20,EC編號(hào)：230-571-3)
[0112] 實(shí)施例1實(shí)驗(yàn)方案
[0113] 在300y1孔/96孔微滴定（微孔）板中制備以下反應(yīng)混合物：
[0114] 試驗(yàn)混合物：
[0115] Savinase16L(2. 6yg/ml) ： 100y 1
[0116] BODIPYTR-X染料標(biāo)記的酪蛋白底物（10yg/ml) 80y1
[0117] DL-精氨酸（0? 15 至 1M) 20y1
[0118] 對(duì)照混合物（無精氨酸）：
[0119] Savinase16L(2. 6yg/ml) ： 100y 1
[0120] BODIPYTR-X染料標(biāo)記的酪蛋白底物（10yg/ml) 80y1
[0121] 50mMTris.HCl(pH8.0) 20y1
[0122] 在這兩種情況下，底物均最后加入并將反應(yīng)物于22度下培育1小時(shí)。蛋白酶催化 的水解釋放高熒光BODIPYTR-X染料標(biāo)記肽。熒光的伴隨增加與蛋白酶活性成比例。在設(shè) 定為在485nm下激發(fā)并在530nm下檢測發(fā)射的熒光酶標(biāo)儀中測量熒光強(qiáng)度。
[0123] 實(shí)施例1結(jié)果
[0124] 表 1 :對(duì)具有一系列精氨酸濃度的 1. 3yg/mlSavinase和 4yg/mlBODIPYTR-X 染料標(biāo)記酪蛋白底物測得的相對(duì)熒光單位（RFU)。對(duì)每一濃度平行地進(jìn)行四個(gè)平行測定。
[0126] 結(jié)果在圖1中示出
[0127] 在0. 25M下精氨酸提高相對(duì)Savinase活性至51. 4%的最大值。
[0128] 實(shí)施例2 :精氨酸對(duì)Stainzyme(去漬酶）活性的影響
[0129] 實(shí)施例2試劑：
[0130] -反應(yīng)緩沖液：50mMM0PS(pH6. 9)
[0131]-Stainzyme12L(Novozymes)〇
[0132] -B0DIPYFL染料結(jié)合DQ淀粉底物溶液：將lmgBODIPYFL染料結(jié)合DQ淀粉底物 (Invitrogen，目錄編號(hào)E33651)徹底溶解在100y1 50mM的醋酸鈉緩沖液（pH4. 0)中。然 后將這100y1溶液加到900y1 50mMMOPS(pH6. 9)中以制備10yg/ml的工作溶液。新 鮮底物在每個(gè)試驗(yàn)之前不久制備并貯存在室溫下暗處直至需要。
[0133] -精氨酸（Sigma目錄編號(hào) 11020,EC編號(hào)：230-571-3)
[0134] 實(shí)施例2方案：
[0135] 在300y1 96孔板中制備以下反應(yīng)混合物：
[0136] 試驗(yàn)混合物：
[0137] Stainzyme12L(0. 34yg/ml) ： 80y1
[0138] BODIPYFL染料結(jié)合DQ淀粉底物（10yg/ml) 100y1
[0139] DL-精氨酸（0? 15 至 1M) 20y1
[0140] 對(duì)照混合物（無精氨酸）：
[0141] Stainzyme12L(0. 34yg/ml) ： 80y1
[0142] BODIPYFL染料結(jié)合DQ淀粉底物（10yg/ml) 100y1
[0143] 50mMMOPS(pH6. 9) 20y1
[0144] 在對(duì)照和試驗(yàn)混合物二者中，底物均最后加入并將反應(yīng)于22度下培育30分鐘。底 物被淀粉酶降解，釋放高熒光片段。熒光的伴隨增加與淀粉酶活性成比例。在設(shè)定為例如 在485nm下激發(fā)并在520nm下檢測發(fā)射的熒光酶標(biāo)儀中測量熒光強(qiáng)度。
[0145] 實(shí)施例2結(jié)果
[0146] 表2 :對(duì)具有一系列DL-精氨酸濃度的Stainzyme和BODIPYFL染料結(jié)合DQ淀粉 底物測得的相對(duì)熒光單位（RFU)。對(duì)每一濃度平行地進(jìn)行四個(gè)平行測定。
[0149] 表2的結(jié)果示于圖2中。
[0150] 在0. 06M下精氨酸提高相對(duì)Stainzyme活性至14. 3%的最大值。實(shí)施例3 :終點(diǎn) 法去污試驗(yàn)
[0151] 實(shí)施例3試劑：
[0152] -將以下臟布樣品沖孔成盤并轉(zhuǎn)移到300y1 96孔板：
[0153] 蛋白酶敏感污漬：EMPA117 :血 / 奶 / 油墨（TestfabricsInc.)
[0154] 淀粉酶敏感污漬：CS27 :馬鈴薯淀粉，有色（TestfabricsInc.)
