抗her3和抗her2抗體的組合療法
【專利說明】抗HER3和抗HER2抗體的組合療法
[0001] 本發(fā)明涉及抗J1ER3抗體與某些抗HER抗體的組合療法。
[0002] 發(fā)明背景
[0003]人HER3 (ErbB-3、ERBB3、c-erbB-3、c-erbB3、受體酪氨酸蛋白質(zhì)激酶erbB-3、 SEQIDN0:17)編碼受體酪氨酸激酶的表皮生長因子受體（EGFR)家族的一名成員，該家 族還包括HER1(又稱為EGFR)、HER2、和HER4 (Kraus,M.H?等，PNAS86(1989)9193-9197 ; Plowman,G.D?等，PNAS87 (1990) 4905-4909 ;Kraus，M.H?等，PNAS90(1993)2900-2904)。 與原型表皮生長因子受體一樣，跨膜受體HER3由胞外配體結(jié)合域（ECD)、ECD內(nèi)的二聚 化域、跨膜域、胞內(nèi)蛋白質(zhì)酪氨酸激酶域（TKD)和C端磷酸化域組成。此膜結(jié)合蛋白具有 胞外域內(nèi)的J1ER3調(diào)蛋白（HRG)結(jié)合域，但沒有活性激酶域。因此，它能結(jié)合此配體，但 是不能經(jīng)由蛋白質(zhì)磷酸化將信號傳送入細(xì)胞中。然而，它確實與確實具有激酶活性的其 它HER家族成員形成異二聚體。異二聚化導(dǎo)致受體介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑的激活及其胞內(nèi) 域的轉(zhuǎn)磷酸化。ffiR家族成員間的二聚體形成擴(kuò)大J1ER3的信號傳導(dǎo)潛力，并且是一種不 僅用于信號多樣化，而且用于信號放大的手段。例如，J1ER2/HER3異二聚體在HER家族成 員間經(jīng)由PI3K和AKT途徑誘導(dǎo)最重要的促有絲分裂信號之一（Sliwkowski，M.X.等，J. Biol.Chem. 269(1994) 14661-14665 ;Alimandi，M?等，Oncogene. 10(1995) 1813-1821 ; He1Iyer,N.J. ,J.Biol.Chem. 276 (2001) 42153-4261 ；Singer,E. ,J.Biol. Chem. 276 (2001) 44266-44274 ；Schaefer,K.L. ,Neoplasia8 (2006) 613-622) 〇
[0004] 已經(jīng)在許多癌癥（包括前列腺、膀胱、和乳腺腫瘤）中報告了此基因的表達(dá)和/或 其蛋白質(zhì)的表達(dá)。已經(jīng)表征了編碼不同同等型的可變轉(zhuǎn)錄剪接變體。一種同等型缺乏膜間 區(qū)，并且分泌到細(xì)胞外。此形式作用為調(diào)控膜結(jié)合形式的活性。還已經(jīng)報告了別的剪接變 體，但是它們尚未徹底表征。
[0005]W0 97/35885 涉及HER3 抗體。W0 2003/013602 涉及HER活性抑制劑，包括HER 抗體。TO2007/077028、TO2008/100624、TO2011076683、TO2011044311、W02011136911、 W02012019024,ff02012022814,ff02012031198,ff02012044612,ff02012052230,ff02012059858 涉及HER3抗體。
[0006] 人HER2指也稱作neu和c-erbB-2的185kDa生長因子受體（Slamon等，Science 235(1987) 177-182 ;Swiss-ProtP04626)，其功能涉及人乳腺癌細(xì)胞中的贅生性轉(zhuǎn)化。已 經(jīng)在20-30%的乳腺癌患者中鑒定出這種蛋白的過表達(dá)，其中它與區(qū)域性晚期疾病、腫瘤復(fù) 發(fā)概率升高、和患者存活縮短有關(guān)。多達(dá)30-40%具有胃癌、子宮內(nèi)膜癌、唾液腺癌、非小細(xì) 胞肺癌、胰腺癌、卵巢癌、腹膜癌、前列腺癌、或結(jié)腸直腸癌的患者也可展現(xiàn)這種蛋白的過表 達(dá)。
