的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 5cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為1.5mL，接種三瓶，每瓶320?330mL，在34?35°C條件下活化培養(yǎng)7天，制得己酸菌種子液，己酸菌濃度為1.5?5.0X 10sCFU/mL，可以作為一級(jí)種子液使用；
(4)按體積8%的比例提取一級(jí)種子液，接種于二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基中，接種容器為若干5L三角瓶，二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基配方同上述培養(yǎng)基的配方，碳酸鈣、乙醇加入培養(yǎng)基，每個(gè)5L三角瓶需加入400mL的一級(jí)種子液，接種后需將沒有接種的培養(yǎng)基加入到已經(jīng)接種的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 7cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為3mL，將接種后的二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基在34?35°C的條件下培養(yǎng)11天，己酸菌濃度為1.5?2.5X 10sCFU/mL，可以作為二級(jí)種子液使用，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)接種；
(5)采用1000L酒缸作為培養(yǎng)容器，酒缸消毒采用酒精消毒方法，使用75%酒精2L，清洗缸體內(nèi)面反復(fù)2次，生產(chǎn)培養(yǎng)基配方如下:50斤大曲粉，2.5Kg碳酸媽，5Kg乙酸鈉，450Kg酒尾，400Kg黃水，150Kg三級(jí)酒；按體積5%的比例提取二級(jí)種子液，接種于生產(chǎn)培養(yǎng)基中；添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證生產(chǎn)培養(yǎng)基酒度控制在27?28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，添加的鹽類物質(zhì)溶解，最后加入二級(jí)種子液；溫度控制在34?35°C，培養(yǎng)30天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0X 107CFU/mL時(shí)，制作成混合型己酸菌培養(yǎng)液。
[0018]所述混合型己酸菌培養(yǎng)液的應(yīng)用方法，在濃香型酒醅入池前取20Kg混合型己酸菌培養(yǎng)液潑灑于窖池壁；濃香型酒醅入池時(shí)，根據(jù)酒醅酸度、水分情況取2Kg培養(yǎng)液潑灑于入窖酒醅中，隨著逐層入窖可逐層潑灑。
[0019]所述混合型己酸菌培養(yǎng)液的再生產(chǎn)方法，當(dāng)1000L培養(yǎng)液剩余400L時(shí)，可繼續(xù)補(bǔ)齊培養(yǎng)液，添加配方如下:15斤大曲粉，1.5Kg碳酸I丐，2Kg乙酸鈉，250Kg酒尾，200Kg黃水，lOOKg三級(jí)酒；添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證培養(yǎng)基酒度控制在23?24度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，使添加的鹽類物質(zhì)溶解，溫度控制在30?31°C，培養(yǎng)5天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0X 107CFU/mL時(shí)，得到混合型己酸菌培養(yǎng)液，可以應(yīng)用于生產(chǎn)。
[0020]實(shí)施例3，混合型己酸菌培養(yǎng)液的生產(chǎn)方法，包括如下步驟:
(1)培養(yǎng)基配方如下:1000mL水，乙酸鈉9g,硫酸鎂0.3g，硫酸錢0.9g，酵母膏2g，磷酸氫二鉀0.7g，2g碳酸鈣(單獨(dú)滅菌)，22mL乙醇(不滅菌單獨(dú)加入)；
(2)121°C度下，培養(yǎng)基滅菌20分鐘;
(3)將己酸菌(CK-jl)接種于培養(yǎng)基中，接種容器為若干250mL三角瓶，碳酸鈣、乙醇加入培養(yǎng)基，每個(gè)250mL三角瓶需加入18mL的己酸菌菌種，接種后需將沒有接種的培養(yǎng)基加入到已經(jīng)接種的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 5cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為1.3mL，接種三瓶，每瓶320mL，在34?35°C條件下活化培養(yǎng)6天，制得己酸菌種子液，己酸菌濃度為1.5?5.0X 10sCFU/mL，可以作為一級(jí)種子液使用；
