從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物提取根皮苷的技術(shù)工藝及方法，特別是從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]湖北海棠:又名野海棠、茶海棠、野花紅、花紅茶及糖櫚葉，屬薔薇科蘋果屬落葉喬木。其綠葉半發(fā)酵曬干可作茶葉代用，故又稱林檎茶、花紅茶和一匹罐，在湖北、湖南、江西等地區(qū)民間代茶飲用已有400多年歷史，是盛夏不可多得的解暑涼茶。其根可治筋骨扭傷，果可入藥消食，治胃病并可釀酒。湖北海棠嫩枝綠葉中，含有茶多酚、黃酮、蛋白質(zhì)及Fe、Cu、En、Cr和Mn等多種礦物元素。據(jù)現(xiàn)代研宄證明，湖北海棠具有降血糖、降血脂、抗菌消炎、耐缺氧及抗疲勞等多種藥理作用。其中，含有主要化學成分根皮苷。
[0003]根皮苷:屬于植物多酚類化合物。國外對于根皮苷相關(guān)生理功能的研宄較多。根皮苷能激活蜂窩蛋白激酶，對細胞無序增長具有抑制性，對于皮膚癌及其他腫瘤有輔助治療作用；根皮苷具有顯著的降壓、降脂、降糖作用，被人譽為“天然的降壓及降糖藥”;根皮苷外用能抑制黑色素細胞活性，對各種皮膚色斑有淡化作用等。由于根皮苷具有獨特的生理活性和保健功效，歐美國家早將根皮苷用于醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)及化妝品工業(yè)等領(lǐng)域，已成為一種暢銷的保健品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對以上問題，提供一種從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法，其工藝設(shè)計合理，生產(chǎn)操作簡便，充分利用無有害殘留污染的野生資源，適于中小企業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:一種從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法，包括以下步驟:
[0006]I)在公歷5月至8月采摘當年新生的湖北海棠新鮮綠葉及嫩枝，然后將原料洗凈，加入容器中進行提取，加稀鹽酸溶液煮沸回流2-4小時，保持容器內(nèi)的溫度為70-100°C，再在60-80°C保溫2-4小時，過濾收集濾液備用；
[0007]2)將步驟I)所得的濾液加入濃縮器中進行濃縮，控制蒸汽壓力在0.2MPa以下，溫度為60-80°C，當濃縮液的糖度達到40-60度時，得到濃縮浸膏，冷卻至室溫，然后于0-4°C析晶24h以上，再進行多次離心處理，脫水后得到根皮苷濕品，最后進行烘干，至物料水分含量低于3%時，冷卻后粉碎，得到純度在80.0-85.0 %的低純度根皮苷成品；
[0008]3)將根皮苷濕品用乙醇和水進行溶解，然后于0-4°C靜置析晶，再經(jīng)脫水、干燥和粉碎后，得到純度在85.1-95.0%的中純度根皮苷成品；
[0009]4)步驟I)中的濾液入層析柱，經(jīng)大孔樹脂吸附處理后，先加水串洗1.5_2h，水溫(50°C，水流速度為150L — 200L/h，然后用乙醇溶液洗脫，收集乙醇含量大于10%的洗脫液；再對洗脫液進行濃縮、析晶、離心脫水、干燥、粉碎，得到純度在95.1-99.0%的中高純度根皮苷成品；
[0010]5)步驟4)中離心脫水后的物料加稀硫酸溶液進行溶解，再經(jīng)濃縮、析晶、離心脫水、干燥、粉碎，得到純度在99.1%及以上的高純度根皮苷成品；
[0011]通過上述步驟的合理選擇，可以根據(jù)需要提取不同純度根皮苷產(chǎn)品。
[0012]優(yōu)選的方案中，步驟I)中采摘的綠葉及嫩枝，在當天進行高溫干燥至原料含水量在5%以內(nèi)，干燥溫度為100-250°C，切忌焦糊，冷卻后防潮儲存，以備提取。根皮苷提取時，原料的采摘及加工會直接影響提取的效果，在5月至8月采摘當年新生的湖北海棠新鮮綠葉及嫩枝，其中的根皮苷含量高，易于提取。
[0013]采摘的綠葉葉片不能發(fā)酵變紅，且無腐爛及污染。
[0014]步驟I)中提取時，每80-150g原料加入Ikg質(zhì)量濃度為0.4-0.5%稀鹽酸溶液進行煮沸提取，共提取兩次，并合并兩次提取得到的濾液備用，采用酸性溶液可以提高原料中根皮苷的提取率。
[0015]步驟2)中濃縮浸膏制備過程中，控制濃縮器中的真空壓力在0.05-0.08MPa，以保持蒸濃縮是產(chǎn)生的蒸汽壓的穩(wěn)定，并防止因為真空過大而將濃縮液吸走，實際操作性強。