[0007]HER受體一般會包含胞外域（其可結(jié)合HER配體）、親脂性跨膜域、保守胞內(nèi)酪 氨酸激酶域、和羧基末端信號傳導(dǎo)域（其包含數(shù)個能被磷酸化的酪氨酸殘基）。ffiR2的 胞外域包含四個域，即域1(氨基酸殘基約1-195)、域II(氨基酸殘基約196-320)、域 III(氨基酸殘基約321-488)、和域IV(氨基酸殘基約489-632)(殘基編號方式不含信號 肽）。參見Garrett等，Mol.Cell. 11(2003)495-505;Cho等，Nature421(2003)756-760 ; Franklin等，Cancer Cell5(2004)317-328;或Plowman等，Proc. Natl. Acad. Sci.90 (1993) 1746-1750 和TO2006/007398。
[0008] 曲妥單抗（Trastuzumab)(以商品名赫賽汀(Herceptin)?銷售）是一種重組人源 化抗HER2單克隆抗體，用于治療HER2過表達(dá)/HER2基因擴(kuò)增的轉(zhuǎn)移性乳腺癌。曲妥單抗 特異性結(jié)合與Hudziak等，Mol.Cell.Biol. 9(1989) 1165-1172中記載的鼠抗HER2抗體4D5 相同的J1ER2表位。曲妥單抗是鼠抗HER2抗體4D5的一種重組人源化型式（稱作rhuMAb 4D5或曲妥單抗），而且已經(jīng)是在接受過廣泛在先抗癌療法的具有過表達(dá)HER2的轉(zhuǎn)移性乳 腺癌的患者中有臨床活性的（Baselga等，J.Clin.Oncol. 14 (1996) 737-744)。曲妥單抗及 其制備方法記載于US5, 821，337。
[0009] 帕妥珠單抗（Pertuzumab) (Omnitarg? )是另一種重組人源化抗HER2單克隆抗 體，用于治療J1ER2陽性癌癥。帕妥珠單抗特異性結(jié)合2C4表位，HER2胞外域上一種與曲妥 單抗不同的表位。帕妥珠單抗是J1ER2二聚化抑制劑（HDI)的一個新類別中的第一個。經(jīng)由 其對HER2胞外域的結(jié)合，帕妥珠單抗抑制HER2 (與其它HER家族成員）二聚化，由此抑制 與腫瘤生長和進(jìn)展有關(guān)的下游信號傳導(dǎo)途徑和細(xì)胞過程（Franklin,M.C.等，CancerCell 5 (2004) 317-328 和Friess，T?等，ClinCancerRes11(2005)5300-5309)。帕妥珠單抗是 鼠抗HER2抗體2C4的一種重組人源化型式（稱作rhuMAb2C4或帕妥珠單抗），而且它與相 應(yīng)制備方法一起記載于W0 01/00245和W0 2006/007398。
[0010] "表位2C4"是HER2的胞外域中抗體2C4結(jié)合的區(qū)域。為了篩選結(jié)合2C4表位 的抗體，可以實施諸如記載于Ed.HarlowandDavidLane,Antibodies,ALaboratory Manual,ColdSpringHarborLaboratory(1988)的常規(guī)交叉阻斷測定法?；蛘撸梢詫嵤?表位定位以評估抗體是否結(jié)合J1ER2的2C4表位（例如HER2中自約殘基22至約殘基584 (含 端點）的區(qū)域中的任何一個或多個殘基）。表位2C4包含來自HER2的胞外域中的域II的 殘基。2C4和帕妥珠單抗在域I、II和III接合處結(jié)合HER2的胞外域。還可參見Franklin 等，CancerCell5(2004)317-328。
[0011] 人HER1 (也稱作rErb-Bl或人表皮生長因子受體（EGFR)，SEQIDNO: 19) 是一種由c-erbB原癌基因編碼的170kDa跨膜受體，且展現(xiàn)內(nèi)在的酪氨酸激酶活性 (Modjtahedi，H?等，Br.J.Cancer73(1996) 228-235 ;Herbst，R.S?和Shin,D.M.，Cancer 94(2002) 1593-1611)。SwissProt數(shù)據(jù)庫條目P00533提供EGFR的序列。還有EGFR的同等 型和變體（例如可變RNA轉(zhuǎn)錄物、截短型式、多態(tài)性、等），包括但不限于那些由Swissprot 數(shù)據(jù)庫條目號P00533-1、P00533-2、P00533-3、和P00533-4鑒別的。已知EGFR結(jié)合包括 表皮生長因子（EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-a(TGF-a)、雙調(diào)蛋白、肝素結(jié)合性EGF(hb-EGF)、 0細(xì)胞調(diào)蛋白、和上皮調(diào)蛋白在內(nèi)的配體（Herbst,R.S.和Shin,D.M.，Cancer 94(2002) 1593-1611 ;Mendelsohn，J?和Baselga，J.