[0155] -洗衣酶（Novozymes):
[0156] (l)Savinase16L
[0157] (2)Stainzyme12L
[0158] -組合物A
[0159] -DL-精氨酸（Sigma目錄編號(hào) 11020,EC編號(hào)：230-571-3)
[0160] 實(shí)施例3方案：
[0161] _預(yù)漂洗染污布以移除任何殘余的游離污漬：
[0162] -向每個(gè)孔中加入200yl蒸餾水
[0163] -在900rpm下振搖板10分鐘
[0164] -移除洗滌液
[0165] 反應(yīng)混合物：
[0166] 試驗(yàn)混合物：
[0168] *在蒸餾水中稀釋到以下mg/ml濃度的精氨酸：0?08、0. 16、0. 32、0. 64、1. 28、2. 56 和 5. 12〇
[0169] 對(duì)照混合物：
[0170]酶（Stainzyme/Savinase)5mg/L 20y1
[0171] 實(shí)施例組合物A :5mg/L 100 y 1
[0172]蒸餾水 80yl
[0173] _在兩種情況下，酶均最后加入。反應(yīng)在900rpm下振搖的同時(shí)于22度下培育1小 時(shí)。
[0174] _通過向每個(gè)孔中加入200y1蒸餾水、然后于900rpm下振搖5分鐘來漂洗布。然 后移除洗滌液。重復(fù)此程序連續(xù)四次。
[0175] _將布于40度下干燥3小時(shí)
[0176] _干燥后，數(shù)字掃描污漬板并測量其AE。此值被用來表達(dá)清潔效果并定義為白布 與經(jīng)洗滌之后的染污布之間的色差。在數(shù)學(xué)上，AE的定義為：
[0177]AE= [(AL)2+(Aa)2+(Ab)2]1/2
[0178] 其中AL為經(jīng)洗絳布和白布之間暗度差異的量度；Aa和Ab分別為兩布之間紅 度和黃度差異的量度。從這個(gè)公式很明顯，AE的值越低，布將越白。關(guān)于此測色技術(shù)，參考 CommissionInternationaldeI'Eclairage(CIE)RecommendationonUniformColour Spaces,colourdifferenceequations,psychometriccolourterms,supplementno. 2to CIEPublication，no. 15,Colormetry，BureauCentraldelaCIE,Paris1978〇
[0179] 實(shí)施例3結(jié)果
[0180] 下表中以去污指數(shù)（SRI)的形式表達(dá)了清潔效果：
[0181]SRI= 100-AE
[0182]SRI越高，貝丨」布越清潔，SRI= 100 (白色）。
[0183] 表3. 1 :使用經(jīng)用Savinase和一系列精氨酸濃度在組合物A中處理的EMPA117染 污布的終點(diǎn)法去污試驗(yàn)。在同一 96孔板上平行地進(jìn)行四個(gè)平行測定。掃描板并計(jì)算AE 和SRI值。
[0185]
[0186] 表3. 1的結(jié)果示于圖3. 1中。
[0187] 表3. 2 :使用經(jīng)用Stainzyme和一系列DL-精氨酸濃度在組合物A中處理的CS27 染污布的終點(diǎn)法去污試驗(yàn)。在同一 96孔板上平行地進(jìn)行四個(gè)平行測定。掃描板并計(jì)算AE 和SRI值。
[0189] 表3. 2的結(jié)果示于圖3. 2中。
[0190] 這些結(jié)果說明，精氨酸化合物DL-精氨酸可以劑量依賴方式增強(qiáng)Savinase和 Stainzyme的去污活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種織物去污組合物，所述織物去污組合物包含以下組分的組合： (i) 一種或多種酶；和 (ii) 一種或多種精氨酸化合物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的織物去污組合物，其特征在于其是環(huán)境活性的。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的織物去污組合物，其特征在于其包含一種或多種表面活性 劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的織物去污組合物，其特征在于所述一種或多種酶包含蛋白 酶。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的織物去污組合物，其特征在于所述一種或多種酶包含淀粉 酶。6. -種自染污織物移除污漬的方法，所述方法包括用根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述 的組合物處理所述污漬的步驟。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述方法在環(huán)境條件中進(jìn)行。8. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于所述組合物被直接施用到所述污漬，所 述步驟任選地為預(yù)處理步驟。9. 精氨酸化合物與一種或多種酶組合地用于從染污織物中移除污漬的用途，所述一種 或多種酶優(yōu)選為蛋白酶和/或淀粉酶。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種酶處理組合物，其包含以下組分的組合：(iii)一種或多種酶；和(iv)一種或多種精氨酸化合物。
【IPC分類】C11D7/32, C11D3/33, C11D3/386
【公開號(hào)】CN104884598
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380067446
【發(fā)明人】R·A·岡加比森
【申請(qǐng)人】荷蘭聯(lián)合利華有限公司
【公開日】2015年9月2日
【申請(qǐng)日】2013年12月13日
【公告號(hào)】EP2935550A1, WO2014095618A1