微生物除臭復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及微生物技術(shù)處理領(lǐng)域，具體而言，設(shè)及一種微生物除臭復(fù)合菌劑及其 制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們生活水平的提高及城市化進(jìn)程的不斷加速，室內(nèi)外環(huán) 境污染問題日益突出，城鄉(xiāng)居民對(duì)生活環(huán)境的標(biāo)準(zhǔn)越來越高，對(duì)空氣質(zhì)量的要求越來越重 視。惡臭作為環(huán)境公害之一，直接影響人們的生活質(zhì)量，甚至危害到人們的健康，已越來越 受到人們的關(guān)注。規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖場(chǎng)是惡臭物質(zhì)產(chǎn)生的重要來源，大量的畜禽糞便及生活 垃圾得不到充分有效利用，既浪費(fèi)資源又污染環(huán)境，特別是夏秋之季，養(yǎng)殖場(chǎng)周圍大多是臭 氣熏天，蚊蛹肆虐。養(yǎng)殖場(chǎng)所產(chǎn)生的惡臭含有多種有毒有害成分，其中氨氣、硫化氨、硫醇和 甲硫醇等是主要有害氣體成分，惡臭的排放會(huì)對(duì)周邊環(huán)境造成嚴(yán)重污染，人們長(zhǎng)期吸入后 對(duì)身體健康造成嚴(yán)重傷害。養(yǎng)殖業(yè)所產(chǎn)生的惡臭已經(jīng)成為一大公害，引起了各方面的關(guān)注， 因此，實(shí)施惡臭污染控制和管理，開展脫除惡臭氣體的研究具有重要意義。
[0003] 近年來國(guó)內(nèi)市場(chǎng)對(duì)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)除臭劑的需求不斷增長(zhǎng)，市場(chǎng)潛力巨大，但是目前 國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的除臭劑產(chǎn)品良莽不齊、質(zhì)量不盡人意難W得到相關(guān)企業(yè)及單位的認(rèn)可。其中，利 用微生物除臭是廣泛應(yīng)用的一種經(jīng)濟(jì)高效環(huán)保的方式。微生物除臭的實(shí)質(zhì)是運(yùn)用特定功能 的微生物將一些臭味物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為無臭的物質(zhì)或者是抑制臭味物質(zhì)的產(chǎn)生從而達(dá)到去 除臭味的目的。生物除臭由于具有無污染、持續(xù)性強(qiáng)等特點(diǎn)，己成為環(huán)境工作者研究的熱點(diǎn) 之一。近年來國(guó)內(nèi)研究者大部分集中在單一菌株的篩選，而將多種不同功能的微生物組成 微生物菌劑應(yīng)用于實(shí)踐中還很少有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種微生物除臭復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用，該微生物 除臭復(fù)合菌劑對(duì)氨氣和硫化氨具有較好的去除效果，且對(duì)環(huán)境無污染。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了 一種微生物除臭復(fù)合 菌劑，包括：乳酸菌 4. 8X1〇8-10Xl〇Scfu/mL;毛霉菌 2X1〇6-5Xl〇6cfu/mL;酵母 菌 3. 9X107-7. 2Xl〇7cfu/mL;巨大芽胞桿菌 3X1〇6-1Xl〇7cfu/mL;枯草芽胞桿菌 7Xl〇6-lXl〇7cfu/mL;總菌數(shù)為 5. 31Xl〇S-10. 97Xl〇Scfu/mL。
