活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種核酸反應(yīng)管及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]在各類(lèi)核酸反應(yīng)中，同一反應(yīng)中的不同組分往往需要分別貯存，原因是有些組分之間會(huì)相互影響，甚至提前反應(yīng)，導(dǎo)致組分活性下降，影響試驗(yàn)效果，例如限制性?xún)?nèi)切酶酶切體系中會(huì)將酶與Buffer分開(kāi)，目前市面上銷(xiāo)售的限制性?xún)?nèi)切酶均為酶和相應(yīng)Buffer分管配套銷(xiāo)售。研究人員在使用時(shí)需在反應(yīng)體系中分別添加，并自行配備反應(yīng)管，在進(jìn)行大量樣本的相同酶切鑒定時(shí)要進(jìn)行大量的加樣操作。另外在PCR反應(yīng)體系中，酶的活性也容易受到其它組分的影響，當(dāng)上下游引物之間存在互補(bǔ)作用，而體系中其它原料組分都存在，此時(shí)即使不加入模板DNA，也可能造成Taq酶的損失，此類(lèi)情況可以發(fā)生在引物與PCR預(yù)混液混合保存的條件下。在大規(guī)模的分子標(biāo)記鑒定中，為了保證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，研究人員通常會(huì)按照常規(guī)的操作流程將不能預(yù)混的組分單獨(dú)進(jìn)行添加，導(dǎo)致工作量巨大，并且反復(fù)的加樣操作會(huì)使人為誤差的發(fā)生幾率大幅增加，影響鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，實(shí)現(xiàn)“安全預(yù)混”意義重大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管及其應(yīng)用，在傳統(tǒng)PCR反應(yīng)管的基礎(chǔ)上，在管體內(nèi)部增加活動(dòng)插片設(shè)計(jì)，該活動(dòng)插片與管壁內(nèi)部U型凹槽結(jié)構(gòu)吻合，使活動(dòng)插片與管壁接縫處具有良好的密封性，保證活動(dòng)插片兩側(cè)液體獨(dú)立貯存，不發(fā)生混合。
[0004]本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0005]—種活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管，包括核酸反應(yīng)管和活動(dòng)插片兩部分，所述核酸反應(yīng)管的管壁內(nèi)側(cè)設(shè)置有U型凹槽，活動(dòng)插片插于U型凹槽內(nèi)，所述活動(dòng)插片的頂端留有接頭，接頭根部設(shè)有折痕，折后接頭與管口平面平行。
[0006]上述活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管可以作為便捷操作試劑盒應(yīng)用于不同種類(lèi)的核酸反應(yīng)，適用于多種試劑的便捷操作包裝。
[0007]本發(fā)明中，所述活動(dòng)插片的制作選用與管體相同的材質(zhì)，表面經(jīng)硅化處理，在抽出時(shí)不粘帶液體，確保體系的完整性。
[0008]本發(fā)明中，所述活動(dòng)插片完全插入核酸反應(yīng)管后，在管體高度的基礎(chǔ)上留有3mm接頭，接頭根部設(shè)計(jì)折痕，折后接頭可與管口平面平行，上表面可利用粘著劑(傳統(tǒng)封口膜所使用的粘著劑即可)與封口膜(蓋)粘合，使用時(shí)在打開(kāi)封口膜(蓋)的同時(shí)，活動(dòng)插片由于頂端的粘合力和牽引力被順勢(shì)抽出，管內(nèi)原有“隔間”消失，原不同隔間內(nèi)單獨(dú)貯存的液體組份發(fā)生混合，此時(shí)只要按說(shuō)明書(shū)向管內(nèi)加入待反應(yīng)的核酸樣品即可。
[0009]本發(fā)明中，所述活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管分為96孔板和單獨(dú)反應(yīng)管兩種，96孔板采用封口膜封口，加入待檢DNA后應(yīng)用新的封口膜或石蠟油進(jìn)行封口，單獨(dú)的反應(yīng)管采用自帶管蓋封口，打開(kāi)管蓋后直接將活動(dòng)插片揭下丟棄，重新蓋好即可。
[0010]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0011]1、本發(fā)明中設(shè)計(jì)出帶有活動(dòng)插片的活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管，首次實(shí)現(xiàn)了 PCR反應(yīng)體系中除DNA模板外所有組份的預(yù)配制和混合貯存，將研究人員的工作量減少到最小，提高大規(guī)模鑒定的工作效率。
[0012]2、在活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管中直接添加最適配比的各反應(yīng)組份，提高了反應(yīng)的穩(wěn)定性和反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確性。
