用于生物負(fù)載樣品收集和檢測的可棄容器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種可棄容器，其在用于多種微生物檢測方法的包含被分析物微生物的流體樣品的收集和檢測中是有用的。此外，本發(fā)明涉及微生物測量方法，其在將容器用作用于流體樣品的接受器的情況下執(zhí)行。
【背景技術(shù)】
[0002]在衛(wèi)生保健、食品、化妝品和其他產(chǎn)業(yè)中，生物負(fù)載測試(b1burden testing)已在評估各種樣品的微生物含量方面起到日益重要的作用。生物負(fù)載測試被公知為許多名字，包括:微生物計(jì)數(shù)、活菌計(jì)數(shù)、總計(jì)數(shù)、平板計(jì)數(shù)、菌落計(jì)數(shù)、異養(yǎng)計(jì)數(shù)、和嗜溫計(jì)數(shù)?；旧希镓?fù)載是與多種產(chǎn)品和成分相關(guān)的微生物群落的估算。明顯地，該群落與使用的原材料的清潔度、生產(chǎn)環(huán)境、和各種制造階段期間產(chǎn)物的處理有關(guān)。
[0003]確定微生物計(jì)數(shù)的一種方法是膜過濾器(MF:membrane filter)程序，其中，微生物計(jì)數(shù)是使用膜過濾器確定的。在這些MF相關(guān)方法中，包含被分析物的流體樣品通過MF而被過濾，來將期望的被分析物微生物俘獲在其上。在一些情況下，將俘獲的微生物和MF放置為與營養(yǎng)培養(yǎng)基接觸來培養(yǎng)微生物。包含微生物的微生物菌落數(shù)量可使用顯微鏡或照相機(jī)來計(jì)數(shù)。
[0004]在一些方法中，MF上的俘獲微生物的計(jì)數(shù)可直接進(jìn)行而不需要例如通過采用營養(yǎng)培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物。在這些情況下，微生物的顯微鏡或照相機(jī)檢測可通過檢測器(例如顯微鏡或照相機(jī))與MF的操作聯(lián)合而直接進(jìn)行。在許多這些直接測量技術(shù)中，微生物與著色劑或發(fā)光劑接觸，著色劑或發(fā)光劑與微生物反應(yīng)來促進(jìn)微生物檢測。
[0005]因此，本發(fā)明專用于一種容器，其可用來收集流體樣品且促進(jìn)在樣品中的微生物在MF上的沉積，以用于通過檢測機(jī)構(gòu)(例如顯微鏡或照相機(jī)等)進(jìn)行的隨后的菌落檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]在一個示范實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于生物負(fù)載樣品選擇和檢測的可棄容器，其中，容器具有常見的透明塑料瓶主體；專用結(jié)構(gòu)帽，其在中心區(qū)域處具有排水孔，由過濾膜覆蓋且由保護(hù)膜(protective film)密封。容器還具有帶橡膠片的可移除底部帽。
[0007]系統(tǒng)公開了一種方法，其中，容器作用為用于選擇水樣品的具有帽的普通瓶。在一個實(shí)施例中，在樣品制備工序期間，容器可在與排水泵連接的臺或平臺組件上上端朝下地放置。容器由平臺上的夾緊機(jī)構(gòu)定位和固定，該夾緊機(jī)構(gòu)保持容器的專用帽。通過開啟泵，在容器中的水樣品將通過在專用帽上的過濾膜和排水孔排出以廢棄。樣品的細(xì)菌將留在過濾膜上，且關(guān)閉泵。針機(jī)構(gòu)向下穿過底部帽上的橡膠片，并且將著色劑或其他試劑注入容器中。該試劑通過標(biāo)準(zhǔn)著色工序排出。
