗成功構(gòu)建。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述載體為雙元載體pylcrispr/cas9pubi-h。
9.權(quán)利要求7~8任一所述的方法獲得的抗鎘水稻在抗水稻鎘污染中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述抗水稻鎘污染為抗水稻籽粒鎘積累和/或修復(fù)鎘污染水稻田。