技術(shù)特征：

1.一種制備外泌體的方法，以動(dòng)物乳為原料進(jìn)行外泌體的制備，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備外泌體的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述醋酸-醋酸鈉溶液中醋酸和醋酸鈉的摩爾比為1：（1.6-1.62），醋酸根離子的濃度為0.065mol/l；

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備外泌體的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述微濾時(shí)，微濾膜的孔徑為0.6~1.0μm，溫度為4-7℃，壓力為2-6bar。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備外泌體的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述超濾時(shí)，超濾膜的孔徑為200-400kda，溫度為4-7℃，壓力為0.05～0.2mpa；

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備外泌體的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述微濾時(shí)，微濾膜的孔徑為0.8μm，溫度為6℃，壓力為4?bar；

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備外泌體的方法，其特征在于，

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備外泌體的方法，其特征在于，步驟（4）中，循環(huán)式自由流等電聚焦電泳的壓力為400v，溫度為4℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備外泌體的方法，其特征在于，

9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的制備外泌體的方法在提升以乳源進(jìn)行外泌體分離時(shí)，外泌體的純度中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的制備外泌體的方法在提升以乳源進(jìn)行外泌體分離時(shí)，外泌體的回收率中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及外泌體制備技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種制備外泌體的方法與應(yīng)用。本發(fā)明制備外泌體的方法包括：（1）將脫脂后的動(dòng)物乳以醋酸?醋酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至4.5?4.6，分離獲得乳清液；（2）將乳清液進(jìn)行微濾獲得透過液；（3）將透過液以NaCl水溶液進(jìn)行洗濾，使外泌體截留液中蛋白質(zhì)含量低于2μg/mL，滲透壓為280?310mOsm/L；（4）與醋酸?醋酸鈉溶液進(jìn)行混合獲得電泳液進(jìn)行循環(huán)式自由流等電聚焦電泳。本發(fā)明的方法可更好地保證外泌體的結(jié)構(gòu)完整性，整體收率高，且外泌體純度高。

技術(shù)研發(fā)人員：母智深,白茹,高增麗,于聲波,劉宇,陳云,烏云,曹文慧,王彩霞,云潔
受保護(hù)的技術(shù)使用者：內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6