[0008]在樣品制備工序之后，容器將移動至另一個臺，該臺具有用于保持專用帽的相同的夾緊機(jī)構(gòu)。另一機(jī)構(gòu)將移除瓶主體和底部帽，但帶有過濾膜的專用帽將留在平臺上，并且膜朝上。顯微鏡機(jī)構(gòu)將定位為接近膜以用于檢測工序。在工序完成后，可棄容器可從分析系統(tǒng)卸下。
[0009]在一個實(shí)施例中，提供樣品容器以用于微生物檢測工序。該容器具有頂部開口和相反的底部開口。頂部帽密封頂部開口，其中頂部帽包括密封蓋，該密封蓋包括凹入的蓋部分。凹入的蓋部分包括其中的多個流體流動孔口。膜過濾器(MF)層在凹入蓋的一側(cè)上置于流動孔口下方。底部帽組件密封容器的底部開口。
[0010]在其他示范實(shí)施例中，底部帽組件包括外部帽部件和置于外部帽下方的不透流體的彈性體層。彈性體層能夠由針注射器或其他尖銳物體穿透。
[0011 ] 在本發(fā)明的另一方面中，頂部帽包括覆蓋密封蓋的保護(hù)膜層。在其他實(shí)施例中，密封蓋包括圍繞凹入的蓋部分的環(huán)形凸起臺階區(qū)域。凹入的蓋部分可包括大體平面的表面。
[0012]在本發(fā)明的其他實(shí)施例中，容器包括圓柱形橫截面的主體部件和具有比主體部分小的直徑的頸部部分。此外，在某些實(shí)施例中漸縮區(qū)段提供為介于主體部分與頸部部分之間。在某些實(shí)施例中，漸縮區(qū)段具有與截頭圓錐相似的橫截面。頂部帽可分離地配合在頸部部分上方，且底部帽組件可分離地配合在底部開口上方。
[0013]本發(fā)明的其他方面涉及用于檢測流體樣品中的微生物存在的方法。在某些實(shí)施例中，收集瓶的至少一部分在其中填充有包含期望的被分析物微生物的流體樣品。第一帽部件提供在容器的開口中的一個上，其中該第一帽具有在其中包括流體流動孔口的第一表面和置于所述第一表面下方的膜過濾器(MF)層。第二帽部件提供在容器中的另一個開口上，其中，該第二帽部件包括不透流體但針可穿透的表面。流體樣品通過第一帽部件排出，從而使被分析物微生物沉積在第一帽的MF層上。試劑穿過不透流體的、針可穿透的第二帽表面注入流體樣品中。試劑適于與流體樣品中的被分析物微生物反應(yīng)，以形成MF層上的可檢測的存在。檢測器放置成與MF層操作地相關(guān)，以檢測MF層上的被分析物微生物的存在。
[0014]在本發(fā)明的某些實(shí)施例中，試劑包括著色劑，或在某些情況下，試劑包括發(fā)光劑，該發(fā)光劑適于在MF層上產(chǎn)生發(fā)光微生物。在某些情況下，檢測器可為顯微鏡或照相機(jī)等。此外，檢測器可為CCD (冷卻固態(tài)照相機(jī)裝置)，其具有可直接插入MF中的光學(xué)檢測元件。
[0015]在本發(fā)明的其他實(shí)施例中，收集瓶放置在瓶保持組件中。在試劑已注入流體樣品中之后，第一帽部件與收集瓶分離。在某些實(shí)施例中，第一帽部件配置在由平臺承載的抓握部件中。平臺和保持組件例如通過扭轉(zhuǎn)等相對于彼此移位，以從而將第一帽部件與收集瓶分離。在本發(fā)明的其他實(shí)施例中，流體管道連接至第一帽部件，且流體樣品通過第一帽部件排出并排入流體管道中。真空或泵器件可附接至管道，以通過管道提供排水、真空源，以有助于確保完成且促進(jìn)通過帽部件及其相關(guān)MF層的流體排出。
