例9
[0070] 本實(shí)施例為異穿屯、蓮內(nèi)醋類化合物3-漠乙酷基-19-(3-(4-(4-(2-漠乙酷氨基） 芐基）苯甲酸醋基）丙酷氧基）異穿屯、蓮內(nèi)醋（19)的制備： 陽071]按制備化合物Is的方法，將化合物I2與漠乙酷漠反應(yīng)，硅膠柱層析分離（展 開劑V石《/V石酸別旨=1/1)，得白色固體化合物19化176g，54% )。產(chǎn)物鑒定數(shù)據(jù)為： m. P，79.8°C . 'H-NMR (CDCI3, 400MHz) 5：8. 13 (2H, d, J =8. IHz, Ar-H), 7. 77 (4H, dd, J = 12. 4,5.細(xì)z，Ar-H)，7. 71(2H，d，J =8. 2Hz，Ar-H)，7. 27(lH，over si即al，H-14)，4. 80(2H ，s, H-15)，4. 69-4. 61 (2H, m, H-3, 12)，4. 55-4. 19 (4H, m, H-19, -COCH2C里），4. 03 (2H, s, H-3-COC里），3. 84-3. 74 (2H, m, H-NHC0CH2)，2. 53-2. 40 (3H, m, H-lla, -COC里），2. 18-2. 11 (IH, m, H -la)，2. 03-1. 98 (IH, m, H-llb)，I. 85-1. 45 (7H, m, H-化，2,6, 7a, 9)，I. 15-0. 93 (IIH, m, H-5, 化，17, 18, 20) ;IR(邸r, cm I) V :3461, 3057, 2960, 2927, 2563, 2294, 2144, 1938, 1732, 1654， 1596, 1532, 1447, 1407, 1374, 1314, 1210, 1180, 1150, 1117, 1057, 1024, 1002, 929, 843, 786, 748, 709,672, 562, 509〇 陽〇巧 實(shí)施例10
[0073] 本實(shí)施例為異穿屯、蓮內(nèi)醋類化合物3-漠乙酷基-19-(4-(4-(4-(2-漠乙酷氨基） 芐基）苯甲酸醋基）下酷氧基）異穿屯、蓮內(nèi)醋（II。）的制備： 陽074]按制備化合物Is的方法，將化合物I3與漠乙酷漠反應(yīng)，硅膠柱層析分離（展 開劑V坑M/V石酸別旨=1/1)，得白色固體化合物Iio化176g，54%)。產(chǎn)物鑒定數(shù)據(jù)為： m. P. 81. 4 °C.iH-NMR(CDCl3, 400MHz) 5 :8. 12 (2H, d, J =8. IHz, Ar-H)，7. 80 (4H, m, Ar-H)，7 .27 (IH, over si即al, H-14)，4. 81 (2H, s, H-15)，4. 61 (2H, m, H-3, 12)，4. 56-4. 20 (4H, m, H-I 9, -CO (邸2)2哩2)，4. 03 (2H, s, H-3-C0C里），3. 84-3. 74 (2H, m, H-NHCOC里），2. 46 (3H, m, H-I la, -COC里（邸2)2)，2. 24-1. 98 (4H, m, H-la, I化，-CO邸2哩2邸2)，I. 85-1. 45 (7H, m, H-化，2,6, 7a, 9)，1. 19-0. 93 (11H, m, H-5,化，17, 18, 20) ; IR (邸r, cm 1) V : 3458, 2962, 2927, 2563, 2082, 17 26, 1654, 1596, 1532, 1406, 1374, 1316, 1275, 1178, 1104, 1020, 930, 842, 749, 709, 672, 508； ESI-MS(m/z):941. 1[M+K]+。 陽0巧]實(shí)施例11
[0076] 本實(shí)施例為異穿屯、蓮內(nèi)醋類化合物3-漠乙酷基-19-巧-(4-(4-(2-漠乙酷氨基） 芐基）苯甲酸醋基）戊酷氧基）異穿屯、蓮內(nèi)醋（Iii)的制備： 陽077]按制備化合物Is的方法，將化合物I4與漠乙酷漠反應(yīng)，硅膠柱層析分離（展 開劑V石M/V^別旨=1/1)，得白色固體化合物111化186g，44% )。產(chǎn)物鑒定數(shù)據(jù)為： m.P. 80. 5°C.iH-NMR(CDCl3, 400MHz)S:8. 13 (2H,d,J= 8.IHz,Ar-H)，7. 80 (4H,m,Ar-H )，7. 70 (2H，dd,J= 8.7,1. 