含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物及其制備與在抑制腫瘤細(xì)胞中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物及其制備與在抑制腫瘤細(xì)胞中 的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 香豆素是具有苯駢吡喃酮母核的一類天然化合物的總稱，在結(jié)構(gòu)上可以看作是順 鄰羥基桂皮酸失水而成的內(nèi)酯。香豆素類化合物廣泛分布于植物界，只有少數(shù)來(lái)自于動(dòng)物 和微生物，在蕓香科、傘形科、菊科、豆科、瑞香科、茄科等植物中分布更廣，很多中草藥如秦 皮、補(bǔ)骨脂、白芷、前胡、獨(dú)活、茵陳和蛇床子等都含有香豆素類化合物。研宄表明，香豆素類 化合物具有明顯的藥理活性，如抗HIV、抗癌、對(duì)心血管的影響、抗炎及平滑肌松弛、抗凝血 等。
[0003] AIDS (獲得性免疫缺陷綜合癥）是由HIV-I (人類免疫缺陷病毒）所引起的一種免 疫和中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病。經(jīng)過(guò)多年的努力，calanolide和inophyllum等一系列香豆 素類化合物先后從天然產(chǎn)物中分離出來(lái)，體外實(shí)驗(yàn)表明，天然calanolide和inophyIIum香 豆素對(duì)HIV-I-RT具有高度特異性。Patil等人總結(jié)了天然calanolide和inophyllum香豆 素及其類似物的構(gòu)效關(guān)系并發(fā)現(xiàn)：①二氫吡喃醇環(huán)C-10和11兩個(gè)甲基的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)至 關(guān)重要，當(dāng)兩者處于二氫吡喃醇環(huán)的反式雙直立位時(shí)活性最強(qiáng)，具有這種構(gòu)型的化合物有 calanolide A 和 B ;inophyllumB 和 P ;costatolide 和 soulattrolide。② 12-羥基的構(gòu)型 及取代對(duì)活性也有較大影響，具有12 羥基化合物的活性大于α構(gòu)型的異構(gòu)體。③香豆 素內(nèi)酯環(huán)開環(huán)或吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)改變的化合物活性幾乎消失。calanolide A是目前抗AIDS的 熱點(diǎn)先導(dǎo)物，美國(guó)正在試用于臨床研宄，并且有可能成為治療AIDS的新一代非核苷酸類藥 物
[0004] 本發(fā)明基于香豆素的抗癌活性，對(duì)其引入不同取代基進(jìn)行修飾，合成出一系列含 含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物，并對(duì)它們進(jìn)行抗癌活性測(cè)試。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明涉及含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物及其制備與在抑制腫瘤細(xì)胞中 的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0007] -類含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物，其特征是它有如下通式：
[0008]
[0009] 其中R為：
[0010]
[0011] 一種制備上述的含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物的方法，其特征是它由下列 步驟組成：
[0012] 將4-羥基香豆素0. 06mmol溶解在46. 2ml的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺中，將此反 應(yīng)液冷卻至(TC以下。在(TC以下條件下，邊攪拌邊緩慢滴加 POCl3O. ISmmol，待POCl3加畢， 將反應(yīng)液緩慢升溫至室溫條件下攪拌0. 5h后，然后升溫至65-70°C攪拌反應(yīng)6h。用TLC跟 蹤監(jiān)測(cè)反應(yīng)，當(dāng)反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)液倒入200g的冰水混合物中并劇烈攪拌，有大量淺黃 色固體1析出。將固體抽濾，并用5%的Na2CO3水溶液洗絳，將所得固體干燥，即得到中間 體。
[0013] 將步驟一中所得固體Immol溶解在IOml乙醇中，加完攪拌使其溶解充分，然后冷 卻至15-20°〇，將配置好的溶液（85%的水合肼2臟〇1+三乙胺4臟〇1+60%乙醇101111)在攪 拌條件下，保持溫度在15_20°C，緩慢滴加至反應(yīng)液中。滴加畢，保持溫度不超過(guò)25°C，攪拌 反應(yīng)12h。用TLC跟蹤監(jiān)測(cè)反應(yīng)。將所得固體減壓濃縮，所得固體用乙醇重結(jié)晶，即得到中 間體2。
