[004引 對(duì)比例1-2
[0046] 其制備方法與實(shí)施例1相同，不同之處在于各菌株的配比，具體見表1。
[0047]表1
[0048]
[0049]
[0050] 分別采用實(shí)施例1-3所制備的微生物除臭復(fù)合菌劑對(duì)新鮮雞糞的除臭效果進(jìn)行 測(cè)定，具體操作如下：
[0051] 將50g拌有25%銀末的風(fēng)干雞糞放入1000血燒杯中，調(diào)節(jié)含水量到50%左右， 12rC下消毒30min，均按10%接種量分別接入實(shí)施例和對(duì)比例中培養(yǎng)好的除臭復(fù)合菌劑， 并充分混勻，分別將盛有20mL稀硫酸溶液的50mL小燒杯和裝有20mL乙酸鋒-乙酸鋼溶液 的50mL小燒杯置于杯中。用雙層塑料薄膜密封后，置于30°C恒溫室中發(fā)酵培養(yǎng)。每個(gè)處理 重復(fù)3次，培養(yǎng)過程中每隔3天，取出小燒杯檢測(cè)氨氣和硫化氨的釋放量。
[005引結(jié)果表明，本發(fā)明的微生物除臭復(fù)合菌劑對(duì)畑3的去除率達(dá)到63. 4~73. 7%，對(duì) 的去除率達(dá)到68. 95%。
[0053] 為了進(jìn)一步說明本發(fā)明的微生物除臭復(fù)合菌劑的有益效果，下面分別采用實(shí)施例 1-3和對(duì)比例1-2中所制備的微生物除臭復(fù)合菌劑對(duì)畜禽養(yǎng)殖場的除臭效果進(jìn)行測(cè)定，具 體操作如下：
[0054] 將實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-2中得到的微生物除臭復(fù)合菌劑分別兌水稀釋100倍， 分別按0.IKg/m2對(duì)相同條件下的畜舍分別進(jìn)行噴灑，本次試驗(yàn)選取的北京昌平區(qū)興昌養(yǎng)殖 場，選取的畜禽養(yǎng)殖場圈舍面積為1200m2,全程密閉不透風(fēng)。噴灑頻率為1次/天，上午9 : 00 〇
[0055] 采用五點(diǎn)法（畜舍四個(gè)角落及中屯、采樣）采樣。采樣工具有畑3、HzS吸收儀和大 氣采樣器，記錄采樣時(shí)溫度、大氣壓和濕度。樣品送往北京是畜禽養(yǎng)殖環(huán)境監(jiān)測(cè)中屯、測(cè)定， 分別用棚酸吸收-鹽酸滴定法和鋒氨絡(luò)鹽吸收-比色法測(cè)定NH3和Η2S含量。具體結(jié)果詳 見表2。
[0056] 表 2
[0057]
[0058] 從表2中的數(shù)據(jù)可W看出，當(dāng)采用本發(fā)明的微生物除臭復(fù)合菌劑對(duì)畜禽養(yǎng)殖場 進(jìn)行噴灑除臭后，其臭氣強(qiáng)度、氨氣濃度、硫化氨濃度W及TV0C濃度均比空白對(duì)照組明 顯降低，其中臭氣的強(qiáng)度降低高達(dá)76. 3%，Ν&的去除率高達(dá)69. 20%，HzS的去除率達(dá)到 68. 10%，TV0C濃度降低率高達(dá)67. 6%。具體分析，由于本發(fā)明的微生物除臭復(fù)合菌劑由多 種微生物菌型經(jīng)過發(fā)酵制成，由于菌群組成、代謝類型、呼吸類型及作用功能多樣的特點(diǎn)W 及各菌株之間的協(xié)同作用，使得微生物菌劑能夠在糞污中良好生長，迅速穩(wěn)定占據(jù)有利生 態(tài)位，從而有效地抑制產(chǎn)生惡臭物質(zhì)的腐敗菌生長繁殖或?qū)撼粑镔|(zhì)直接降解，實(shí)現(xiàn)了惡 臭原位源頭控制，有效地改善了畜禽養(yǎng)殖場的環(huán)境，利于養(yǎng)殖效益提高。
[0059] 至此，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，雖然本文已詳盡示出和描述了本發(fā)明的多個(gè)示 例性實(shí)施例，但是，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的情況下，仍可根據(jù)本發(fā)明公開的內(nèi)容直接 確定或推導(dǎo)出符合本發(fā)明原理的許多其他變型或修改。因此，本發(fā)明的范圍應(yīng)被理解和認(rèn) 定為覆蓋了所有運(yùn)些其他變型或修改。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種微生物除臭復(fù)合菌劑，其特征在于，包括：2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的微生物除臭復(fù)合菌劑，其特征在于，包括：3. -種微生物除臭復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 固體斜面培養(yǎng)：分別將巨大芽胞桿菌和枯草芽胞桿菌接種于牛肉膏蛋白胨固體培 養(yǎng)基中，毛霉菌和酵母菌接種于土豆固體培養(yǎng)基中，乳酸菌接種于MRS固體培養(yǎng)基中，恒溫 培養(yǎng)以使菌株活化； 2) -級(jí)種子培養(yǎng)：將經(jīng)所述步驟1)中活化后的菌株分別相應(yīng)地接種于牛肉膏蛋白瓊 脂胨液體培養(yǎng)基、土S液體培養(yǎng)基和MRS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得一級(jí)種子； 3) 二級(jí)種子培養(yǎng)：將所述步驟2)中制備的所述一級(jí)種子繼續(xù)接種培養(yǎng)，即得二級(jí)種子 液； 4) 將所述步驟3)中獲得的巨大芽胞桿菌種子液和枯草芽胞桿菌種子液混合發(fā)酵有氧 培養(yǎng)，獲得菌劑A;將所述步驟3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子液和酵母菌種子液混 合發(fā)酵有氧培養(yǎng)，獲得菌劑B; 5) 將所述步驟4)中獲得的所述菌劑A和所述菌劑B混合，得到所述微生物除臭復(fù)合菌 劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于， 所述步驟1)中菌株活化的條件為：28~32°C下恒溫培養(yǎng)4-6天；優(yōu)選30°C下恒溫培 養(yǎng)1-2天； 可選地，所述牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的配方為：牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g、 蒸餾水1000mL和固體加瓊脂20g，pH值為7. 