1.一種用于檢測昆蟲細胞中多種rna病毒的多重熒光定量pcr檢測組合物,其特征在于:所述檢測組合物包括檢測如下rna病毒的引物和探針:
2.一種用于檢測昆蟲細胞中多種rna病毒的多重熒光定量pcr檢測試劑盒,其特征在于:所述檢測試劑盒包含權(quán)利要求1所述檢測組合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測試劑盒,其特征在于:所述檢測試劑盒包含陽性對照品、陰性對照品以及熒光定量pcr反應試劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述檢測試劑盒,其特征在于:所述熒光定量pcr反應試劑為熒光定量pcr反應預混液,包括2×one?step?rt-pcrbufferⅲ、ex?taq?hs、rt?enzyme?mixⅱ、roxreference?dye內(nèi)參染料、無核酶水、以及權(quán)利要求1所述檢測組合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述檢測試劑盒,其特征在于:所述陽性對照品包含陽性rna標準品,濃度均為2×108copies/μl。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述檢測試劑盒,其特征在于:所述檢測試劑盒中的熒光定量pcr反應體系為20μl,包含15μl的所述熒光定量pcr反應預混液和5μl的模板;所述模板為待測樣品的rna、陽性對照標準品和陰性對照標準品。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述檢測試劑盒,其特征在于:所述反應體系的反應條件為:42℃反轉(zhuǎn)5min;95℃預變性3min;95℃變性5s,60℃退火34s,40個循環(huán)。
8.一種用于檢測昆蟲細胞中多種rna病毒的多重熒光定量pcr檢測方法,其特征在于:所述檢測方法非診斷或治療目的,包括如下步驟:
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述檢測方法,其特征在于:所述熒光定量pcr反應體系為20μl,包含15μl的熒光定量pcr反應預混液和5μl的模板;所述模板為待測樣品的rna、陽性對照標準品和陰性對照標準品;所述熒光定量pcr反應預混液包括2×one?step?rt-pcr?bufferⅲ、extaq?hs、rt?enzyme?mixⅱ、rox?reference?dye內(nèi)參染料、無核酶水、以及權(quán)利要求1所述檢測組合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述檢測方法,其特征在于:所述熒光定量pcr反應體系的反應條件為:42℃反轉(zhuǎn)5min;95℃預變性3min;95℃變性5s,60℃退火34s,40個循環(huán)。