1.一種d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體，其特征在于，所述突變體是將seq?id?no.2所示氨基酸序列第17位、118位、121位、165位、197位、249位進行單突變或多突變獲得的。
2.如權(quán)利要求1所述的d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體，其特征在于，所述d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體是將seq?id?no.2所示氨基酸序列突變?yōu)橄铝兄唬?1)第17位天冬酰胺突變?yōu)榫彼幔?2)第118位甘氨酸突變?yōu)橘嚢彼幔?3)第121位組氨酸突變?yōu)樘於彼幔?4)165位蘇氨酸突變?yōu)榘腚装彼幔?5)197位異亮氨酸突變?yōu)楸奖彼幔?6)249位苯丙氨酸突變?yōu)槔野彼幔?7)第121位組氨酸突變?yōu)樘於彼帷⒌?49位苯丙氨酸突變?yōu)槔野彼?，氨基酸序列如seq?id?no.4所示，核苷酸序列如seq?id?no.3所示。
3.一種含權(quán)利要求1所述d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體編碼基因的重組基因工程菌。
4.一種權(quán)利要求1所述d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體在微生物催化d-果糖異構(gòu)化制備d-阿洛酮糖中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用為：以含d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體基因的重組大腸桿菌經(jīng)發(fā)酵誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的濕菌體或濕菌體超聲破碎提取的純酶液為酶源，以d-果糖為底物，以鈷離子為助催劑，以ph6.5的緩沖液為反應(yīng)介質(zhì)構(gòu)成反應(yīng)體系，在50～80℃、1000r/min條件下反應(yīng)，反應(yīng)完全后，獲得d-果糖和d-阿洛酮糖混合物。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述反應(yīng)體系中，濕菌體用量為2.5～10g/l；鈷離子終濃度為0.1～10mm；底物初始加入濃度為50～700g/l。
7.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述濕菌體按如下方法制備獲得：將含d-阿洛酮糖-3-差向異構(gòu)酶突變體編碼基因的重組大腸桿菌接種至含終濃度50μg/ml卡那霉素的lb液體培養(yǎng)基中，37℃、200r/min培養(yǎng)至od600＝0.8～1.0，獲得種子液；將種子液以體積濃度1～5％的接種量轉(zhuǎn)入含終濃度50μg/ml卡那霉素的lb液體培養(yǎng)基中，于37℃、180r/min培養(yǎng)至od600＝0.6～0.8，添加終濃度0.1mm的iptg，于28℃、180r/min誘導(dǎo)培養(yǎng)12～14h，獲得誘導(dǎo)培養(yǎng)菌懸液，將誘導(dǎo)培養(yǎng)菌懸液離心，收集得到濕菌體。
8.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述純酶液按如下步驟制備：將濕菌體懸浮于ph?6.5、50mm磷酸鈉鹽緩沖液中，在120w下超聲破碎30min，超聲2s，暫停2s，離心，取上清，獲得粗酶液；粗酶液采用nickel-nta親和層析柱進行純化，先用平衡緩沖液平衡層析柱，粗酶液以1ml/min的速度上樣4個柱體積，再使用洗脫液以2ml/min的速度進行洗脫，采用紫外檢測器和電導(dǎo)率檢測器監(jiān)測，當(dāng)紫外檢測器的信號和電導(dǎo)率檢測器信號同時上升時收集相應(yīng)的洗脫液，當(dāng)電導(dǎo)率檢測器信號不變且紫外檢測器的信號下降時停止收集，收集的酶液即為純酶液；所述平衡緩沖液組成：50mm?pb緩沖液，300mm?nacl，20mm咪唑，ph?8.0；所述洗脫液組成：50mm?pb緩沖液，300mm?nacl，500mm咪唑，ph?8.0。