9Hz，Ar-H), 7.27 (IH,oversignal,H-14) ,4.80 (2H，s,H-15) ，4. 74-4. 55 (2H, m, H-3, 12)，4. 33 (4H, m, H-19, -CO (邸2)3哩2)，4. 03 (2H, s, H-3-C0C里），3. 86-3. 75 (2H, m, H-NHCOC里），2. 42 (3H, m, H-I la, -COC里（邸2)3)，2. 27-2. 14 (IH, m, H-la)，2 .10-1.97(lH，m，H-llb)，1.65(llH，m，H-lb，2,6,7a，9，-C0CH2(CH2)2CH2)，1.31-0.92(ll H, m, H-5, 7b, 17, 18, 20) ;IR(KBr, cm I) V : 3449, 2961，2926, 2081，1724, 1653, 1597, 153 2, 1449, 1407, 1316, 1275, 1176, 1099, 1019, 930, 828, 749, 709, 672, 565, 509 ;ESI-MS(m/ z) :955. 2[M+K]+。
[007引實(shí)施例I~11所得異穿屯、蓮內(nèi)醋類化合物的體外抗腫瘤活性測試： 陽0巧]采用MlT法測定化合物Ii~IU的體外抗腫瘤活性
[0080] 實(shí)驗(yàn)材料；
[0081] (1)儀器：超凈工作臺、恒溫C〇2培養(yǎng)箱、酶聯(lián)免疫檢測儀、96孔微量測定板。
[0082] (2)細(xì)胞株：人乳腺癌細(xì)胞MCF-7,人慢性髓原白血病細(xì)胞K562。 陽08引 做待測受試物：化合物Ii~I11、5-氣尿喀晚巧-Fu,陽性藥）。
[0084] 細(xì)胞培養(yǎng)： 陽0化](1)1〔尸-7培養(yǎng)條件：1?^1 1640培養(yǎng)液，內(nèi)含10%無熱原胎牛血清（尸8巧、1001]/1111^ 青霉素和100yg/mL鏈霉素，置37°C、5%C〇2飽和濕度環(huán)境中培養(yǎng)。
[0086] (2)K562培養(yǎng)條件：RPMI1640培養(yǎng)液，內(nèi)含10%無熱新生牛血清（NC巧、lOOU/mL 青霉素和100yg/mL鏈霉素，置37°C、5%C〇2飽和濕度環(huán)境中培養(yǎng)。 陽〇87] 測試方法：
[00蝴 （1)取對數(shù)生長期的細(xì)胞，W5Xl(f/孔的密度接種于96孔板，培養(yǎng)24h后加入受 試化合物。
[0089] (2)分別設(shè)置空白組、化合物組（含陽性藥），每組設(shè)五個復(fù)孔。其中化合物組分 別加入不同受試化合物，使之終濃度為10yM(總體積為200yL)。
[0090] 做似中試液培養(yǎng)4化后，每孔加入20yLMTT溶液巧mg/血)，繼續(xù)培養(yǎng)4h后， 離屯、（300化，IOmin)棄去上清液，每孔加入150yLDMS0。通過酶聯(lián)免疫檢測儀測定490皿 波長下各微孔的吸光度值（OD值）。 陽0川 （4)依據(jù)公式，得出各受試化合物在濃度為10yM時的細(xì)胞抑制率。
[0092]
陽〇9引測試結(jié)果：
[0094] 本實(shí)驗(yàn)對化合物Ii~111進(jìn)行了體外抗腫瘤活性測試，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13. 0軟 件包統(tǒng)計，MTT結(jié)果表示，組間比較采用簡單的對比實(shí)驗(yàn)分析（t檢驗(yàn)法）進(jìn)行處理。
[0095] 測試結(jié)果如表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：所有測試化合物對MCF-7細(xì)胞株均顯示出一定 抗增殖作用，其中化合物Ie的活性最強(qiáng)，除化合物13、Is外，其他化合物的活性均與5-Fu相 當(dāng)；除化合物Ii外，其他化合物對K562細(xì)胞株均顯示出一定抗增殖作用，其中化合物Ie的 活性最強(qiáng)，其次為化合物Ii。、Is、111，化合物le、Ie的活性與5-Fu相當(dāng)。
[0096] 表1化合物Iin的體外抗腫瘤活性測試
[0099] 注：* 與 5-化相比，P< 0. 05。