(4)按體積6%的比例提取一級(jí)種子液，接種于二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基中，接種容器為若干5L三角瓶，二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基配方同上述培養(yǎng)基的配方，碳酸鈣、乙醇加入培養(yǎng)基，每個(gè)5L三角瓶需加入350mL的一級(jí)種子液，接種后需將沒有接種的培養(yǎng)基加入到已經(jīng)接種的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 5cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為3mL，將接種后的二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基在34?35°C的條件下培養(yǎng)12天，己酸菌濃度為1.5?2.5X 10sCFU/mL，可以作為二級(jí)種子液使用，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)接種；
(5)采用1000L酒缸作為培養(yǎng)容器，酒缸消毒采用酒精消毒方法，使用75%酒精2L，清洗缸體內(nèi)面反復(fù)2次，生產(chǎn)培養(yǎng)基配方如下:45斤大曲粉，2.2Kg碳酸鈣，4.5Kg乙酸鈉，400Kg酒尾，350Kg黃水，lOOKg三級(jí)酒；按體積4%的比例提取二級(jí)種子液，接種于生產(chǎn)培養(yǎng)基中；添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證生產(chǎn)培養(yǎng)基酒度控制在26?27度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，添加的鹽類物質(zhì)溶解，最后加入二級(jí)種子液；溫度控制在33?34°C，培養(yǎng)28天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0 X 107CFU/mL時(shí)，制作成混合型己酸菌培養(yǎng)液。
[0021]所述混合型己酸菌培養(yǎng)液的應(yīng)用方法，在濃香型酒醅入池前取15Kg混合型己酸菌培養(yǎng)液潑灑于窖池壁；濃香型酒醅入池時(shí)，根據(jù)酒醅酸度、水分情況取0.5Kg培養(yǎng)液潑灑于入窖酒醅中，隨著逐層入窖可逐層潑灑。
[0022]所述混合型己酸菌培養(yǎng)液的再生產(chǎn)方法，當(dāng)1000L培養(yǎng)液剩余500L時(shí)，可繼續(xù)補(bǔ)齊培養(yǎng)液，添加配方如下:13斤大曲粉，lKg碳酸I丐，1.5Kg乙酸鈉，200Kg酒尾，180Kg黃水，60Kg三級(jí)酒；添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證培養(yǎng)基酒度控制在27?28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，使添加的鹽類物質(zhì)溶解，溫度控制在32?33°C，培養(yǎng)6天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0X 107CFU/mL時(shí)，得到混合型己酸菌培養(yǎng)液，可以應(yīng)用于生產(chǎn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種混合型己酸菌培養(yǎng)液的生產(chǎn)方法，包括如下步驟: (1)培養(yǎng)基配方如下:1000mL水，乙酸鈉8?10g，硫酸鎂0.3?0.4g，硫酸銨0.8?lg，酉孝母膏1.5?2.5g，磷酸氫二鉀0.6?0.8g，1.5?2.5g碳酸I丐(單獨(dú)滅菌)，20?25mL乙醇(不滅菌單獨(dú)加入)； (2)121°C度下，培養(yǎng)基滅菌20分鐘; (3)將己酸菌(CK-jl)接種于培養(yǎng)基中，接種容器為若干250mL三角瓶，碳酸鈣、乙醇加入培養(yǎng)基，每個(gè)250mL三角瓶需加入15?20mL的己酸菌菌種，接種后需將沒有接種的培養(yǎng)基加入到已經(jīng)接種的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 4?5cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為1?1.5mL，接種三瓶，每瓶300?330mL，在33?35°C條件下活化培養(yǎng)5?7天，制得己酸菌種子液，己酸菌濃度為1.5?5.0 X 