1.一種用于檢測小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as的酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列dcaps分子標(biāo)記,其特征在于,其核苷酸序列如seq?id?no.1或seq?id?no.2所示,用于開發(fā)它的snp位點(diǎn)為小麥4a染色體上的第349299114位,多態(tài)性為g/a。
2.一種用于檢測權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記的特異性引物對,其特征在于,其引物序列如seq?id?no.3~seq?id?no.4所示。
3.一種用于檢測小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as的合成引物試劑盒,其特征在于,其中含有權(quán)利要求2中所述特異性引物對。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的合成引物試劑盒,其特征在于,其中還含有限制性內(nèi)切酶bsemii。
5.一種用于篩選和/或鑒定含有或不含小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as株系的方法,其特征在于,所述方法基于權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記,具體包括以下步驟:
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增反應(yīng)體系為:濃度100ng/μl的基因組模板1μl,od=0.1的上游引物1μl、od=0.1的下游引物1μl,2×rapidtaq?mastermix?7.5μl以及ddh2o?4.5μl。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增條件為:94℃預(yù)變性5min,循環(huán)參數(shù)為94℃變性30s,63.8℃退火30s,72℃延伸15s,進(jìn)行35個循環(huán),72℃充分延伸10min。
8.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在小麥育種中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在檢測、篩選和/或鑒定含有或不含小麥抗莖基腐病遺傳位點(diǎn)qfcr.hebau-4as中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1中所述dcaps分子標(biāo)記、權(quán)利要求1中所述snp位點(diǎn)、權(quán)利要求2中所述特異性引物對、權(quán)利要求3~4中任一所述合成引物試劑盒或權(quán)利要求5~7中任一所述方法在小麥抗莖基腐病分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。