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一種用于鑒定小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)的分子標(biāo)記及應(yīng)用

文檔序號:40649674發(fā)布日期:2025-01-10 18:56閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于檢測小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as的酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列dcaps分子標(biāo)記,其特征在于,其核苷酸序列如seq?id?no.1或seq?id?no.2所示,用于開發(fā)它的snp位點(diǎn)為小麥4a染色體上的第349299114位,多態(tài)性為g/a。

2.一種用于檢測權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記的特異性引物對,其特征在于,其引物序列如seq?id?no.3~seq?id?no.4所示。

3.一種用于檢測小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as的合成引物試劑盒,其特征在于,其中含有權(quán)利要求2中所述特異性引物對。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的合成引物試劑盒,其特征在于,其中還含有限制性內(nèi)切酶bsemii。

5.一種用于篩選和/或鑒定含有或不含小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as株系的方法,其特征在于,所述方法基于權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記,具體包括以下步驟:

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增反應(yīng)體系為:濃度100ng/μl的基因組模板1μl,od=0.1的上游引物1μl、od=0.1的下游引物1μl,2×rapidtaq?mastermix?7.5μl以及ddh2o?4.5μl。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增條件為:94℃預(yù)變性5min,循環(huán)參數(shù)為94℃變性30s,63.8℃退火30s,72℃延伸15s,進(jìn)行35個循環(huán),72℃充分延伸10min。

8.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在小麥育種中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在檢測、篩選和/或鑒定含有或不含小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在小麥抗莖基腐病分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種用于鑒定小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)的分子標(biāo)記及應(yīng)用,屬于小麥抗病育種和分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明借助于已具備15K?SNP芯片數(shù)據(jù)的國內(nèi)外360份小麥材料,結(jié)合中國春參考序列,開發(fā)了與小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)Qfcr.hebau?4AS緊密連鎖的分子標(biāo)記4AS?AX?111108057。利用該分子標(biāo)記可以準(zhǔn)確快速檢測不同小麥,實(shí)現(xiàn)抗莖基腐病種質(zhì)材料的早期分子輔助選擇,提高小麥抗病育種效率。本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)中小麥抗莖基腐病基因檢測難度大的問題,適用于分子遺傳育種領(lǐng)域。

技術(shù)研發(fā)人員:王逍冬,任壯,劉紫涵,任小鵬,李夢雨,趙淑清,孫蔓莉
受保護(hù)的技術(shù)使用者:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/9
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