[0006] 進(jìn)一步地，該微生物除臭復(fù)合菌劑包括：乳酸菌4. 8Xl〇Sc化/mL;毛霉菌 2X106c化/mL;酵母菌3. 9X107c化/mL;巨大芽胞桿菌3X106c化/mL;枯草芽胞桿菌 7Xl〇6cfu/mL;總菌數(shù)為 5. 31Xl〇Scfu/mL。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，還提供了一種微生物除臭復(fù)合菌劑的制備方法，包括如 下步驟：1)固體斜面培養(yǎng)：分別將巨大芽胞桿菌和枯草芽胞桿菌接種于牛肉膏蛋白腺固體 培養(yǎng)基中，毛霉菌和酵母菌接種于上豆固體培養(yǎng)基中，乳酸菌接種于MRS固體培養(yǎng)基中，恒 溫培養(yǎng)W使菌株活化；2) -級(jí)種子培養(yǎng)：將經(jīng)步驟1)中活化后的菌株分別相應(yīng)地接種于牛 肉膏蛋白瓊脂腺液體培養(yǎng)基、±豆液體培養(yǎng)基和MRS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得一級(jí)種子；3) 二級(jí)種子培養(yǎng)：將步驟2)所得一級(jí)種子繼續(xù)接種培養(yǎng)，即得二級(jí)種子液；4)將步驟3)中獲 得的巨大芽胞桿菌種子液和枯草芽胞桿菌種子液混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)，獲得菌劑A;將步驟 3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子液和酵母菌種子液混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)，獲得菌劑B; 5)將步驟4)中獲得的菌劑A和菌劑B混合，得到微生物除臭復(fù)合菌劑。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟1)中菌株活化的條件為：28~32°C下恒溫培養(yǎng)4-6天；優(yōu)選30°C 下恒溫培養(yǎng)1-2天；可選地，牛肉膏蛋白腺固體培養(yǎng)基的配方為：牛肉膏5g，蛋白腺lOg， 化Cl5g、蒸饋水1000血和固體加瓊脂20g，抑值為7. 0-7. 2 ;±豆固體培養(yǎng)基的配方為： ±豆200g、葡萄糖20g、蒸饋水1000血和固體加瓊脂20g，抑值為7. 0-7. 2 ;MRS固體培養(yǎng) 基的配方為蛋白腺lOg、牛肉膏l(xiāng)Og、酵母膏5g、葡萄糖20g、吐溫801. 0血、憐酸氨二鐘2g、 醋酸鋼5g、巧樣酸二錠2g、屯水硫酸儀0. 58g、四水硫酸儘0. 25g和蒸饋水lOOOmU抑值為 6. 2-6. 6。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟2)中的培養(yǎng)條件為：25~35°C下，攬拌速度為160~20化pm下培 養(yǎng)2~3天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度0D600值達(dá)到0. 6~0. 8時(shí)停止培養(yǎng)；優(yōu)選地，步驟2)中的 培養(yǎng)條件為：30°C和攬拌速率為18化pm下培養(yǎng)2天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度0D600值達(dá)到0. 7 時(shí)停止培養(yǎng)。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟3)中一級(jí)種子均W3~7%的接種量分別接種，于25~35°C且攬 拌速率為150~20化pm下培養(yǎng)2~3天；優(yōu)選W5%的接種量分別接種，于30°C且攬拌速 率為18化pm下培養(yǎng)2天。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟4)中制備菌劑A的步驟包括：將步驟3)中制備的巨大芽胞桿菌種 子液和枯草芽胞桿菌種子液均W10~20%的接種量接種于發(fā)酵罐中，并在25~35°C、攬 拌速率為110~13化pm且通氣量為1. 0~1. 5vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)；優(yōu)選地，將步驟3) 中制備的巨大芽胞桿菌種子液和枯草芽胞桿菌種子液均W15%的接種量接種，并在30°C、 攬拌速率為12化pm且通氣量為1. 58vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)；