[0016]本發(fā)明將結(jié)合附圖進(jìn)一步描述，其中。
【附圖說明】
[0017]圖1是生物負(fù)載樣品選擇和檢測容器的側(cè)視圖，其中某些部分以假想示出；
圖2是圖1的容器的側(cè)視圖，其中，保護(hù)膜從頂部帽移除；
圖3是容器的分解側(cè)視圖，其中容器的某些部分被移除；
圖4是排水階段期間的容器、相關(guān)保持組件和平臺的局部剖開正交投影圖，其中，從容器排泄流體；并且
圖5是與圖4相似的局部剖面圖，但顯示生物負(fù)載測試工序中的另一階段，其中，承載膜過濾器(MF)的平臺與容器保持組件分離。
【具體實(shí)施方式】
[0018]轉(zhuǎn)向圖1-3，在此顯示用于生物負(fù)載樣品選擇和檢測的可棄容器2。該容器由透明的塑料材料組成，例如聚碳酸醋、聚對苯二甲酸乙二醇醋(polyethyIeneterephlate)、聚丙烯或其他塑料材料。如所示，容器包括圓柱形橫截面的主體區(qū)段8和漸縮或遞減直徑的區(qū)段10，區(qū)段10的大體形式為重疊在主體8上方的截頭圓錐形狀。如圖1所示，容器的最頂部區(qū)段由變窄的頸部部分9限定，在其上方，帽區(qū)段適于通過螺紋接合、搭扣配合或其他類似的附接器件進(jìn)行接合。具體參照圖1，保護(hù)膜14提供在容器的頂部上，并且例如收縮配合在容器的頂部上方，以用于易于移除。頂部帽12還包括環(huán)形密封蓋部分18。頂部帽組件配合在容器的頂部開口 5上方并且密封其。
[0019]在容器2的底部端部處，可移除帽20提供在瓶的底部或基部上。不透流體的橡膠隔膜26或相似的表面沿著瓶的內(nèi)側(cè)較低末端提供，并且其可經(jīng)由密封帽24固連至瓶的底部，密封帽24可螺紋或搭扣配合在瓶基部上。帽20密封容器的底部開口 7。
[0020]在圖2中，保護(hù)膜14已從頂部帽12移除，從而露出環(huán)形密封蓋17，環(huán)形密封蓋17又優(yōu)選地摩擦配合在頸部9的周緣內(nèi)。環(huán)形密封蓋17包括圍繞凹入的平面區(qū)段的凸起的環(huán)形臺階區(qū)域，該凹入的平面區(qū)段在其中具有多個孔口 16，以促進(jìn)通過密封蓋17的流體流。過濾膜18在蓋17的下面或底部側(cè)上，該過濾膜18可由聚酯、聚碳酸酯、聚丙烯、聚四氟乙烯、尼龍、聚(偏二氟乙烯)組成。如后面將詳細(xì)提及的，該膜作用為將微生物種類保留在其上。
[0021]圖3顯示了倒置布置的容器。這是如下定向:在一個實(shí)施例中，瓶將以該定向定位，以便促進(jìn)生物負(fù)載取樣和檢測。在此，可移除的外部帽20已移除，從而露出環(huán)形固連帽24和置于下方的流體不可穿透的橡膠層26。層26適于作用為對流動穿過其的流體的屏障，但是該層可由尖銳物體(例如皮下注射探針等)穿透。優(yōu)選地，層26由彈性體材料制成，例如，EPDM橡膠、苯乙烯丁二烯、丙烯腈/ 丁二烯、聚氯丁烯或天然橡膠。此外，在圖3中，保護(hù)膜14已從瓶的現(xiàn)已倒置的頂部移除，從而露出在環(huán)形搭扣蓋17的底部側(cè)上的過濾膜18，其中蓋的凹入孔口側(cè)16現(xiàn)在配置在過濾膜18下方。
[0022]為了執(zhí)行生物負(fù)載測試，瓶2填充有包含被分析物微生物種類的含水或其他流體樣品。瓶2可放置在例如在圖4中顯示的類型的瓶保持組件100中。在此，組件100包括兩個相對的壓板部件102、104，其中頂部壓板102經(jīng)由連接件106、108、110、112連結(jié)至壓板104，這些連接件均可通