過由螺旋彈簧114和116供應(yīng)的彈簧張力來調(diào)整。例如由橡膠隔膜或類似彈性材料組成的固持器部件120從壓板102向下下垂，并且具有與瓶2的形狀相適的大體形狀，以牢固地抓握并將其保持在組件100中。
[0023]如圖4所示，平臺(tái)140定位在壓板104下面，且環(huán)形密封蓋17接合在承載于平臺(tái)上的軛部件142、144之間，軛部件142、144 一起包圍蓋17?？墒褂枚ㄎ宦葆?shù)葋砀淖儚椈?46,148的張力，以提供通過軛部件實(shí)現(xiàn)的蓋17的牢固抓握。在該點(diǎn)，保護(hù)膜14已經(jīng)從旋塞12移除，使得膜18 (圖3)與瓶2的內(nèi)容物直接流體連通。管道150經(jīng)由漏斗類型的連接器或其他裝置(未顯示)連接至瓶的現(xiàn)在倒置的頂部區(qū)段。真空源154或泵通過提供閥部件152而與瓶2連通。皮下注射橡膠針等穿過瓶的可穿透橡膠層插入，以將著色、發(fā)光、清潔、或其他試劑或純水注射至瓶2內(nèi)的流體樣品。
[0024]通過開啟真空或泵，樣品中的流體通過過濾膜18和蓋17上的排水孔口 16排出以廢棄。由于過濾膜的孔隙大小，故樣品的微生物種類將被俘獲在過濾膜18上，并然后關(guān)閉泵或真空源。因而，在從瓶排出流體后，微生物種類和試劑配置在膜18上，以便然后可通過常規(guī)技術(shù)來進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。
[0025]轉(zhuǎn)至圖5，如所示，平臺(tái)140已從下壓板104移除，其中，微生物種類和試劑配置在表面18上。在該步驟緊前，蓋17已經(jīng)從容器的其余部分移除，剩下蓋17配置在平臺(tái)上。如在圖5中顯示，在彈簧146和148中的彈簧張力已松弛，其中，蓋17由軛部件142、144寬松地包圍。在該階段處，檢測(cè)器(例如顯微鏡等)可接近膜移動(dòng)，來計(jì)數(shù)或其他方式檢測(cè)被分析物微生物種類。在該檢查后，瓶2可被處置。
[0026]因而顯而易見的是，提供用于生物負(fù)載樣品選擇和檢測(cè)的可棄容器。該容器作用為正常的瓶，以選擇流體樣品并且由帽密封。在本發(fā)明的一個(gè)方面中，然后使容器上端朝下地放置在用于樣品制備(過濾、著色)和檢測(cè)(成像)的臺(tái)上。
[0027]生物負(fù)載測(cè)量工序可包括許多常規(guī)技術(shù)中的任一個(gè)，例如，比色測(cè)量技術(shù)，其中，著色劑經(jīng)由穿透層26的注射器等注入容器2中的流體樣品中。顯微鏡等用來對(duì)膜18上的微生物菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以估算生物負(fù)載水平。
[0028]此外，另一示范生物負(fù)載測(cè)試方法可包括發(fā)光或熒光劑通過可穿透層24到容器2中的樣品中的注入?？扇缓蠼?jīng)由緊接膜18放置的照相機(jī)等來檢測(cè)俘獲在膜18的表面上的期望的被分析物微生物種類。
[0029]可利用的另一生物負(fù)載測(cè)試程序包括“原位細(xì)胞分裂”方法。該方法是在細(xì)胞變得對(duì)肉眼可見之前用于有生命目標(biāo)細(xì)胞檢測(cè)的直接生長(zhǎng)快速方法。在該方法中，樣品通過MF過濾，以將微生物俘獲在其上。將MF轉(zhuǎn)移至營(yíng)養(yǎng)瓊脂片，并且允許目標(biāo)細(xì)胞通過原位呼吸而形成微菌落。(這通常耗費(fèi)大約三小時(shí)的保溫培養(yǎng)期。)利用藍(lán)光LED(Ex 450-500nm，Em 510-560nm)照射微菌落。CXD芯片用來檢測(cè)細(xì)胞自身熒光，且分析軟件用來對(duì)覆蓋各微菌落的感光像素自動(dòng)地進(jìn)行計(jì)數(shù)。
[0030]另一示范生物負(fù)載測(cè)試程序已知為“固相細(xì)胞計(jì)量術(shù)(SPC)方法”。該方法是用于通過下列連續(xù)步驟檢測(cè)總活細(xì)胞(TVC)的快速方法:(a)在黑的聚酯或聚碳酸酯MF上方過濾樣品，以俘獲微生物；(b)將MF轉(zhuǎn)移至包括碳氟化合物染料的墊，培養(yǎng)，以僅標(biāo)記代謝活性細(xì)胞；(c)利用氬激光掃描(Ex 480nm，Em 515nm)檢測(cè)由被標(biāo)記的細(xì)胞放射的熒光；(d)通過計(jì)算機(jī)處理信號(hào)，以區(qū)分有效信號(hào)與熒光粒子；和(e)確定該總活細(xì)胞的數(shù)量。
[0031]選擇過濾器膜的孔隙大小來俘獲固定在其上的微生物被分析物。該孔隙大小可大范圍地改變，例如包含從大約0.05 μ m至大約0.65 μ m的孔隙大小。示范膜過濾器(MF)包括以下:1) 25mm直徑，7-20μπι厚度，0.4μπι孔隙大小；2) 25mm直徑，6-11 μ m厚度，0.2μπι孔隙大小;和3) 47mm直徑，7-22 μm厚度，0.45 μm孔隙大小。適當(dāng)?shù)倪^濾器膜18的選擇是在本領(lǐng)域技術(shù)人員的技術(shù)范圍內(nèi)的。
[0032]本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可進(jìn)行生物負(fù)載測(cè)試來確定多種微生物的存在和計(jì)數(shù)水平。例如，可使用本發(fā)明的容器和方法進(jìn)行多種細(xì)菌、真菌、霉菌、酵母和孢子的計(jì)數(shù)。
[0033]應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明不限于在本文中描述和顯示的例示，認(rèn)為其僅例示了本發(fā)明的各種實(shí)施例，并且其適于進(jìn)行各種修改。本發(fā)明意圖覆蓋在所附權(quán)利要求中限定的精神和范圍中的所有的這種修改。