[0012] 制備所述菌劑B的步驟包括：將所述步驟3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子 液和酵母菌種子液W10~20%的接種量接種于發(fā)酵罐中混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)，并于25~ 35°C、攬拌速率為110~13化pm且通氣量為0. 8~1. 4vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)；優(yōu)選地， 將步驟3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子液和酵母菌種子液W15%的接種量接種于 發(fā)酵罐中，并在30°C、攬拌速率為12化pm且通氣量為l.Ovvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)。
[0013] 進(jìn)一步地，按照質(zhì)量百分含量計(jì)，混合發(fā)酵時(shí)的發(fā)酵培養(yǎng)基由2. 5%糖蜜、0. 12% 玉米粉、0. 33%硫酸錠、0. 07%憐酸二氨鐘、0. 05%硫酸儀、0. 05%氯化巧及余量的水組成。
[0014] 進(jìn)一步地，在步驟4)中，將菌劑A和菌劑BW體積比1:2~2:1混合；優(yōu)選將菌劑 A和菌劑BW體積比1:1混合。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明的又一方面，還提供了上述任一種的微生物除臭復(fù)合菌劑在畜禽養(yǎng)殖 場(chǎng)和垃圾填埋場(chǎng)中的應(yīng)用；優(yōu)選地，應(yīng)用的方法為將微生物除臭復(fù)合菌劑用水稀釋100倍， 按照0.化g/m2對(duì)待除臭區(qū)域進(jìn)行噴灑。
[0016] 本發(fā)明的有益效果：
[0017] 1)本發(fā)明的微生物除臭復(fù)合菌劑由多種微生物菌種經(jīng)過發(fā)酵制成，屬于多菌型， 并且由于菌群組成、代謝類型、呼吸類型及作用功能多樣性的特點(diǎn)，使得該微生物除臭復(fù)合 菌劑能夠在糞污中良好生長(zhǎng)，迅速穩(wěn)定占據(jù)有利生態(tài)位，有效地抑制了產(chǎn)生惡臭物質(zhì)的腐 敗菌生長(zhǎng)繁殖或?qū)撼粑镔|(zhì)直接降解，實(shí)現(xiàn)了惡臭原位源頭控制，并且對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)， 應(yīng)用范圍廣，除臭效果比較持久。
[0018] 2)該微生物除臭復(fù)合菌劑由乳酸菌、毛霉菌、酵母菌、巨大芽胞桿菌和枯草芽胞桿 菌等有益微生物構(gòu)成，由于協(xié)調(diào)作用，有益菌在糞污中能夠進(jìn)行強(qiáng)有力的生長(zhǎng)繁殖，有效地 改善了糞便生態(tài)環(huán)境，減少了糞便中抗生素的使用。
[0019] 根據(jù)下文對(duì)本發(fā)明具體實(shí)施例的詳細(xì)描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)更加明了本發(fā)明 的上述W及其他目的、優(yōu)點(diǎn)和特征。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)養(yǎng)殖業(yè)或者垃圾場(chǎng)所產(chǎn)生的惡臭處理效果不佳的問題， 本發(fā)明提供了一種微生物除臭復(fù)合菌劑，包括：乳酸菌4.8Xl〇S-10Xl〇Sc化/mL;毛霉菌 2X1〇6-5Xl〇6cfu/mL;酵母菌 3. 9X107-7. 2Xl〇7cfu/mL;巨大芽胞桿菌 3X1〇6-1XlO^cfu/ 血；枯草芽胞桿菌 7X1〇6-1XlO^cfu/血；總菌數(shù)為 5. 31Xl〇S-10. 97Xl〇Scfu/血。
[0021] 其中，乳酸菌J2化actobacillus)發(fā)酵產(chǎn)酸，能夠抑制病原微生物的生長(zhǎng)。毛霉菌 J3(Mucor)能糖化淀粉并能生成少量乙醇，產(chǎn)生蛋白酶、脂肪酶、果膠酶、凝乳酶等。酵母菌 J6 (Saccharomycetes)是畢赤酵母菌，可W分泌激素等生理活性物質(zhì)，為有益微生物繁殖提 供所需基質(zhì)，在分解惡臭中起到增強(qiáng)功效。巨大芽胞桿菌LS-UBacillus megetarium)可 W產(chǎn)生多種酶，抑制腐敗微生物如大腸桿菌，黃色葡萄球菌等的生長(zhǎng)，減少臭味的產(chǎn)生?？?草芽胞桿菌LS-2度acillus subtilis)可W產(chǎn)生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌膚 等活性物質(zhì)，對(duì)腐敗微生物具有抑制作用