，0ncogene19(2000)6550-6565)。 EGFR經(jīng)酪氨酸激酶介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)眾多細(xì)胞過程，包括但不限于控制細(xì)胞增殖、 分化、細(xì)胞存活、凋亡、血管發(fā)生、有絲分裂、和轉(zhuǎn)移的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活（Atalay，G. 等，Ann.Oncology14 (2003) 1346-1363 ;Tsao,A.S?和Herbst，R.S.，Signal4(2003)4-9; Herbst，R.S?和Shin,D.M.，Cancer94(2002) 1593-1611 ;Modjtahedi，H?等，Br.J.Cancer 73(1996)228-235)〇
[0012] 已經(jīng)報告了眾多人惡性疾患中的HER1過表達(dá)，包括膀胱、腦、頭和頸、胰腺、肺、 乳腺、卵巢、結(jié)腸、前列腺、和腎的癌癥（4七3]^7,6.等，4]111.〇11(3〇1(^714(2003) 1346-1363; Herbst，R.S?和Shin,D.M.，Cancer94 (2002) 1593-1611 ;Modjtahedi，H?等，Br. J.Cancer73(1996)228-235)。在許多這些疾患中，EGFR過表達(dá)與患者預(yù)后較差有 關(guān)（Herbst，R.S?和Shin,D.M.，Cancer94(2002) 1593-1611 ;Modjtahedi，H.等，81\ J.Cancer73(1996)228-235)。HER1也在正常組織的細(xì)胞中表達(dá)，特別是皮膚、肝、和胃腸 道的上皮組織，盡管一般處于比惡性細(xì)胞低的水平（Herbst，R.S.和Shin，D.M.，Cancer 94(2002)1593-1611)。
[0013]W0 2006/082515涉及自大鼠單克隆抗體ICR62衍生的人源化抗EGFR單克隆抗體 及其糖工程化形式，它們用于癌癥治療。
[0014] 發(fā)明概述
[0015] 本發(fā)明提供抗HER3抗體與結(jié)合人HER2且抑制HER2二聚化的抗體或與結(jié)合HER1 的抗體的組合療法，其中所述結(jié)合人HER1的抗體特征在于是在Asn297處用糖鏈糖基化的， 其中所述糖鏈內(nèi)巖藻糖的量是65 %或更低。在一個實施方案中，所述結(jié)合人HER3的抗體特 征進(jìn)一步在于是在Asn297處用糖鏈糖基化的，其中所述糖鏈內(nèi)巖藻糖的量是65 %或更低。 [0016] 本發(fā)明的一個方面是一種結(jié)合人HER3的抗體，其用于與結(jié)合人HER2且抑制HER2 二聚化的抗體組合治療癌癥，其中所述癌癥為J1ER2正常的癌癥。
[0017] 在一個實施方案中，所述結(jié)合人HER3的抗體特征在于：重鏈可變域包含SEQID NO: 1的CDR3H區(qū)、SEQIDN0:2的CDR2H區(qū)、和SEQIDN0:3的CDR1H區(qū)，且輕鏈可變域包 含SEQIDN0:4 的CDR3L區(qū)、SEQIDN0:5 的CDR2L區(qū)、和SEQIDN0:6 的CDR1L區(qū)或SEQ IDN0:7 的CDR1L區(qū)。
[0018] 在一個實施方案中，所述結(jié)合人HER3的抗體特征在于：作為重鏈可變域包含SEQ IDN0:1 的CDR3H區(qū)、SEQIDN0:2 的CDR2H區(qū)、和SEQIDN0:3 的CDR1H區(qū)，且輕鏈可變域 包含SEQIDN0:4 的CDR3L區(qū)、SEQIDN0:5 的CDR2L區(qū)、和SEQIDN0:7 的CDR1L區(qū)。
[0019] 在一個實施方案中，所述結(jié)合人HER3的抗體特征在于：重鏈可變域VH是SEQID NO:8;且輕鏈可變域VL是SEQIDNO: 10。
[0020] 在一個實施方案中，上文所述結(jié)合人HER3的抗體特征進(jìn)一步在于是在Asn297處 用糖鏈糖基化的，其中所述糖鏈內(nèi)巖藻糖的量是65 %或更低。
[0021] 在一個實施方案中，所述結(jié)合人HER2且抑制HER2二聚化的抗體為帕妥珠單抗。
[0022] 在一個實施方案中，所述癌癥特征在于HER3表達(dá)。
[0023] 在一個實施方案中，所述癌癥為乳腺癌、卵巢癌、胃癌、前列腺癌、胰腺癌或頭或頸 癌乳腺癌。
[0024]