[0014] 取中間體23mmol和α -溴苯乙酮3. 6mmol溶解在20ml的丙酮中，攪拌條件下加 入三乙胺6mmol，0°C攪拌反應(yīng)15h，通過(guò)TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)度，反應(yīng)畢，反應(yīng)液減壓蒸除溶劑， 加入水，將水層用乙酸乙酯（3 X IOOmL)萃取。將有機(jī)層合并，并用無(wú)水硫酸鈉干燥，并減壓 蒸除溶劑。所的固體用乙醇重結(jié)晶，得到純的化合物3。
[0015] 將上一步所得到的化合物31mmol與吡啶3mmol溶解在20ml無(wú)水乙醇中，同時(shí)加 入2mmol的乙醇鈉和鹽酸輕胺2mmol的混合物，加熱攪拌回流15-20h，以TLC檢測(cè)反應(yīng)完全 后，冷卻后，將混合物倒入碎冰中，固體通過(guò)過(guò)濾收集。將固體進(jìn)行硅膠色譜法進(jìn)行柱層析 或用乙醇重結(jié)晶的方法，得到最終產(chǎn)物。
[0016] 本發(fā)明的含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞具有明顯的抑制作用。 因此本發(fā)明的含羰基或肟的香豆素并吡唑類化合物可以應(yīng)用于制備抗癌藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不受這些實(shí)施例的任 何限制。
[0018] 實(shí)施例一 ：2-(2-氧代-2-苯乙基）色烯并[4,3-c]吡唑-4(2H)_酮（化合物1) 的制備
[0019]
[0020] 將4-羥基香豆素0. 06mmol溶解在46. 2ml的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺中，將此反 應(yīng)液冷卻至(TC以下。在(TC以下條件下，邊攪拌邊緩慢滴加 POCl3O. ISmmol，待POCl3加畢， 將反應(yīng)液緩慢升溫至室溫條件下攪拌0. 5h后，然后升溫至65-70°C攪拌反應(yīng)6h。用TLC跟 蹤監(jiān)測(cè)反應(yīng)，當(dāng)反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)液倒入200g的冰水混合物中并劇烈攪拌，有大量淺黃 色固體1析出。將固體抽濾，并用5%的Na2CO3水溶液洗絳，將所得固體干燥，即得到中間 體。
[0021] 將步驟一中所得固體Immol溶解在IOml乙醇中，加完攪拌使其溶解充分，然后冷 卻至15-20°〇，將配置好的溶液（85%的水合肼2臟〇1+三乙胺4臟〇1+60%乙醇101111)在攪 拌條件下，保持溫度在15_20°C，緩慢滴加至反應(yīng)液中。滴加畢，保持溫度不超過(guò)25°C，攪拌 反應(yīng)12h。用TLC跟蹤監(jiān)測(cè)反應(yīng)。將所得固體減壓濃縮，所得固體用乙醇重結(jié)晶，即得到中 間體2。
[0022] 取中間體23mmol和α -溴苯乙酮3. 6mmol溶解在20ml的丙酮中，攪拌條件下 加入三乙胺6mmol，0°C攪拌反應(yīng)15h，通過(guò)TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)度，反應(yīng)畢，反應(yīng)液減壓蒸除溶 劑，加入水，將水層用乙酸乙酯（3 X IOOmL)萃取。將有機(jī)層合并，并用無(wú)水硫酸鈉干燥，并 減壓蒸除溶劑。所的固體用乙醇重結(jié)晶，即得到最終產(chǎn)物。產(chǎn)物為白色粉末，產(chǎn)率60%。 M. p. 213-214〇C . 1HNMR (400MHz, DMS〇-d6) ：8. 81(s,lH, ArH), 8. 09 (t, J = 4. 2Hz,2H, ArH), 7. 80-7. 97 (m，1H，ArH)，7. 75 (t，J = 7.40Hz，1H，ArH)，7.63 (t，J = 7.72Hz，2H，ArH)， 7.54-7.60(m，lH，ArH)，7.46(d，J = 8.08Hz，lH，ArH)，7.35-7.41(m，lH，ArH)，6.20(s， 2H, -CH2). MS(ESI) ：305. 03 (C18H13N2O3, [M+H]+). Anal. Calcd for C18H12N203：C, 71. 05 ；H, 3. 97 ；N, 9. 21 % . Found ：C, 71. 03 ；H, 3. 96 ；N, 9. 21 % .
[0023] 實(shí)施例二：2-(2-氧代-2-(對(duì)甲苯基）乙基）色烯并[4, 3-c]吡唑-4 (2H)_酮 (化合物2)的制備
[0024]
[0025] 制備方法同實(shí)施例一。產(chǎn)物為白色粉末狀固體。產(chǎn)率58%。M.p. 216_218°C .1H 匪R (400MHz，DMS0-d6) :8. 79 (s，lH，ArH-d6)，7. 97-8. 01 (m，3H，ArH)，7. 54-7. 60 (m，lH， ArH)，7.41-7.48(m，3H，ArH)，7.36-7.41(m，lH，ArH)，6.12(s，2H，-CH2)，2.42(s，3H，-CH 3). MS(ESI) ：319. 24 (C19H15N2O3, [M+H]+). Anal. Calcd for C19H14N203：C, 71. 69 ；H, 4. 43 ；N, 8. 80% . Found ：C,71. 68 ；H,4. 44 ；N,8. 81% .
