技術(shù)特征：

1.一種廣譜結(jié)合多分支h5nx亞型禽流感病毒ha蛋白的單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，其重鏈可變區(qū)包含vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3，輕鏈可變區(qū)包含vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜結(jié)合多分支h5nx亞型禽流感病毒ha蛋白的單克隆抗體，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.?2所示，所述輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.?4所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜結(jié)合多分支h5nx亞型禽流感病毒ha蛋白的單克隆抗體，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如seq?id?no.?1所示、所述輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如seq?id?no.?3所示。

4.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有根據(jù)權(quán)利要求3所述的重鏈可變區(qū)核苷酸序列及輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列。

5.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權(quán)利要求4所述的表達載體。

6.權(quán)利要求1-3之一所述的單克隆抗體在流感病毒抗原性變異分析中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1-3之一所述的單克隆抗體在制備h5亞型禽流感病毒檢測試劑中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一株廣譜結(jié)合多分支H5Nx亞型禽流感病毒HA蛋白的單克隆抗體及應(yīng)用。所述單克隆抗體命名為1G10，屬IgG1亞類，包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，其重鏈可變區(qū)包含氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO.5?7所示的V<subgt;H</subgt;CDR1、V<subgt;H</subgt;CDR2和V<subgt;H</subgt;CDR3，輕鏈可變區(qū)包含氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO.8?10所示的V<subgt;L</subgt;CDR1、V<subgt;L</subgt;CDR2和V<subgt;L</subgt;CDR3。所述單克隆抗體在間接免疫熒光試驗、蛋白免疫印跡試驗及中和試驗中均能特異性識別HA蛋白。另外，所述單克隆抗體能夠與2.3.2.1d、2.3.4.4b、2.3.4.4d等不同HA基因進化分支的H5N1、H5N6、H5N8等H5Nx亞型禽流感病毒發(fā)生特異性血凝抑制反應(yīng)，表明該1G10單克隆抗體識別的抗原表位是H5亞型禽流感病毒的一個廣譜性中和表位。通過雞胚免疫逃逸試驗和序列比對，篩選出1G10單克隆抗體識別的中和抗原表位包含HA蛋白第170和231位氨基酸位點，其突變顯著影響抗原性。

技術(shù)研發(fā)人員：顧敏,劉秀梵,柳蘇函,葛志闖,趙婉宸,高如一,王曉泉
受保護的技術(shù)使用者：揚州大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6