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一種用于檢測真菌的幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白及其應(yīng)用、一種真菌的親和分子檢測方法

文檔序號:40588450發(fā)布日期:2025-01-07 20:28閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于檢測真菌的幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白,其特征在于,所述幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白包括chbd2、chbd3、efcbp-1、pfcbp-a、pfcbp-b、bccbp-1或sccbp-1;

2.權(quán)利要求1所述的幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白在檢測真菌中的應(yīng)用。

3.一種真菌的親和分子檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的親和分子檢測方法,其特征在于,步驟(1)中,所述混合孵育的溫度為20~30℃;所述混合孵育的時間為0.5~2.0h;

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的親和分子檢測方法,其特征在于,步驟(2)中,所述檢測樣本為血液和/或肺泡灌洗液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的親和分子檢測方法,其特征在于,步驟(2)中,所述mb-cbp復(fù)合物和檢測樣本的混合的體積比為0.04~0.06:0.5~1.5;

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的親和分子檢測方法,其特征在于,步驟(3)中,所述提取混合物的基因組dna的方法為硅羥基磁珠法。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的親和分子檢測方法,其特征在于,步驟(4)中,所述對基因組dna進(jìn)行快速擴(kuò)增和一鍋法檢測的方法為rpa-crispr/cas12a;

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的親和分子檢測方法,其特征在于,所述crispr/cas12a體系包括如下組分:10×ne?buffer2.1,crrna,cas12a,寡核苷酸探針;

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的親和分子檢測方法,其特征在于,所述混合孵育的溫度為36~44℃。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及真菌檢測技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種用于檢測真菌的幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白及其應(yīng)用、一種真菌的親和分子檢測方法。本發(fā)明提供了一種用于檢測真菌的幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白,所述幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白包括ChBD2、ChBD3、EfCBP?1、PfCBP?A、PfCBP?B、BcCBP?1或ScCBP?1;該幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白可以應(yīng)用于檢測真菌中;本發(fā)明還提供了一種真菌的親和分子檢測方法,其是通過幾丁質(zhì)親和蛋白結(jié)合RPA?CRISPR/Cas12a,可以快速、精確地定量檢測白色假絲酵母菌。整個反應(yīng)可以在120min內(nèi)完成,對白色假絲酵母菌的檢測靈敏度達(dá)到10<supgt;1</supgt;CFU/ml。

技術(shù)研發(fā)人員:汪德強(qiáng),沈仕梅,王雯,魏杰,張紹城,馬園艷,伍曉莉,劉俊葉,周華,張陽麗,王石磊,蔡雪飛,黃愛龍
受保護(hù)的技術(shù)使用者:重慶醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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