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用于肺癌的miRNA的多重定量檢測的方法和試劑盒與流程

文檔序號:40637634發(fā)布日期:2025-01-10 18:43閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于同時量化hsa-mir-210-3p、hsa-mir-126-3p、hsa-mir-205-5p和hsa-mir-486-5p的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,所述多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合包括:

2.一種用于同時量化多種靶mirna的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,所述多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合包括:

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物中的每種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物的長度為約40-65nt。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物中的每種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物的所述錨定序列的長度為約3-12nt。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物包括具有第一莖環(huán)序列和第一錨定序列的第一莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物;以及

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述第一莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物的所述第一錨定序列與所述多種靶mirna中的第一靶mirna的獨(dú)特的3'序列互補(bǔ),并且所述第二莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物的所述第二錨定序列與所述多種靶mirna中的第二靶mirna的獨(dú)特的3'序列互補(bǔ)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)一步包括具有第三莖環(huán)序列和第三錨定序列的第三莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物,

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)一步包括具有第四莖環(huán)序列和第四錨定序列的第四莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物,

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合具有多特異性,使得所述第一莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有效地且僅逆轉(zhuǎn)錄所述第一靶mirna,所述第二莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有效地且僅逆轉(zhuǎn)錄所述第二靶mirna,所述第三莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有效地且僅逆轉(zhuǎn)錄所述第三靶mirna,并且所述第四莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有效地且僅逆轉(zhuǎn)錄所述第四靶mirna。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述第一靶mirna、所述第二靶mirna、所述第三靶mirna和所述第四靶mirna中的每種靶mirna選自由hsa-mir-210-3p、hsa-mir-126-3p、hsa-mir-205-5p和hsa-mir-486-5p組成的組,

11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合,其中所述第一莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物包括seq?id?no.33的核酸序列,所述第二莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物包括seq?id?no.34的核酸序列,所述第三莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物包括seq?id?no.35的核酸序列,并且所述第四莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物包括seq?id?no.36的核酸序列。

12.一種用于同時量化多種靶mirna的表達(dá)水平的試劑盒,所述試劑盒包括:

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒,其中

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的試劑盒,其中所述第一錨定序列與所述多種靶mirna中的第一靶mirna的3'序列互補(bǔ),并且所述第二錨定序列與所述多種靶mirna中的第二靶mirna的獨(dú)特的3'序列互補(bǔ)。

15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒,其進(jìn)一步包括:

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的試劑盒,其中

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的試劑盒,其進(jìn)一步包括:

18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的試劑盒,其中

19.一種用于同時量化多種靶mirna的表達(dá)水平的試劑盒,所述試劑盒包括:

20.一種同時量化hsa-mir-210-3p、hsa-mir-126-3p、hsa-mir-205-5p和hsa-mir-486-5p的方法,所述方法包括使用根據(jù)權(quán)利要求2所述的多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合執(zhí)行多重rt-qpcr。

21.一種用于使用hsa-mir-210-3p、hsa-mir-126-3p、hsa-mir-205-5p和hsa-mir-486-5p的定量結(jié)果來確定活受試者的醫(yī)學(xué)狀況的方法,所述方法包括:


技術(shù)總結(jié)
一種多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合包含兩種或更多種莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物并且表現(xiàn)出多特異性。所述多重逆轉(zhuǎn)錄引物組合能夠同時量化兩種或更多種靶miRNA,所述靶miRNA包含hsa?miR?210?3p、hsa?miR?126?3p、hsa?miR?205?5p和hsa?miR?486?5p。

技術(shù)研發(fā)人員:蘇暢,曹淵,曹夢景
受保護(hù)的技術(shù)使用者:麥銳克生物科技股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/9
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