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褐飛虱基因NlCYP303A1及其納米核酸農(nóng)藥

文檔序號(hào):40564493發(fā)布日期:2025-01-03 11:24閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種褐飛虱基因nlcyp303a1,其特征在于:所述基因nlcyp303a1的核苷酸序列如seqid?no:1所示。

2.一種用于獲得權(quán)利要求1所述褐飛虱基因nlcyp303a1的引物對(duì),其特征在于:所述引物對(duì)為nlcyp303a1-f2和nlcyp303a1r2,其核苷酸序列分別如seq?id?no:2和3所示。

3.一種重組載體l4440-nlcyp303a1,其特征在于:所述重組載體為含有權(quán)利要求1所述基因nlcyp303a1的表達(dá)載體,其中,所述表達(dá)載體為l4440。

4.一種含有權(quán)利要求3所述重組載體l4440-nlcyp303a1的宿主細(xì)胞,其特征在于:所述宿主細(xì)胞為ht115感受態(tài)細(xì)胞。

5.一種利用權(quán)利要求4所述宿主細(xì)胞誘導(dǎo)提取dsnlcyp303a1的方法,其特征在于:所述方法是將含有重組載體l4440-nlcyp303a1的宿主細(xì)胞培養(yǎng)至od600=0.40左右加入iptg,使其終濃度為1mm,進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),37℃振蕩培養(yǎng)4h,提取細(xì)菌總rna,純化后得到的dsrna,即為dsnlcyp303a1。

6.一種權(quán)利要求5所述制備方法制備得到的dsnlcyp303a1在防治褐飛虱中的應(yīng)用。

7.一種納米核酸農(nóng)藥,其特征在于:按重量份數(shù)計(jì),所述納米核酸農(nóng)藥的原料包括1份的六水合硝酸鋅、13~15份的2-甲基咪唑和0.06~0.1份的權(quán)利要求5所述制備方法制備得到的dsnlcyp303a1。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述納米核酸農(nóng)藥,其特征在于:按重量份數(shù)計(jì),所述納米核酸農(nóng)藥的原料包括1份的六水合硝酸鋅、13.86份的2-甲基咪唑和0.08份的dsnlcyp303a1。

9.一種納米核酸農(nóng)藥的制備方法,其特征在于:包括以下步驟:

10.一種權(quán)利要求7所述納米核酸農(nóng)藥在防治褐飛虱中的應(yīng)用。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種褐飛虱基因NlCYP303A1及其納米核酸農(nóng)藥。本發(fā)明的基因NlCYP303A1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示;納米核酸農(nóng)藥主要由六水合硝酸鋅、dsNlCYP303A1和2?甲基咪唑制備而成。本發(fā)明鑒定了與褐飛虱蛻皮過(guò)程密切相關(guān)的基因NlCYP303A1,沉默該基因可導(dǎo)致褐飛虱蛻皮失敗并降低其存活率;進(jìn)一步基于納米載體ZIF?8構(gòu)建了dsNlCYP303A1@ZIF?8納米核酸農(nóng)藥遞送的系統(tǒng),并測(cè)定了其生物活性;結(jié)果表明,該納米核酸農(nóng)藥遞送系統(tǒng)解決了dsRNA壽命短的缺點(diǎn),并顯著提高了其對(duì)褐飛虱的防治效果。本發(fā)明提高了RNAi在害蟲防治中的潛在應(yīng)用價(jià)值,并為害蟲抗藥性治理提供了一種新策略。

技術(shù)研發(fā)人員:萬(wàn)虎,何順,郭樂(lè),李建洪
受保護(hù)的技術(shù)使用者:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/2
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