技術(shù)特征：

1.一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述工藝包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述溶液制備步驟包括：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述菌種復(fù)蘇步驟中，以重組大腸桿菌為菌種，冷凍菌株復(fù)蘇后，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)間為3-6小時(shí)，培養(yǎng)溫度為20-30℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述第一次誘導(dǎo)步驟包括：當(dāng)發(fā)酵液光密度值達(dá)到10-20時(shí)，加入1.5-2.5l的180-220g/l乳糖溶液和誘導(dǎo)劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述補(bǔ)料步驟包括以下階段：

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述第二次誘導(dǎo)步驟中，在完成第一次誘導(dǎo)20-30小時(shí)后，再次加入1.52.5l的180-220g/l乳糖溶液和與第一次誘導(dǎo)相同劑量的誘導(dǎo)劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述誘導(dǎo)劑為異丙基-β-d-硫代半乳糖苷，使用濃度為0.1～1.0mmo?l/l。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述發(fā)酵罐體積為80-120l，發(fā)酵溫度為28-32℃，發(fā)酵液ph值控制在6.0-7.5范圍內(nèi)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵生產(chǎn)3’-唾液酸乳糖的工藝，其特征在于，所述發(fā)酵液的光密度值達(dá)到10-20時(shí)進(jìn)行第一次誘導(dǎo)，完成第一次誘導(dǎo)后20-30小時(shí)進(jìn)行第二次誘導(dǎo)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物工程領(lǐng)域，公開(kāi)了一種發(fā)酵生產(chǎn)3’?唾液酸乳糖的工藝，包括以下步驟：溶液制備、菌種復(fù)蘇、發(fā)酵初期培養(yǎng)、第一次誘導(dǎo)、多階段補(bǔ)料、第二次誘導(dǎo)及發(fā)酵后期控制。通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)基配方(以蔗糖和磷酸鹽為主，避免高成本混合碳源)、分階段誘導(dǎo)條件(以發(fā)酵液光密度OD值為觸發(fā)信號(hào))和精確的補(bǔ)料速度控制，本發(fā)明顯著提升了3’?SL的最終產(chǎn)量，達(dá)到每升發(fā)酵液42?45g的水平，并有效降低了乳糖和唾液酸等副產(chǎn)物的含量至1％?2％以?xún)?nèi)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化菌株代謝流向，簡(jiǎn)化發(fā)酵工藝流程，顯著降低生產(chǎn)成本，同時(shí)縮短了發(fā)酵周期，解決了現(xiàn)有技術(shù)中發(fā)酵效率低、副產(chǎn)物多和工藝復(fù)雜性高的問(wèn)題。

技術(shù)研發(fā)人員：劉振云,程豐偉,王藝蓉,方蘇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：黃山同兮生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9