108CFU/mL，可以作為一級(jí)種子液使用； (4)按體積5%?8%的比例提取一級(jí)種子液，接種于二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基中，接種容器為若干5L三角瓶，二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基配方同上述培養(yǎng)基的配方，碳酸鈣、乙醇加入培養(yǎng)基，每個(gè)5L三角瓶需加入300?400mL的一級(jí)種子液，接種后需將沒有接種的培養(yǎng)基加入到已經(jīng)接種的三角瓶中，以液面在三角瓶口頸部離三角瓶頂端瓶口 4?7cm為宜，接種后采用液體石蠟液封培養(yǎng)，石蠟的使用量為2?3mL，將接種后的二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基在33?35°C的條件下培養(yǎng)10?12天，己酸菌濃度為1.5?2.5 X 10sCFU/mL，可以作為二級(jí)種子液使用，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)接種； (5)采用1000L酒缸作為培養(yǎng)容器，酒缸消毒采用酒精消毒方法，使用75%酒精2L，清洗缸體內(nèi)面反復(fù)2次，生產(chǎn)培養(yǎng)基配方如下:40?50斤大曲粉，2?2.5Kg碳酸鈣，4?5Kg乙酸鈉，350?450Kg酒尾，300?400Kg黃水，80?150Kg三級(jí)酒；按體積3%?5%的比例提取二級(jí)種子液，接種于生產(chǎn)培養(yǎng)基中；添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證生產(chǎn)培養(yǎng)基酒度控制在23?28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，添加的鹽類物質(zhì)溶解，最后加入二級(jí)種子液；溫度控制在30?35度，培養(yǎng)20?30天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0X 107CFU/mL時(shí)，制作成混合型己酸菌培養(yǎng)液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合型己酸菌培養(yǎng)液的應(yīng)用方法，在濃香型酒醅入池前取15?20Kg混合型己酸菌培養(yǎng)液潑灑于窖池壁；濃香型酒醅入池時(shí)，根據(jù)酒醅酸度、水分情況取0.5?2Kg培養(yǎng)液潑灑于入窖酒醅中，隨著逐層入窖可逐層潑灑。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合型己酸菌培養(yǎng)液的再生產(chǎn)方法，當(dāng)1000L培養(yǎng)液剩余400?500L時(shí)，可繼續(xù)補(bǔ)齊培養(yǎng)液，添加配方如下:10?15斤大曲粉，0.5?1.5Kg碳酸鈣，1?2Kg乙酸鈉，150?250Kg酒尾，150?200Kg黃水，30?lOOKg三級(jí)酒;添加順序?yàn)?先加入酒尾和黃水，測(cè)定酒度，根據(jù)酒度情況添加三級(jí)酒，最終保證培養(yǎng)基酒度控制在23?28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸鈣和乙酸鈉，隨后使用乙醇滅菌的木棒攪拌，使添加的大曲粉分散，使添加的鹽類物質(zhì)溶解，溫度控制在30?35度，培養(yǎng)5?7天時(shí)，己酸菌濃度達(dá)到5.0?9.0X 107CFU/mL時(shí)，得到混合型己酸菌培養(yǎng)液，可以應(yīng)用于生產(chǎn)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了混合型己酸菌培養(yǎng)液的生產(chǎn)方法，包括如下步驟，配制培養(yǎng)基，121℃度下，滅菌20分鐘；將己酸菌（CK-j1）接種于培養(yǎng)基中，在33～35℃條件下活化培養(yǎng)5～7天，制得一級(jí)種子液；按體積5%～8%的比例提取一級(jí)種子液，接種于二級(jí)己酸菌菌種培養(yǎng)基中，33～35℃的條件下培養(yǎng)10～12天，得到二級(jí)種子液；采用1000L酒缸作為培養(yǎng)容器，按體積3%～5%的比例提取二級(jí)種子液，接種于生產(chǎn)培養(yǎng)基中，加入二級(jí)種子液，溫度控制在30～35℃，培養(yǎng)20～30天時(shí)，制作成混合型己酸菌培養(yǎng)液。本發(fā)明符合科學(xué)規(guī)律、生產(chǎn)成本低、操作簡單，適合己酸菌培養(yǎng)液生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。
【IPC分類】C12R1/145, C12G3/02, C12N1/20
【公開號(hào)】CN105274039
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510877329
【發(fā)明人】杜新勇, 范志勇, 左國營, 陳興芬, 董蕊, 王朝青, 王釗
【申請(qǐng)人】古貝春集團(tuán)有限公司
【公開日】2016年1月27日
【申請(qǐng)日】2015年12月3日