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用于抗體生產(chǎn)的細胞培養(yǎng)方法與流程

文檔序號:40553397發(fā)布日期:2025-01-03 11:13閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種用于生產(chǎn)度普利尤單抗的方法,其包括:

2.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中所述細胞培養(yǎng)基包含一種或多種脂肪酸。

3.根據(jù)權利要求2所述的方法,其中所述一種或多種脂肪酸選自下組:亞油酸、亞麻酸、硫辛酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、花生四烯酸、月桂酸、山崳酸、癸酸、十二酸、己酸、二十四酸、肉豆蔻酸、辛酸和其組合。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的核苷:腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷、次黃嘌呤和其組合。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸和其組合。

6.根據(jù)權利要求1所述的方法,其進一步包含向細胞培養(yǎng)基中添加一種或多種使用點添加物的步驟。

7.一種生產(chǎn)度普利尤單抗的方法,其包括以下步驟:

8.根據(jù)權利要求7所述的方法,其中所述細胞培養(yǎng)基包含一種或多種選自由以下組成的組的脂肪酸:亞油酸、亞麻酸、硫辛酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、花生四烯酸、月桂酸、山崳酸、癸酸、十二酸、己酸、二十四酸、肉豆蔻酸、辛酸和其組合。

9.根據(jù)權利要求7所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的核苷:腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷、次黃嘌呤和其組合。

10.根據(jù)權利要求7所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含胰島素。

11.根據(jù)權利要求7所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸和其組合。

12.根據(jù)權利要求7所述的方法,其進一步包括向細胞培養(yǎng)基中添加一種或多種使用點添加物的步驟。

13.根據(jù)權利要求12所述的方法,其中所述使用點添加物包含以下中的一種或多種:nahco3、na2hpo4、?;撬?、谷氨酰胺、泊洛沙姆188(poloxamer?188)、胰島素、葡萄糖、cuso4、znso4、fecl3、niso4、na4?edta和檸檬酸三鈉edta。

14.根據(jù)權利要求7所述的方法,其中所述培養(yǎng)基不含水解產(chǎn)物。

15.一種生產(chǎn)度普利尤單抗的方法,其包括以下步驟:

16.根據(jù)權利要求15所述的方法,其中所述光學探針用于測量溶解氧。

17.根據(jù)權利要求16所述的方法,其進一步包含用一個或多個葉輪組合件來攪拌所述培養(yǎng)基的步驟,其中最上面的葉輪的位置低于所述生物反應器的初始工作體積的表面。

18.根據(jù)權利要求16所述的方法,其進一步包括通過使所述培養(yǎng)基鼓泡來調節(jié)溶解氧水平的步驟。

19.根據(jù)權利要求15所述的方法,其進一步包括通過使所述培養(yǎng)基鼓泡來調節(jié)pco2含量。

20.根據(jù)權利要求15所述的方法,其進一步包括向培養(yǎng)基中添加牛磺酸或次?;撬岬牟襟E。

21.根據(jù)權利要求20所述的方法,其進一步包括添加至少一種重組生長因子的步驟。

22.根據(jù)權利要求21所述的方法,其進一步包括添加以下中的一種或多種的步驟:腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷和次黃嘌呤。

23.根據(jù)權利要求22所述的方法,其進一步包括添加包含以下中的一種或多種的脂肪酸的步驟:亞油酸、亞麻酸、硫辛酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、花生四烯酸、月桂酸、山崳酸、癸酸、十二酸、己酸、二十四酸、肉豆蔻酸和辛酸。

24.根據(jù)權利要求23所述的方法,其進一步包括添加一種或多種選自下組的鹽的步驟:二價陽離子,諸如鈣離子、鎂離子和其組合。

25.根據(jù)權利要求24所述的方法,其進一步包括添加具有非極性側鏈的氨基酸的步驟。

26.根據(jù)權利要求25所述的方法,其進一步包括添加堿性氨基酸的步驟。

27.根據(jù)權利要求26所述的方法,其進一步包括添加核苷、二價陽離子的鹽、生育酚和維生素的步驟。

28.一種在經(jīng)改良生物反應器中生產(chǎn)度普利尤單抗的方法,其包括以下步驟:

29.根據(jù)權利要求28所述的方法,其進一步包括以下步驟:

30.根據(jù)權利要求29所述的方法,其進一步包括當最終vcd達到目標細胞密度時轉移所述細胞的步驟。

31.根據(jù)權利要求30所述的方法,其進一步包括將種子擴培的初始vcd調節(jié)為至少2.5×105個細胞/ml的步驟。

32.一種方法,其包括:

