技術(shù)特征：

1.一種區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的引物探針組合物，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的引物探針組合物，其特征在于，還包括用于檢測(cè)內(nèi)參基因actb的引物探針：序列如seq?id?no.7所示的上游引物actb-f，序列如seq?id?no.8所示的下游引物actb?-r，序列如seq?id?no.9所示的熒光探針actb-p。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的引物探針組合物，其特征在于，所述熒光報(bào)告基團(tuán)選自fam、hex、cy5、rox、vic；熒光淬滅基團(tuán)選自bhq1、bhq2、bhq3。

4.一種區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括如權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的引物探針組合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括凍干pcr試劑，所述凍干pcr試劑是由pcr混合液通過(guò)凍干制備而成，所述pcr混合液包括：如權(quán)利要求1所述的引物探針組合物、dna聚合酶、dntp、緩沖液和凍干保護(hù)劑；

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述pcr混合液還包括：pcr變性促進(jìn)劑，所述pcr變性促進(jìn)劑為以下一種或多種成分的組合：1%-15%w/v%甜菜堿、1%-15%?v/v%dmso和1%-15%v/v%甲酰胺；

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，還包括：陽(yáng)性質(zhì)控和陰性質(zhì)控，所述陽(yáng)性質(zhì)控為吉氏巴貝斯蟲(chóng)質(zhì)粒和犬巴貝斯蟲(chóng)質(zhì)粒和犬a(chǎn)ctb內(nèi)參質(zhì)粒的混合物，三者的比例為1:1:1；所述陰性對(duì)照為無(wú)菌去離子水。

8.一種如權(quán)利要求5所述的凍干pcr試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：將所有成分混勻后通過(guò)多段式凍干程序進(jìn)行凍干，所述多段式凍干程序?yàn)椋?/p>

9.一種非疾病診斷目的的區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的檢測(cè)方法，其特征在于，使用如權(quán)利要求4所述的檢測(cè)試劑盒，包括以下步驟：

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測(cè)方法，其特征在于，s3步驟的具體分析判斷方法為：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于犬巴貝斯蟲(chóng)病的病原體檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，其公開(kāi)了一種區(qū)分犬巴貝斯蟲(chóng)和吉氏巴貝斯蟲(chóng)的引物探針組合物、檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法。該引物探針組合物包括：序列如SEQ?ID?NO.1所示的上游引物吉巴?F，序列如SEQ?ID?NO.2所示的下游引物吉巴?R，序列如SEQ?ID?NO.3所示的熒光探針吉巴?P；序列如SEQ?ID?NO.4所示的上游引物犬巴?F，序列如SEQ?ID?NO.5所示的下游引物犬巴?R，序列如SEQ?ID?NO.6所示的熒光探針犬巴?P。上述檢測(cè)試劑盒包括上述的引物探針組合物，所述檢測(cè)方法包括樣本的處理、熒光定量擴(kuò)增和檢測(cè)結(jié)果的分析。上述檢測(cè)方法可實(shí)現(xiàn)樣品中吉氏巴貝斯蟲(chóng)和犬巴貝斯蟲(chóng)的同時(shí)準(zhǔn)確檢測(cè)以及兩者的有效區(qū)分，為感染巴貝斯蟲(chóng)的犬提供精準(zhǔn)的用藥方案。

技術(shù)研發(fā)人員：韓鑫濤,劉森,欒志先
受保護(hù)的技術(shù)使用者：青島基迪泰生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/28