0-7. 2 ;所述土豆固體培養(yǎng)基的配方為：土豆 200g、葡萄糖20g、蒸餾水1000mL和固體加瓊脂20g，pH值為7. 0-7. 2 ;所述MRS固體培養(yǎng) 基的配方為蛋白胨l〇g、牛肉膏l(xiāng)〇g、酵母膏5g、葡萄糖20g、吐溫80 1.OmL、磷酸氫二鉀2g、 醋酸鈉5g、檸檬酸二銨2g、七水硫酸鎂0. 58g、四水硫酸錳0. 25g和蒸餾水1000mL，pH值為 6. 2~6. 6〇5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于， 所述步驟2)中的培養(yǎng)條件為：25~35°C下，攪拌速度為160~200rpm下培養(yǎng)2~3 天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度0D600值達(dá)到0. 6~0. 8時(shí)停止培養(yǎng)； 優(yōu)選地，所述步驟2)中的培養(yǎng)條件為：30°C和攪拌速率為180rpm下培養(yǎng)2天，當(dāng)液體 培養(yǎng)菌密度0D600值達(dá)到0. 7時(shí)停止培養(yǎng)。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于， 所述步驟3)中所述一級(jí)種子均以3~7%的接種量分別接種，于25~35°C且攪拌速 率為150~200rpm下培養(yǎng)2~3天； 優(yōu)選以5%的接種量分別接種，于30°C且攪拌速率為180rpm下培養(yǎng)2天。7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于， 所述步驟4)中制備所述菌劑A的步驟包括：將步驟3)中制備的巨大芽胞桿菌種子液 和枯草芽胞桿菌種子液均以10~20 %的接種量接種于發(fā)酵罐中，并在25~35 °C、攪拌速 率為110~130rpm且通氣量為1. 0~1. 5vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)； 優(yōu)選地，將步驟3)中制備的巨大芽胞桿菌種子液和枯草芽胞桿菌種子液均以15%的 接種量接種，并在30°C、攪拌速率為120rpm且通氣量為1. 5vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)； 制備所述菌劑B的步驟包括：將所述步驟3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子液和 酵母菌種子液以10~20%的接種量接種于發(fā)酵罐中混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)，并于25~35°C、 攪拌速率為110~130rpm且通氣量為0. 8~1. 4vvm下混合發(fā)酵有氧培養(yǎng)； 優(yōu)選地，將所述步驟3)中獲得的乳酸菌種子液、毛霉菌種子液和酵母菌種子液以15% 的接種量接種于發(fā)酵罐中，并在30°C、攪拌速率為120rpm且通氣量為1.Ovvm下混合發(fā)酵有 氧培養(yǎng)。8. 根據(jù)權(quán)利要求3-7中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，按照質(zhì)量百分含量計(jì)，所 述混合發(fā)酵時(shí)的發(fā)酵培養(yǎng)基由2. 5%糖蜜、0. 12%玉米粉、0. 33%硫酸銨、0. 07%磷酸二氫 鉀、0. 05%硫酸鎂、0. 05%氯化鈣及余量的水組成。9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟4)中，將所述菌劑A和所 述菌劑B按照體積比1:2~2:1混合；優(yōu)選地，將所述菌劑A和所述菌劑B按照體積比1:1 混合。10. -種權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的微生物除臭復(fù)合菌劑在畜禽養(yǎng)殖場或垃圾填 埋場中的應(yīng)用；優(yōu)選地，應(yīng)用的方法為將所述微生物除臭復(fù)合菌劑用水稀釋100倍，按照 0.lkg/m2對(duì)待除臭區(qū)域進(jìn)行噴灑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種微生物除臭復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用。該微生物除臭復(fù)合菌劑包括:乳酸菌4.8-10×108cfu/mL；毛霉菌2-5×106cfu/mL；酵母菌3.9-7.2×107cfu/ml；巨大芽胞桿菌3-10×106cfu/mL；枯草芽胞桿菌7-10×106cfu/mL；總菌數(shù)為5.31-10.97×108cfu/mL。該臭復(fù)合菌劑由多種微生物菌種經(jīng)過發(fā)酵制成，由于菌群組成、代謝類型、呼吸類型及作用功能多樣性特點(diǎn)，使得該復(fù)合菌劑能夠在糞污中良好生長，并迅速穩(wěn)定占據(jù)有利生態(tài)位，從而有效地抑制了產(chǎn)生惡臭物質(zhì)的腐敗菌生長繁殖或?qū)撼粑镔|(zhì)直接降解，實(shí)現(xiàn)了惡臭原位源頭控制，達(dá)到除臭效果。
【IPC分類】C12R1/11, B01D53/84, C12N1/16, C12R1/785, C12R1/125, C12R1/01, C12N1/14, C12N1/20
【公開號(hào)】CN105255756
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510633763
【發(fā)明人】張加勇, 吳迪梅, 張麗麗, 張卓毅, 羅一鳴, 劉佳, 楊軍, 任莉, 彭生平, 王有月, 劉薇
【申請(qǐng)人】北京市畜牧業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)站, 北京沃土天地生物科技有限公司
【公開日】2016年1月20日
【申請(qǐng)日】2015年9月29日