欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法及應(yīng)用

文檔序號(hào):40576093發(fā)布日期:2025-01-07 20:15閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于,包括以下步驟:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞體外分層共培養(yǎng)模型構(gòu)建完成后,對(duì)其進(jìn)行鑒定,具體為:通過(guò)推動(dòng)針筒(2)產(chǎn)生的氣流將第二培養(yǎng)通道(17)中的殘余培養(yǎng)基液體排盡;向針筒(2)內(nèi)裝入滅菌pbs液體,打開(kāi)機(jī)械式流量控制器(1),以5?μl/min的速度向第二培養(yǎng)通道(17)中灌入滅菌pbs液體,完成對(duì)第二培養(yǎng)通道(17)的沖洗;沖洗完成后,向針筒(2)內(nèi)裝入?dil-ac-ldl染液,打開(kāi)機(jī)械式流量控制器(1),以5?μl/min的速度向第二培養(yǎng)通道(17)中灌入dil-ac-ldl染液,直至dil-ac-ldl染液充滿整個(gè)第二培養(yǎng)通道(17),然后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育2?h;孵育完成后,通過(guò)推動(dòng)針筒(2)產(chǎn)生的氣流將第二培養(yǎng)通道(17)中的殘余dil-ac-ldl染液排盡;向針筒(2)內(nèi)裝入滅菌pbs液體,打開(kāi)機(jī)械式流量控制器(1),以5?μl/min的速度向第二培養(yǎng)通道(17)中灌入滅菌pbs液體,完成對(duì)第二培養(yǎng)通道(17)的沖洗;通過(guò)激光共聚焦顯微鏡,在激發(fā)波495?nm和發(fā)射波565?nm的條件下進(jìn)行觀察,若紅色熒光標(biāo)記整齊規(guī)律排布,則模型構(gòu)建成功;若紅色熒光零星散布,則模型構(gòu)建失敗。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:機(jī)械式流量控制器(1)的輸出端與針筒(2)的活塞連接,控制針筒(2)內(nèi)液體流速;針筒(2)的容量為1?ml或5?ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:第一對(duì)流式雙通道微芯片(12)中,第一培養(yǎng)通道(13)的高度為30?μm、長(zhǎng)度為6000?μm、寬度為30?μm,第一培養(yǎng)通道(13)用于培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞;第二對(duì)流式雙通道微芯片(16)中,第二培養(yǎng)通道(17)的高度為60?μm、長(zhǎng)度為6000?μm、寬度為30?μm,第二培養(yǎng)通道(17)用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞;第三對(duì)流式雙通道微芯片(20)中,第三培養(yǎng)通道(21)的高度為60?μm、長(zhǎng)度為6000?μm、寬度為30?μm,第三培養(yǎng)通道(21)用于含20%胎牛血清的培養(yǎng)基或模型應(yīng)用所需的其它液體的灌入;第三對(duì)流式雙通道微芯片(20)中,擴(kuò)散池(7)采用長(zhǎng)度為4000?μm、寬度為30?μm、高度為60?μm的立方體池體。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:擴(kuò)散池(7)的材質(zhì)為?pdms;半透膜(24)的材質(zhì)為?pet,其孔徑為0.4?μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:原代動(dòng)脈小鼠平滑肌細(xì)胞及原代動(dòng)脈小鼠內(nèi)皮細(xì)胞均來(lái)自小鼠的二、三級(jí)動(dòng)脈。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法,其特征在于:配制平滑肌細(xì)胞--bd-matrixgel基質(zhì)膠溶液的方法為:取平滑肌細(xì)胞單細(xì)胞懸液,將其制成密度大于1×107個(gè)/ml的單細(xì)胞懸液,向其中加入20?μl/ml的bd-matrixgel基質(zhì)膠,輕輕搖晃混勻即可。

8.如權(quán)利要求1所述用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型應(yīng)用,其特征在于:用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建完成后,收集擴(kuò)散池(7)內(nèi)的液體,使用elisa試劑盒分別檢測(cè)il-6、tnf-α炎癥因子的水平。

9.如權(quán)利要求1所述用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型應(yīng)用,其特征在于,包括如下步驟:


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明為一種用于測(cè)試環(huán)境污染物對(duì)原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞?內(nèi)皮細(xì)胞毒性的模型構(gòu)建方法及應(yīng)用。本發(fā)明采用對(duì)流式雙通道微芯片,將原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與BD?Matrigel基質(zhì)膠溶液均勻混合后灌入細(xì)胞培養(yǎng)通道,再灌入原代動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞單細(xì)胞懸液,構(gòu)建原代動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞?內(nèi)皮細(xì)胞體外分層共培養(yǎng)模型,環(huán)境污染物干預(yù)此模型后,收集擴(kuò)散池內(nèi)液體并檢測(cè)其分泌物水平;激光共聚焦顯微鏡觀察平滑肌細(xì)胞?內(nèi)皮細(xì)胞所形成的縫隙連接通道的狀態(tài)、動(dòng)態(tài)變化和縫隙連接蛋白的表達(dá)情況。本發(fā)明模型的構(gòu)建為環(huán)境暴露有害物質(zhì)致動(dòng)脈血管重構(gòu)及功能性病變的發(fā)生發(fā)展和藥物防治提供新靶點(diǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員:秦小江,周育瑾,侯曉敏,陳亮京,施熠煒,聶繼盛,高明
受保護(hù)的技術(shù)使用者:山西醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
當(dāng)前第2頁(yè)1 2 
網(wǎng)友詢問(wèn)留言 已有0條留言
  • 還沒(méi)有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
新疆| 五寨县| 邻水| 巢湖市| 龙游县| 益阳市| 华池县| 高尔夫| 永年县| 高雄县| 体育| 渭源县| 平果县| 高密市| 珲春市| 嘉禾县| 衡水市| 高陵县| 平和县| 长春市| 和政县| 明星| 白银市| 乌拉特前旗| 中江县| 山西省| 高青县| 连江县| 郸城县| 屏南县| 岳普湖县| 长丰县| 临江市| 罗甸县| 色达县| 阳信县| 广东省| 阳江市| 林周县| 陆川县| 武川县|