33.根據(jù)權利要求32所述的方法,其中所述細胞培養(yǎng)基包含一種或多種脂肪酸。

34.根據(jù)權利要求33所述的方法,其中所述一種或多種脂肪酸選自由以下組成的組:亞油酸、亞麻酸、硫辛酸、油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、花生四烯酸、月桂酸、山崳酸、癸酸、十二酸、己酸、二十四酸、肉豆蔻酸、辛酸和其組合。

35.根據(jù)權利要求32所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的核苷:腺苷、鳥苷、胞苷、尿苷、胸苷、次黃嘌呤和其組合。

36.根據(jù)權利要求32所述的方法,其中所述培養(yǎng)基包含選自由以下組成的組的氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸和其組合。

37.根據(jù)權利要求32所述的方法,其進一步包含向細胞培養(yǎng)基中添加一種或多種使用點添加物的步驟。

38.根據(jù)權利要求37所述的方法,其中所述使用點添加物包含以下中的一種或多種:nahco3、na2hpo4、?;撬帷⒐劝滨0?、泊洛沙姆188、胰島素、葡萄糖、cuso4、znso4、fecl3、niso4、na4?edta和檸檬酸三鈉edta。

39.根據(jù)權利要求32所述的方法,其中所述培養(yǎng)基不含水解產(chǎn)物。

40.一種用于治療患有2型炎性疾病的患者的方法,其包含向患者施用根據(jù)權利要求1至39中任一項所述的方法生產(chǎn)的度普利尤單抗。

41.根據(jù)權利要求40所述的方法,其中所述2型炎性疾病為特應性皮炎、中度到重度特應性皮炎、哮喘、中度到重度哮喘、過敏性鼻炎、伴有鼻息肉的慢性鼻竇炎、嗜酸性食管炎、慢性阻塞性肺病、慢性自發(fā)性蕁麻疹、結節(jié)性癢疹、過敏性真菌性鼻竇炎、不伴有鼻息肉的慢性鼻竇炎、過敏、草過敏、花生過敏、乳制品過敏、大皰性類天皰瘡、手足特應性皮炎、寒冷性蕁麻疹、慢性誘導性蕁麻疹、潰瘍性結腸炎、不明原因的慢性瘙癢、嗜酸性胃腸炎、過敏性支氣管肺曲霉病、支氣管擴張或斑禿。

42.一種用于治療與il-4r活性相關的疾病或病癥的方法,其包含向患者施用根據(jù)權利要求1至39中任一項所述的方法生產(chǎn)的度普利尤單抗。

43.根據(jù)權利要求42所述的方法,其中所述與il-4r活性相關的疾病或病癥為特應性皮炎、中度到重度特應性皮炎、哮喘、中度到重度哮喘、過敏性鼻炎、伴有鼻息肉的慢性鼻竇炎、嗜酸性食管炎、慢性阻塞性肺病、慢性自發(fā)性蕁麻疹、結節(jié)性癢疹、過敏性真菌性鼻竇炎、不伴有鼻息肉的慢性鼻竇炎、過敏、草過敏、花生過敏、乳制品過敏、大皰性類天皰瘡、手足特應性皮炎、寒冷性蕁麻疹、慢性誘導性蕁麻疹、潰瘍性結腸炎、不明原因的慢性瘙癢、嗜酸性胃腸炎、過敏性支氣管肺曲霉病、支氣管擴張或斑禿。


技術總結
本發(fā)明涉及用于制造高滴度抗體產(chǎn)物的方法。特別地,本發(fā)明部分涉及可用于產(chǎn)生所關注蛋白質的經(jīng)改進的無血清動物細胞培養(yǎng)基。另外,本發(fā)明進一步涉及用于成功分離本公開的抗體產(chǎn)物目標的色譜程序。

技術研發(fā)人員:J·馬提拉,X·唐,H·巴克,S·M·勞倫斯,A·S·約翰遜,M·卡塞,M·拉方德,A·塔斯蒂安,P·梅勒斯,J·霍里漢,J·克勞利,L·卡利南,S·A·奧舒迪,A·威特默,D·科貝特,J·賴利,A·瓦爾塔克,M·奇博羅斯基,A·斯大林,R·思達爾斯,H-Y·吳,L·尼科爾,A·康倫
受保護的技術使用者:瑞澤恩制藥公司
技術研發(fā)日:
技術公布日:2025/1/2
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