[0100] 由W上結(jié)果可W看出，本發(fā)明所制備的異穿屯、蓮內(nèi)醋類化合物具有抗腫瘤作用， 可用于制備抗腫瘤藥物等。 陽101] 上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的 限制，其它的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種異穿心蓮內(nèi)酯類化合物，其特征在于，所述異穿心蓮內(nèi)酯類化合物的結(jié)構(gòu)如式 I所示：其中，η等于1~4的整數(shù)成選自羥基、乙酰氧基和溴代乙酰氧基中的任意一種；1?2選 自氫或溴代乙?；?. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種異穿心蓮內(nèi)酯類化合物，其特征在于Α選自羥基或乙 酰氧基，R2為氫；或Ri為溴代乙酰氧基，1?2為溴代乙?；?。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種異穿心蓮內(nèi)酯類化合物，其特征在于：所述的異穿心蓮 內(nèi)酯類化合物具有如下Ii~In任一項(xiàng)所示的結(jié)構(gòu)式：4. 權(quán)利要求3所述的異穿心蓮內(nèi)酯類化合物的合成方法，包括如下步驟： (1) 將異穿心蓮內(nèi)酯與溴代酰氯經(jīng)酯化反應(yīng)，得到19-溴代?；?異穿心蓮內(nèi)酯； (2) 碳酸鉀及4-二甲氨基吡啶（DMAP)催化下，19-溴代?；?異穿心蓮內(nèi)酯與 4-(4-氨基苯甲?；┍郊姿峤?jīng)酯化反應(yīng)，得到異穿心蓮內(nèi)酯類化合物14; ⑶將異穿心蓮內(nèi)酯類化合物I2~I4在4-二甲氨基吡啶催化下，與乙酸酐經(jīng)酰化反 應(yīng)，得到異穿心蓮內(nèi)酯類化合物15~17，或?qū)惔┬纳弮?nèi)酯類化合物Ii~14在碳酸鉀催化 下，與溴乙酰溴經(jīng)酯化反應(yīng)，得到異穿心蓮內(nèi)酯類化合物18~I11<35. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種異穿心蓮內(nèi)酯類化合物的合成方法，其特征在于：步驟 ⑴中所述的反應(yīng)是指在1(20) 3為催化劑和二氯甲烷為溶劑條件下的反應(yīng)；步驟⑵中所述 的反應(yīng)是指以丙酮和DMSO為溶劑條件下的反應(yīng)；步驟（3)中所述的反應(yīng)是指以二氯甲烷為 溶劑條件下的反應(yīng)。6. 權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的異穿心蓮內(nèi)酯類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用， 其特征在于，所述應(yīng)用過程為：將異穿心蓮內(nèi)酯類化合物或其藥用鹽與藥用輔料混合，制成 片劑、膠囊、丸劑、栓劑、軟膠囊、口服液、混懸液或注射液。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的異穿心蓮內(nèi)酯類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征 在于：所述的藥用輔料包括填充物、稀釋劑、潤滑劑、分散劑或粘合劑。
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種異穿心蓮內(nèi)酯類化合物及其制備方法與應(yīng)用。所述異穿心蓮內(nèi)酯類化合物的結(jié)構(gòu)如式I所示，其中，n等于1～4的整數(shù)；R1選自羥基、乙酰氧基和溴代乙酰氧基中的任意一種；R2選自氫或溴代乙?；?。其合成方法為：將異穿心蓮內(nèi)酯與溴代酰氯經(jīng)酯化反應(yīng)，得到19-溴代?；?異穿心蓮內(nèi)酯，然后與4-(4-氨基苯甲?；?苯甲酸經(jīng)酯化反應(yīng)或繼續(xù)與乙酸酐經(jīng)酰化反應(yīng)或與溴乙酰溴進(jìn)行酯化反應(yīng)，得到異穿心蓮內(nèi)酯類化合物。本發(fā)明的制備方法合成路線簡單，合成產(chǎn)率高；所得產(chǎn)物抗腫瘤活性好，具有良好的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61K31/365, C07D307/92, A61P35/00
【公開號】CN105294622
【申請?zhí)枴緾N201510718226
【發(fā)明人】李晶, 張雷, 楊超
【申請人】華南理工大學(xué)
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年10月27日