，拆出層析柱A中娃 膠，保留層析柱B中填料，重新裝填層析柱A，采用同樣方法將剩余的一半浸膏拌樣，上柱， 洗脫，收集合并巨大戟醇洗脫部位；
[0080] 將上述巨大戟醇部位減壓濃縮后，置冰箱-5C條件下24小時(shí)，析出，過(guò)濾，得到巨 大戟醇晶體45g，經(jīng)高效液相檢測(cè)純度達(dá)到99. 9%W上。
[0081] 實(shí)施例4巨大戟醇提取物的分離純化方法
[008引取千金子300kg，碼碎，采用體積百分比濃度為95%的己醇回流提取3次。第一次 加入3000L回流提取2小時(shí)，第二次加入2400L回流提取1. 5小時(shí)，第H次加入2400L回流 提取1. 5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至浸膏狀；
[0083] 上述提取浸膏加甲醇稀釋至15化，攬勻使充分溶解，然后加入6kg氨氧化鋼，攬拌 水解16小時(shí)，然后加磯酸調(diào)節(jié)抑至7W終止水解，水解液減壓濃縮至浸膏狀；
[0084] 選取同等規(guī)格的層析柱A和B(23X150cm)，按圖1所示連接，先調(diào)節(jié)H通閥，使層 析柱A和B斷開(kāi)連接，層析柱B預(yù)裝20kg硅膠，并用己酸己醋洗脫平衡，層析柱A預(yù)裝20kg 硅膠，并用石油離洗脫平衡，取1/3體積的上述浸膏加石油離稀釋1. 5倍使溶解，將溶解好 的樣品上樣于層析柱A中，采用4個(gè)柱體積的石油離洗脫W除去非極性雜質(zhì)；然后，調(diào)節(jié)H 通閥，使層析柱A和B串聯(lián)，換5個(gè)柱體積的己酸己醋洗脫；待巨大戟醇全部洗脫下來(lái)，拆出 層析柱A中硅膠，保留層析柱B中填料，重新裝填層析柱A，采用同樣方法將剩余的浸膏分2 次稀釋溶解，上樣，洗脫，收集合并巨大戟醇洗脫部位；
[0085] 將上述巨大戟醇部位減壓濃縮后，置冰箱-5°C條件下24小時(shí)，析出，過(guò)濾，得到巨 大戟醇晶體72g，經(jīng)高效液相檢測(cè)純度達(dá)到99. 9%W上。
[0086] 實(shí)施例5巨大戟醇提取物的分離純化方法
[0087] 取乳漿大戟300kg，切段，采用體積百分比濃度為95%的己醇回流提取3次。第一 次加入3000L回流提取2小時(shí)，第二次加入2400L回流提取1. 5小時(shí)，第H次加入2400L回 流提取1. 5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至浸膏狀；
[0088] 上述提取浸膏加甲醇稀釋至15化，攬勻使充分溶解，然后加入6kg氨氧化鋼，攬拌 水解16小時(shí)，然后加磯酸調(diào)節(jié)抑至7W終止水解，水解液減壓濃縮至浸膏狀；
[0089] 選取同等規(guī)格的層析柱A和B(23X150cm)，按圖1所示連接，先調(diào)節(jié)H通閥，使層 析柱A和B斷開(kāi)連接，層析柱B預(yù)裝20kg硅膠，并用己酸己醋洗脫平衡，層析柱A預(yù)裝20kg 硅膠，并用石油離洗脫平衡，取1/3體積的上述浸膏加石油離稀釋1. 5倍使溶解，將溶解好 的樣品上樣于層析柱A中，采用4個(gè)柱體積的石油離洗脫W除去非極性雜質(zhì)；然后，調(diào)節(jié)H 通閥，使層析柱A和B串聯(lián)，換5個(gè)柱體積的己酸己醋洗脫；待巨大戟醇全部洗脫下來(lái)，拆出 層析柱A中硅膠，保留層析柱B中填料，重新裝填層析柱A，采用同樣方法將剩余的浸膏分2 次稀釋溶解，上樣，洗脫，收集合并巨大戟醇洗脫部位；
[0090] 將上述巨大戟醇部位減壓濃縮后，置冰箱-5C條件下24小時(shí)，析出，過(guò)濾，得到巨 大戟醇晶體70g，經(jīng)高效液相檢測(cè)純度達(dá)到99. 9%W上。
[0091] 實(shí)施例6巨大戟醇提取物的分離純化方法
[0092] 取南歐大戟300kg，切段，采用體積百分比濃度為95%的己醇回流提取3次。第一 次加入3000L回流提取2小時(shí)，第二次加入2400L回流提取1. 5小時(shí)，第H次加入2400L回 流提取1. 5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至浸膏狀；
[0093] 上述提取浸膏加甲醇稀釋至15化，攬勻使充分溶解，然后加入6kg氨氧化鋼，攬拌 水解16小時(shí)，然后加磯酸調(diào)節(jié)pH至7W終止水解，水解液減壓濃縮至浸膏狀；
[0094]選取同等規(guī)格的層析柱A和B(23X150cm)，按圖1所示連接，先調(diào)節(jié)H通閥，使層 析柱A和B斷開(kāi)連接，層析柱B預(yù)裝20kg硅膠，并用己酸己醋洗脫平衡，層析柱A預(yù)裝20kg 硅膠，并用石油離洗脫平衡，取1/3體積的上述浸膏加石油離稀釋1. 5倍使溶解，將溶解好 的樣品上樣于層析柱A中，采用4個(gè)柱體積的石油離洗脫W除去非極性雜質(zhì)；然后，調(diào)節(jié)H 通閥，使層析柱A和B串聯(lián)，換5個(gè)柱體積的己酸己醋洗脫；待巨大戟醇全部洗脫下來(lái)，拆出 層析柱A中硅膠，保留層析柱B中填料，重新裝填層析柱A，采用同樣方法將剩余的浸膏分2 次稀釋溶解，上樣，洗脫，收集合并巨大戟醇洗脫部位；
[0095] 將上述巨大戟醇部位減壓濃縮后，置冰箱-5C條件下24小時(shí)，析出，過(guò)濾，得到巨 大戟醇晶體76g，經(jīng)高效液相檢測(cè)純度達(dá)到99. 9%W上。