[0013]3、以本發(fā)明中活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管的應(yīng)用為基礎(chǔ)的系列試劑盒為大量分子標(biāo)記從理論知識(shí)到實(shí)物商品的轉(zhuǎn)化提供了一條有效途徑。
[0014]4、以本發(fā)明中活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管的應(yīng)用為基礎(chǔ)的酶切反應(yīng)試劑盒為類(lèi)似酶類(lèi)的銷(xiāo)售提供了一種全新的、更加符合用戶(hù)使用需求的銷(xiāo)售方式。
[0015]5、利用本發(fā)明中的活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管可以根據(jù)不同用戶(hù)需求進(jìn)行靈活的設(shè)計(jì)定制，可以將引物訂購(gòu)與反應(yīng)試劑的銷(xiāo)售合二為一，改變傳統(tǒng)的引物與反應(yīng)試劑的銷(xiāo)售方式，使之更加符合顧客實(shí)際需求，更加便捷和高效。
【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為核酸反應(yīng)管主體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017]圖2為活動(dòng)插片的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖3為活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管的整體結(jié)構(gòu)示意圖；
[0019]圖4為活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管的使用步驟示意圖；
[0020]圖中，1-核酸反應(yīng)管，2-U型凹槽，3-接頭，4-折痕，5-活動(dòng)插片。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的說(shuō)明，但并不局限于此，凡是對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍中。
[0022]【具體實(shí)施方式】一:如圖1-3所示，本實(shí)施方式提供的活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管由核酸反應(yīng)管I和活動(dòng)插片5兩部分構(gòu)成，所述核酸反應(yīng)管I的管壁內(nèi)側(cè)設(shè)置有U型凹槽2，活動(dòng)插片5插于U型凹槽2內(nèi)，所述活動(dòng)插片的頂端留有接頭3，接頭3根部設(shè)有折痕4，折后接頭與管口平面平行。
[0023]如圖4所示，活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管的使用步驟如下:
[0024]步驟1:將活動(dòng)插片延管壁內(nèi)側(cè)U型凹槽完全插入管體。
[0025]步驟2:在隔間A和隔間B內(nèi)加入不同反應(yīng)組份，將活動(dòng)插片頂端接頭延折痕折至與插片平面呈一定角度(介于0°至90°之間均可，確保接頭受到管蓋壓力時(shí)可以沿折痕彎曲，避免接頭和插片垂直受力發(fā)生變形)，蓋好管蓋(此時(shí)接頭與管口平面平行，且上表面與管蓋黏合)。
[0026](以上為試劑盒商品制備階段)
[0027]步驟3:使用時(shí)正常打開(kāi)管蓋，活動(dòng)插片被順勢(shì)抽出，管內(nèi)組份發(fā)生混合。
[0028]步驟4:將粘在管蓋上的活動(dòng)插片揭下丟棄，繼續(xù)試驗(yàn)。
[0029](以上為試劑盒商品使用階段)
[0030]注:96孔板以整張貼膜形式代替管蓋，但插片的插入與抽出與此單獨(dú)反應(yīng)管作用方式相同。
[0031]【具體實(shí)施方式】二:本實(shí)施方式提供了一種大規(guī)模PCR分子標(biāo)記鑒定便捷操作試劑合
ΙΤΓΤ.0
[0032]大規(guī)模分子標(biāo)記鑒定便捷操作系列試劑盒是一種可以有效簡(jiǎn)化分子標(biāo)記鑒定試驗(yàn)操作、提高反應(yīng)體系穩(wěn)定性，從而高效、快捷地進(jìn)行大規(guī)模分子標(biāo)記鑒定的試劑盒。根據(jù)不同的目的基因選擇相應(yīng)的標(biāo)記引物，將引物稀釋液和PCR預(yù)混液按一定配比分裝于活動(dòng)隔間式核酸反應(yīng)管內(nèi)的兩個(gè)隔間中，然后進(jìn)行封口，一般此類(lèi)鑒定多采用96孔板。研究人員可根據(jù)需要購(gòu)買(mǎi)或定制用于鑒定某一基因的該系列試劑盒，然后根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)將待檢DNA加入管內(nèi)即可進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)，免去了引物查找、訂購(gòu)，反應(yīng)體系摸索，反復(fù)加樣等繁瑣的步驟，降低了大量人為操作可能帶來(lái)的誤差。
[0033]以番茄分子標(biāo)記輔助育種系列-12基因鑒定試劑盒為例:
[0034]本系列試劑盒專(zhuān)為番茄分子標(biāo)記輔助育種設(shè)計(jì)，可以減少大規(guī)模種質(zhì)鑒定的工作量，提高鑒定的準(zhǔn)確性，而且由于引物