[0034]要求保護(hù)的為:
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于微生物檢測(cè)工序的樣品容器，其包括: a.容器，其具有頂部開口和相反的底部開口； b.頂部帽，其密封所述頂部開口，所述頂部帽包括:密封蓋，所述密封蓋包括凹入的蓋部分，所述凹入的蓋部分在其中包括多個(gè)流體流動(dòng)孔口 ；和膜過濾層，其置于所述流動(dòng)孔口下方； c.底部帽組件，其密封所述底部開口。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其特征在于，所述底部帽組件包括外部帽部件和置于所述外部帽下方的不透流體彈性體層。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的容器，其特征在于，所述彈性體層能夠由針注射器穿透。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其特征在于，所述頂部帽包括覆蓋所述密封蓋的保護(hù)膜層。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其特征在于，所述密封蓋包括圍繞所述凹入的蓋部分的環(huán)形凸起臺(tái)階區(qū)域，所述凹入的蓋部分為大體平面的。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其特征在于，具有:圓柱形橫截面的主體；頸部部分，其具有比所述主體小的直徑；和漸縮部分，其介于所述主體部分與所述頸部部分之間，所述頂部帽可分離地配合在所述頸部部分上方，且所述底部帽組件可分離地配合在所述底部開口上方。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其特征在于，所述容器是可棄的。
8.一種用于檢測(cè)流體樣品中的微生物存在的方法，包括: 1.用在其中包含被分析物微生物的流體樣品填充收集瓶的至少一部分，所述收集瓶具有相反的頂部和底部開口，其中在所述填充步驟期間，所述開口中的至少一個(gè)被密封； ?.在所述開口中的一個(gè)上提供第一帽部件，所述帽具有:第一表面，其在其中包括流體流動(dòng)孔口 ；和膜過濾器(MF)層，其置于所述第一表面下方； ii1.在所述開口中的所述另一個(gè)上提供第二帽部件，所述第二帽部件包括不透流體的針可穿透的表面； iv.通過所述第一帽部件排出所述第一流體樣品，從而使所述被分析物微生物沉積在所述MF層上； V.穿過所述不透流體的、針可穿透的表面將試劑注入所述流體樣品中，所述試劑適于與所述被分析物微生物反應(yīng)，以形成所述MF層上的可檢測(cè)的存在； v1.放置與所述MF層操作地相關(guān)的檢測(cè)器，以檢測(cè)所述被分析物微生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述試劑包括著色劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述試劑包括發(fā)光劑，所述發(fā)光劑適于在所述MF上產(chǎn)生發(fā)光微生物。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述檢測(cè)器是顯微鏡。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述檢測(cè)器包括照相機(jī)。
13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，還包括將所述收集瓶放置在瓶保持組件中，和在將所述試劑注入所述流體樣品中的所述步驟之后，將所述第一帽部件與所述收集瓶分離。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，還包括將所述第一帽部件固連在由平臺(tái)承載的抓握部件中，其中，所述平臺(tái)和所述保持組件相對(duì)于彼此移位，以從而將所述第一帽部件與所述收集瓶分離。
15.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，包括將流體管道連接到所述第一帽部件和通過所述流體管道排出所述流體樣品。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，還包括對(duì)所述管道應(yīng)用真空源。
【專利摘要】一種用于收集包含微生物的流體樣品的可棄容器(2)在多種微生物檢測(cè)方法中是有用的。容器(2)的一個(gè)端部設(shè)有蓋(17)，蓋(17)在一個(gè)表面上包括流體流動(dòng)孔口(16)，且在相反的表面上包括膜過濾器(MF)(18)。公開了方法，其中，容器(2)配置在保持組件(100)中，其中蓋(17)被抓握在分離的平臺(tái)(140)中。組件(100)和平臺(tái)(140)可相對(duì)于彼此移位，以將蓋(17)與容器(2)分離。
【IPC分類】C12Q1-04, C12M1-24
【公開號(hào)】CN104662144
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201280076011
【發(fā)明人】J.黃, W.肖, 金燕, 黃巖, 羅 C.(S.), X.黃, S.許, 馮雯雯
【申請(qǐng)人】通用電氣公司
【公開日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2012年9月25日
【公告號(hào)】CA2884671A1, EP2900802A1, US20150240284, WO2014047770A1