[0096] 上述原料甘遂、千金子、乳漿大戟和南歐大戟均為成都市荷花池藥材市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)所 得。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于：包括如下步驟： a、 將巨大戟醇提取物加堿水解后，加酸中和，然后濃縮得到膏狀物； b、 將步驟a得到的膏狀物在硅膠柱層析裝置中進(jìn)行分離純化，所述硅膠柱層析裝置包 括層析柱A和層析柱B，層析柱A和層析柱B之間采用三通閥進(jìn)行連接；硅膠柱層析具體操 作如下：調(diào)節(jié)三通閥，將層析柱A和層析柱B斷開(kāi)連接，在層析柱A中上樣，然后，層析柱A 采用石油醚洗脫除雜，調(diào)節(jié)三通閥，使層析柱A和層析柱B連接，向?qū)游鲋鵄中加入乙酸乙 酯洗脫，收集巨大戟醇-乙酸乙酯混合液； c、 將步驟b得到的巨大戟醇-乙酸乙酯混合液減壓濃縮后，靜置析出，過(guò)濾得到巨大戟 醇。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于：步驟a中所 述巨大戟醇提取物為大戟科大戟屬植物藥材采用提取溶劑提取得到；所述提取溶劑為甲 醇、乙醇、丙酮、乙醚或氯仿； 優(yōu)選步驟a中所述巨大戟醇提取物的制備方法如下：取大戟科大戟屬植物藥材，粉碎 或切段，按料液比1:5~20w/v加入提取溶劑進(jìn)行回流提取，提取1~4次，每次0. 5~2 小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮得巨大戟醇提取物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于：所述大戟科 大戟屬植物為甘遂、乳漿大戟、千金子或南歐大戟。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 步驟a所述堿水解、酸中和的操作如下：取巨大戟醇提取物，加入甲醇或無(wú)水乙醇稀釋?zhuān)?醇或無(wú)水乙醇的體積為巨大戟醇提取物體積的〇. 5~2倍，加堿水解0. 5~24小時(shí)，每升 混合溶液中堿的含量為5~40g，水解完畢，加酸調(diào)節(jié)pH至7得到水解液，然后將水解液濃 縮得膏狀物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 步驟a中所述堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉或乙醇鈉；所述酸為磷酸、鹽酸、醋酸或甲 酸。6. 根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 步驟b中所述硅膠柱層析操作為： 調(diào)節(jié)三通閥，將層析柱A和層析柱B斷開(kāi)連接，裝填層析柱A和層析柱B，層析柱A采用 石油醚洗脫平衡至無(wú)氣泡，層析柱B采用乙酸乙酯洗脫平衡至無(wú)氣泡，然后上樣，樣品裝入 層析柱A，然后采用石油醚洗脫；洗脫完畢，調(diào)節(jié)三通閥，使層析柱A和層析柱B連接，向?qū)?析柱A中加入乙酸乙酯洗脫，得到巨大戟醇-乙酸乙酯混合液。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 步驟b中各洗脫劑的洗脫速度為每小時(shí)0. 5~5個(gè)柱體積。8. 根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 所述步驟b完成后，拆出層析柱A中硅膠，保留層析柱B中硅膠，重新裝填層析柱A，然后取 新的一批步驟a得到的膏狀物按照步驟b的操作進(jìn)行硅膠柱層析分離純化，進(jìn)行連續(xù)操作。9. 根據(jù)權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的巨大戟醇提取物的分離純化方法，其特征在于： 步驟b中所述硅膠柱層析裝置中層析柱A連接泵，濕法上樣、洗脫溶劑石油醚或乙酸乙酯均 采用泵送加入。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及巨大戟醇提取物的分離純化方法，屬于中藥提取分離領(lǐng)域。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供巨大戟醇提取物的分離純化方法。本發(fā)明巨大戟醇提取物的分離純化方法，包括如下步驟：a、將巨大戟醇提取物加堿水解后，加酸中和后，濃縮得到膏狀物；b、將步驟a得到的膏狀物進(jìn)行硅膠柱層析分離純化；c、將步驟b收集得到的巨大戟醇-乙酸乙酯溶液，減壓濃縮，靜置析出，過(guò)濾得巨大戟醇。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，避免了多步萃取操作，收率得到提高，同時(shí)實(shí)現(xiàn)了規(guī)?；B續(xù)生產(chǎn)。并且層析柱B中的硅膠可以重復(fù)使用2次以上，一定程度上減少了硅膠使用量和試劑消耗量，可大幅降低生產(chǎn)成本。
【IPC分類(lèi)】C07C45/78, C07C49/737
【公開(kāi)號(hào)】CN105272838
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410258025
【發(fā)明人】郭建龍, 鄺彬, 謝海峰, 胡云嶺, 冉波, 徐雷
【申請(qǐng)人】成都普瑞法科技開(kāi)發(fā)有限公司
【公開(kāi)日】2016年1月27日
【申請(qǐng)日】2014年6月11日