[0016]步驟2)中離心處理時，共處理3-5次，第I次時將物料直接加入到設(shè)備中進行脫水，脫水時間以沒有流出液為準；后續(xù)脫水時，先加水稀釋再開機脫水。
[0017]步驟3)中根皮苷濕品用乙醇和水進行溶解時，采用乙醇溶液的質(zhì)量濃度為85.1-95..0%，且乙醇溶液:根皮苷濕品:水的比例為100ml:100-200g:800_1000ml，所述的水為純化水。
[0018]步驟4)中洗脫時，采用的乙醇溶液的質(zhì)量濃度為40-50%。
[0019]根據(jù)湖北海棠嫩枝綠葉的酸堿性，選擇合適的樹脂吸附材料，步驟4)中選用的大孔樹脂為非極性AB — 8或非極性D101，大孔樹脂吸附的料液過柱流速為120L — 200L/h，上柱溫度不高于55°C，若高于該溫度，會影響樹脂的吸附能力。
[0020]步驟2)-5)中烘干或者干燥時，控制干燥溫度< 80°C，防止產(chǎn)品焦化；并且粉碎后采用300目的篩網(wǎng)進行篩分，取篩下物。
[0021]步驟5)中所述的稀硫酸溶液的質(zhì)量濃度為0.3-0.4%，采用稀硫酸可以增強除去物料中礦物質(zhì)及金屬元素的能力。
[0022]以上操作中，所用的水均為軟化水。
[0023]本發(fā)明的創(chuàng)新優(yōu)點在于:
[0024]第一、過去對于湖北海棠資源的利用，只是民間傳統(tǒng)采摘其綠葉，經(jīng)半發(fā)酵、曬干后代茶飲用，而對其內(nèi)含的提取物沒有充分利用。本發(fā)明可使過去利用很少或廢棄的天然資源得到深度的開發(fā)利用。并且國家林業(yè)產(chǎn)業(yè)開發(fā)政策提倡以本木植物的枝、葉、花、果為原料。本申請采用湖北海棠的嫩枝綠葉為原料，符合國家提倡的林業(yè)產(chǎn)業(yè)開發(fā)政策要求，有利于生態(tài)的可持續(xù)發(fā)展。
[0025]第二、國內(nèi)根皮苷生產(chǎn)廠家，多以蘋果樹葉、果實及果皮為原料，存在原料內(nèi)含根皮苷成分低(只有2% — 3%)和農(nóng)藥殘留量較高等弊端。而湖北海棠枝葉中根皮苷的含量高達15%以上，且無農(nóng)藥蟲害污染，可為生產(chǎn)廠家降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)品質(zhì)量。
[0026]第三、本發(fā)明在制備中高純度的根皮苷成品時，層析過程中選用非極性大孔樹脂，吸附效果好，能夠適應于不同情景下的根皮苷純化。
[0027]第四、本發(fā)明在制備高純度的根皮苷成品時，先采用稀硫酸溶液對物料進行返溶，能夠除去，可以進一步除去其中的無機物雜質(zhì)，提高純化效果。
[0028]最后，本發(fā)明公開以湖北海棠嫩枝綠葉為原料，以“原料采摘及加工”、“原料提取液的制備”到層析、濃縮、析晶、脫水、返溶及干燥等工藝步驟，提出了具體的技術(shù)工藝及方法，同時在提取時加入稀鹽酸溶液，在返溶時采用稀硫酸溶液，能夠增強除去其中的無機物雜質(zhì)，提高原料中根皮苷成分的提取率，提高對于生產(chǎn)廠家投入實際生產(chǎn)具有很強的操作性。
【具體實施方式】
[0029]下面結(jié)合實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于實施例表述的范圍。
[0030]實施例1:
[0031]1、原料采收及加工:
[0032]I)、鮮品原料采摘:選擇海拔1200米以上地區(qū)，于當年陽歷5月中下旬，采摘當年新生無蟲害污染的湖北海棠新鮮綠葉及5公分以下長度的嫩枝；
[0033]2)、干品原料加工:將采摘的新鮮嫩枝綠葉，于當天進行瞬時高溫干燥，干燥溫度為100-150°C，控制干品原料含水量在5%以內(nèi)，切忌焦糊，干燥后冷卻，并防潮儲存。
[0034]2、原料提取液制備:
[0035]I)、第一次提取液的制備將步驟I一 I)得到的嫩枝綠葉新鮮原料，或步驟I一2)得到的干品原料，經(jīng)純凈軟化水清洗2遍，瀝干水分，然后投入不銹鋼提取罐內(nèi)，每80g原料加入Ikg質(zhì)量濃度為0.4-0.5%稀鹽酸溶液，煮沸3小時，容器內(nèi)的溫度在70°C以上，再在60°C保溫4小時，過濾收集濾液備用；
[0036]2)、第二次提取液的制備注入純凈軟化水，高溫沸煮，收集提取過濾液，再次加入稀鹽酸溶液進行煮沸提取，方法同上，得到的濾液與第一次提取過濾液混合，待用。
[0037]3、低純度根皮苷的提取:
[0038]I)、制備浸膏將步驟2— I)及2—2)制備得到的混合提取液，泵入不銹鋼濃縮器中進行濃縮，濃縮時控制蒸汽壓