[0026] 實(shí)施例三：2-(2-(4-甲氧基苯基）-2-氧代乙基）色烯并[4, 3-c]吡唑-4 (2H)_酮
(化合物3)的制備
[0027]
[0028] 制備方法同實(shí)施例一。產(chǎn)物為白色粉末狀固體。產(chǎn)率33%。Mp :261-263°C .1H NMR(400MHz, DMSO) ：8. 75 (s, 1H, ArH), 7. 97 (d, J = 6. 96Hz, 1H, ArH), 7. 55 (t, J = 7. 26Hz, lH，ArH)，7.44(d，J = 8.20Hz，lH，ArH)，7.38(t，J = 7.46Hz，lH，ArH)，7.14(t，J = 8. 16Hz，lH，ArH)，6.57 (d，J = 8. 20Hz，lH，ArH)，6.50 (s，lH，ArH)，6.41 (dd，J1= 8.08Hz， J2= I. 56Hz，1H，ArH)，5. 53 (s，2H，-CH 2)，3. 72 (s，3H，-OCH3)，3. 68 (s，2H，-CH2)，3. 62 (s， 2H，-CH2)，3.26 (s，2H，-CH2)，3. 16 (s，2H，-CH2) .MS (ESI) :419. 31 (C23H23N4O4, [M+H]+) .Anal. Calcd for C23H22N404：C, 66. 02 ；H, 5. 30 ；N, 13. 39% . Found ：C,66. 04 ；H,5. 31 ；N, 13. 36% .
[0029] 實(shí)施例四：2-(2-([1，Γ -聯(lián)苯]-4-基）-2-氧代乙基）色烯并[4,3_c]吡 唑-4 (2H)-酮（化合物4)的制備
[0030]
[0031] 制備方法同實(shí)施例一。產(chǎn)物為白色粉末狀固體。產(chǎn)率55%。M.p. 216-217°c .1H NMR(400MHz，DMS0-d6) :8. 83(s，1H，ArH)，8· 18(d，J = 8. 36Hz，2H，ArH)，7· 98-8. 02(m，1H， ArH)，7.94(d，J = 8.36Hz，2H，ArH)，7.81(d，J = 7.44Hz，2H，ArH)，7.51-7.61(m，3H，ArH)， 7.46(t，J = 7.7Hz，2H，ArH)，7.39(t，J = 7.48Hz，lH，ArH)，6.23(s，2H，-CH2).MS(ESI): 381. 31 (C24H17N2O3^ [M+H]+). Anal. Calcd for C24H16N2O3 ：C, 75. 78 ；H,4. 24 ；N,7. 36% . Found ： C，75. 76 ;H，4. 25 ;N，7. 35% ·
[0032] 實(shí)施例五：2-(2-(4-氟苯基）-2-氧代乙基）色烯并[4, 3-c]吡唑-4(2H)_酮（化 合物5)的制備
[0033]
[0034] 制備方法同實(shí)施例一。產(chǎn)物為白色粉末狀固體。產(chǎn)率62%。M.p. 193_194°C . 1H NMR(400MHz，DMS0-d6) :8.80(s，lH，ArH)，8.16-8.21(m，2H，ArH)，7.98(d，J = 7.68Hz， 1H，ArH)，7· 54-7. 60 (m，1H，ArH)，7· 44-7. 50 (m，3H，ArH)，7· 39 (t，J = 7. 50Hz，1H，ArH)， 6. 18 (s,2H, -CH2). MS (ESI) ：322. 15 (C18H12FN2O3, [M+H]+). Anal. Calcd for C18HnFN203：C, 67. 08 ；H,3. 44 ；N,8. 69% . Found ：C,67. 11 ；H,3. 42 ；N,8. 68% .
[0035] 實(shí)施例六：2-(2-(4-溴苯基）-2-氧代乙基）色烯并[4, 3-c]吡唑-4(2H)_酮（化 合物6)的制備
[0036]
[0037] 制備方法同實(shí)施例一。產(chǎn)物為白色粉末狀固體。產(chǎn)率59%。M.p. 198_200°C .1H NMR(400MHz，DMS0-d6) :8. 80(s，1H，ArH)，8· 02(t，J = 4. 30Hz，2H，ArH)，7· 96-8. 00(m，1H